本文選題：鼠尾肌腱 + Ⅰ型膠原　； 參考：《南方醫(yī)科大學(xué)》2014年博士論文

【摘要】：第一章大鼠鼠尾Ⅰ型膠原制備及理化性質(zhì) 目的：利用酸溶、鹽析提純法從大鼠鼠尾肌腱中提�、裥湍z原,檢測(cè)液態(tài)膠原的吸光度值及分子量,并對(duì)凍干的膠原膜進(jìn)行表面結(jié)構(gòu)的觀察,通過(guò)對(duì)L-929小鼠成纖維細(xì)胞增殖、細(xì)胞相容性的影響,評(píng)價(jià)大鼠鼠尾Ⅰ型膠原用于生物組織工程材料的可行性。 方法：取新鮮SD大鼠鼠尾,抽取肌腱,盡量去除肌腱腱鞘、腱周膜及血管等雜質(zhì),置于1：1000新潔爾滅溶液中浸泡10分鐘,取出后用0.9%鹽水反復(fù)沖洗后剪成1mm3組織塊,放入大燒杯中加入0.5M乙酸溶液,置于4℃冰箱中提取4天,并間斷振搖。將混合溶液于4℃下高速離心25分鐘,去除離心管底部雜質(zhì)收集上清液,緩慢加入NaCL晶體分析純,邊持續(xù)攪拌,此時(shí)有絮狀沉淀出現(xiàn),再次離心去除上清液收集沉淀,用蒸餾水浸泡沉淀3次以盡量中和NaCL,吸凈蒸餾水后再次用0.5M乙酸溶液4℃下過(guò)夜溶解沉淀,加入3mol/L的NaOH溶液,調(diào)整PH到7,將膠原溶液裝入透析袋中,置于10倍體積的蒸餾水中透析2天,去除膠原溶液中的Na+和CL-,每天更換透析液2次,得到的即為純化的鼠尾Ⅰ型膠原。留取一部分膠原溶液其余冷凍干燥成膠原膜,均置于4℃冰箱中儲(chǔ)存。以大鼠鼠尾Ⅰ型膠原標(biāo)準(zhǔn)品溶液作為對(duì)照,用紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行光譜分析,用十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)電泳法檢測(cè)其分子量及各亞型條帶的分布情況,掃描電子顯微鏡觀察膠原膜的表面結(jié)構(gòu)特征。取液態(tài)膠原溶液及膠原膜,經(jīng)Y射線輻照滅菌后,L-DMEM培養(yǎng)基為浸提介質(zhì),按0.5cm2/ml培養(yǎng)基比例,在37℃條件下浸提48h制備浸提液,以L-DMEM培養(yǎng)基為陰性對(duì)照。取指數(shù)生長(zhǎng)期L-929小鼠成纖維細(xì)胞調(diào)整濃度為4×104個(gè)/ml,按100μl/孔的量接種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板,置于37℃5%CO2培養(yǎng)箱中孵育24h,換用浸提液繼續(xù)培養(yǎng),陰性對(duì)照繼續(xù)用L-DMEM培養(yǎng)基。分別于1,3,7天,每孔加入0.5%MTT(5mg/ml)溶液20μl,培養(yǎng)箱中繼續(xù)孵育4小時(shí)后,吸棄MTT溶液,每孔加入DMSO溶液150μl,震蕩10分鐘后用酶標(biāo)儀檢測(cè)各孔吸光度值,計(jì)算細(xì)胞增殖率并評(píng)價(jià)細(xì)胞毒性級(jí)別。 結(jié)果：經(jīng)酸溶法提取的大鼠鼠尾肌腱膠原溶液為半透明、粘稠液體,經(jīng)過(guò)鹽析純化后變得更加透明,呈膠凍狀。冷凍干燥后的膠原膜呈顏色潔白蓬松海綿狀,具有一定的彈性及伸展性。紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行光譜分析顯示：經(jīng)過(guò)酸溶、鹽析提純獲得的大鼠鼠尾肌腱膠原溶液的最大吸收峰為299nm,而大鼠鼠尾Ⅰ型膠原標(biāo)準(zhǔn)品溶液(Sigma, USA)最大吸收峰為300nm,符合Ⅰ型膠原的特征。SDS-PAGE電泳結(jié)果顯示自提膠原溶液主要有3個(gè)條帶組成：分子量大約為210KDa的膠原蛋白分子β鏈、120KDa和110KDa的α1鏈和α2鏈。與鼠尾Ⅰ型膠原標(biāo)準(zhǔn)品溶液電泳特征完全符合,表明白提膠原為Ⅰ型膠原蛋白而且純度亦很高。掃描電鏡觀察,可見纖維網(wǎng)格狀結(jié)構(gòu),孔徑在100-250μ m之間。經(jīng)過(guò)γ射線輻照滅菌后,液性膠原有部分交聯(lián)表現(xiàn),即凝結(jié)成塊狀,而凍干的膠原膜無(wú)明顯的變化。通過(guò)對(duì)L-929小鼠成纖維細(xì)胞的細(xì)胞毒性評(píng)級(jí)結(jié)果顯示,液性膠原組及凍干膠原膜組在1,3,7天的細(xì)胞生長(zhǎng)及形態(tài)均正常,細(xì)胞毒性為0級(jí)或1級(jí),與對(duì)照組相比差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論：經(jīng)過(guò)酸溶鹽析提純法可以從大鼠鼠尾肌腱中提取純度較高的Ⅰ型膠原,而且不論膠原溶液還是凍干的膠原膜,均無(wú)明顯的細(xì)胞毒性,具有良好的細(xì)胞相容性,為Ⅰ型膠原構(gòu)建組織工程支架提供了理論依據(jù)。 第二章不同條件下京尼平交聯(lián)膠原海綿的體外初步研究 目的：探討不同溫度及京尼平濃度交聯(lián)Ⅰ型膠原海綿支架后的各種理化性質(zhì)的改變。通過(guò)對(duì)交聯(lián)后的膠原海綿支架的微觀結(jié)構(gòu)、溶脹率、交聯(lián)度、力學(xué)特性、體外細(xì)胞毒性及膠原酶降解等理化性質(zhì)及細(xì)胞相容性的檢測(cè),來(lái)評(píng)估京尼平交聯(lián)后的膠原海綿支架作為骨軟骨組織工程材料的可行性。 方法：將凍干的膠原海綿重新用0.5M乙酸徹底溶解后調(diào)整PH到7。取48孔細(xì)胞培養(yǎng)板,每孔注入膠原溶液800u l并凍干。用PBS配制0.1、0.3、0.5wt%的京尼平溶液,待充分溶解后將膠原支架浸入10ml京尼平溶液中,分別于4、20、37℃條件下交聯(lián)24h。蒸餾水反復(fù)沖洗浸泡交聯(lián)后的支架以去除未與膠原分子結(jié)合的京尼平。再次凍干后即得到9組京尼平交聯(lián)后的膠原支架：0.1%4℃組；0.3%4℃組：0.5%4℃組；0.1%20℃組；0.3%20℃組；0.5%20℃組；0.1%37℃組：0.3%37℃組和0.5%37℃組,以未交聯(lián)的膠原支架作為對(duì)照組,將各組密封于塑封袋內(nèi)待用。先行各組材料的大體觀察后制作掃描電鏡標(biāo)本,用雙面導(dǎo)電膠固定樣本于銅臺(tái)上,噴金后在鏡下觀察各組膠原支架的形態(tài)特征。使用Instron5540材料疲勞測(cè)試機(jī)進(jìn)行力學(xué)測(cè)試,檢測(cè)材料的抗壓縮強(qiáng)度,以1.5mm/min的速率于垂直方向使支架發(fā)生形變直至失效。載荷-形變曲線上的最大載荷與材料橫截面積的比即為最大壓縮強(qiáng)度。將各組材料稱重后(w0)室溫下浸入PBS溶液中3h,用濾紙吸干表面水分后再次稱重(w),增加的重量與原始重量的比率即為材料的溶脹率,以未交聯(lián)的支架作為對(duì)照。使用茚三酮分析來(lái)評(píng)估各組材料的交聯(lián)度,稱重后的每個(gè)材料(7mg)加入4ml茚三酮溶液,于100℃水浴中加熱20分鐘,待冷卻到20℃后加入5m150%異丙醇,紫外可見分光光度計(jì)于570nm檢測(cè)吸光度,用不同濃度(1.0-5.Omg/ml)的甘氨酸溶液作為標(biāo)準(zhǔn),并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。用以下公式計(jì)算交聯(lián)度(CD):CD=(未交聯(lián)樣本中的自由氨基摩爾數(shù)-交聯(lián)樣本中的自由氨基摩爾數(shù))／未交聯(lián)樣本中的自由氨基摩爾數(shù)。體外膠原酶降解試驗(yàn)在4℃條件下進(jìn)行,將每個(gè)樣本浸入到2ml含有200μg Ⅰ型膠原酶的PBS溶液中,12h后加入200μ1的0.2M EDTA終止反應(yīng),于冰浴中冷卻混合物,上清液加入6M HCl于110℃水解24h,水解完成后加入活性炭以去除色素,再次過(guò)濾后取濾液2ml,加入2ml檸檬酸緩沖液和2m10.05M氯胺T,室溫氧化10分鐘后加入高氯酸2ml,放置10分鐘后最后加入2ml對(duì)二甲氨基苯甲醛,65℃下顯色10分鐘,冷卻后紫外可見分光光度計(jì)于570hm檢測(cè)羥脯氨酸吸光度,用不同濃度(0-5.0mg/ml)的羥脯氨酸溶液作為標(biāo)準(zhǔn),并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。交聯(lián)樣本中與未交聯(lián)樣本中的羥脯氨酸含量比即為降解率。按照1.25cm2膠原支架表面積/ml培養(yǎng)基比例,在37℃條件下浸提48h制備各組交聯(lián)膠原支架的浸提液,以L-DMEM培養(yǎng)基為試劑對(duì)照。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期L-929小鼠成纖維細(xì)胞,MTT法檢測(cè)細(xì)胞毒性,計(jì)算細(xì)胞相對(duì)增殖度并進(jìn)行細(xì)胞毒性評(píng)級(jí)。另外取3周齡SD大鼠的關(guān)節(jié)軟骨和劍突,用酶消化法獲取軟骨細(xì)胞,培養(yǎng)至第二代后以3×105個(gè)/ml接種于各組支架,于接種后的第一天和第三天用掃描電鏡觀察軟骨細(xì)胞對(duì)支架的粘附及生長(zhǎng)情況。 結(jié)果：京尼平交聯(lián)后的膠原支架大體形狀無(wú)明顯變化,外觀呈現(xiàn)藍(lán)色,顏色的深淺隨著不同的交聯(lián)條件而發(fā)生變化,溫度越高、京尼平的濃度越高則顏色越深。各組支架內(nèi)部橫截面的結(jié)構(gòu)特征表現(xiàn)為三維、內(nèi)部互相連通的多孔狀結(jié)構(gòu),隨著交聯(lián)溫度及京尼平濃度的升高,由未交聯(lián)組的纖維網(wǎng)格狀結(jié)構(gòu)向交聯(lián)組的板層狀結(jié)構(gòu)過(guò)渡,盡管孔徑(100-250μm)沒(méi)有發(fā)生改變,但是板層狀結(jié)構(gòu)的排列越來(lái)越緊密,而且膠原的絲狀纖維在交聯(lián)組徹底消失不見。交聯(lián)組支架的抗壓縮強(qiáng)度亦隨著交聯(lián)溫度、京尼平濃度的增高而加大,與未交聯(lián)組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。交聯(lián)支架的溶脹率明顯低于未交聯(lián)組,0.3%370C、0.5%20℃和0.5%37℃組明顯低于0.1%4℃組(P0.05)。在0.1%京尼平溶液中交聯(lián),所測(cè)得的交聯(lián)度為6.90-26.48%,0.3%和0.5%組中交聯(lián)度明顯高于0.1%組。細(xì)胞毒性檢測(cè)結(jié)果顯示,在不同時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞相對(duì)增殖度均在80%以上,細(xì)胞毒性評(píng)級(jí)均為0-1級(jí)。京尼平交聯(lián)24h后,各組支架的抗膠原酶降解能力明顯增強(qiáng),0.3%20℃、0.3%37℃組及0.5%各組與0.1%4℃及0.3%4℃組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。軟骨細(xì)胞接種于京尼平交聯(lián)支架第一天,軟骨細(xì)胞只是粘附于支架內(nèi)部,到第三天,軟骨細(xì)胞與支架粘附較緊密。 結(jié)論：京尼平可以用作Ⅰ型膠原海綿支架的交聯(lián),盡管產(chǎn)生藍(lán)色色素,但是交聯(lián)后支架的各項(xiàng)理化特征均令人滿意�；谖覀兊臄�(shù)據(jù),理想的交聯(lián)條件為0.3%京尼平濃度和37℃下交聯(lián),支架擁有良好的溶脹率、抗壓縮強(qiáng)度、交聯(lián)度、抗膠原酶降解能力以及較低的細(xì)胞毒性,因而具備作為骨軟骨組織工程支架的條件。 第三章Ⅰ型膠原/富血小板血漿支架的制備及其體外生長(zhǎng)因子釋放的初步研究 目的：將二步離心法提取的富血小板血漿(PRP)分別用牛凝血酶和Ⅰ型膠原激活,按一定比例將激活后的PRP與大鼠Ⅰ型膠原復(fù)合凍干制備Ⅰ型膠原/富血小板血漿(COL/PRP)支架,通過(guò)對(duì)血小板血漿成分的分析、支架的結(jié)構(gòu)特征、力學(xué)強(qiáng)度、細(xì)胞毒性檢測(cè),以及測(cè)定血小板四種生長(zhǎng)因子持續(xù)體外釋放的含量,來(lái)初步探討Ⅰ型膠原/血小板血漿支架用于骨修復(fù)材料的可行性。 方法：SD大鼠心臟取血,根據(jù)體重的不同每只可采6-8ml,用動(dòng)物血液分析儀檢測(cè)全血中的白細(xì)胞、紅細(xì)胞及血小板的含量,然后將全血于1500rmp下離心10分鐘,血液樣本即分為三層：上層透亮為血清,中間薄層為血小板及白細(xì)胞,下層為紅細(xì)胞,小心吸取中上層的血清、白細(xì)胞、血小板和與中間層相連的少量紅細(xì)胞(這樣可以收集較多的血小板),再次以3000rmp離心10分鐘,上層為貧血小板血漿,下層為富血小板血漿和細(xì)胞層。棄去上層貧血小板血漿,并用1ml注射器吸除最下面的紅細(xì)胞,吹打均勻后可以得到500μl左右的PRP,再次用動(dòng)物血液分析儀檢測(cè)樣本中的白細(xì)胞、紅細(xì)胞及血小板的含量以比較提取PRP過(guò)程前后的細(xì)胞數(shù)量變化。將PRP置于-80℃保存待用。將凍干的膠原海綿用0.5M乙酸徹底溶解后調(diào)整PH為7,取干凈的48孔細(xì)胞培養(yǎng)板,并將PRP常溫下復(fù)融,分為3組：凝血酶激活組為300μl PRP+30μl (30IU)牛凝血酶,膠原激活組為300u1PRP+300u1I型膠原溶液,空白組為600μlⅠ型膠原溶液。激活10分鐘后,凝血酶組每孔加入300μl的1型膠原溶液,各組混合均勻后凍干。掃描電鏡觀察支架的形態(tài)特征,用材料疲勞測(cè)試機(jī)進(jìn)行力學(xué)強(qiáng)度測(cè)試。剩余支架經(jīng)過(guò)環(huán)氧乙烷消毒后按照第二章方法制備浸提液,以L-DMEM培養(yǎng)基為試劑對(duì)照,應(yīng)用L-929小鼠成纖維細(xì)胞MTT法檢測(cè)細(xì)胞毒性。將消毒后的凝血酶激活組和膠原激活組支架放入消毒的青霉素小瓶?jī)?nèi),每個(gè)小瓶加入2ml的L-DMEM培養(yǎng)基,置于37℃5%CO2培養(yǎng)箱中浸提,于浸提后的第1、4、7、10天吸取1ml的浸提液,然后再補(bǔ)充lml的L-DMEM培養(yǎng)基。收集的浸提液密封于1.8ml的凍存管置于-80℃保存,待全部時(shí)間點(diǎn)的浸提液收集完畢后,用Elisa法檢測(cè)浸提液中的間隔釋放的大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)、大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)、大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)和大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的含量。結(jié)果：凍干后的COL/PRP支架外觀為淡紅色,與單純膠原支架相比質(zhì)地稍脆,具有一定的彈性。掃描電鏡下觀察,可見比較均勻一致的多孔結(jié)構(gòu),孔隙之間互相連通,孔徑在50-80μ m之間。離心后的PRP中血小板含量是全血中的3.91±0.98倍,而白細(xì)胞和紅細(xì)胞含量分別是全血中的1.11±0.40倍和0.31±0.20倍。COL/PRP支架的抗壓縮強(qiáng)度近似于單純膠原支架組,組間差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。通過(guò)MTT法對(duì)L-929小鼠成纖維細(xì)胞的細(xì)胞毒性評(píng)級(jí)結(jié)果顯示,COL/PRP支架無(wú)細(xì)胞毒性,而且細(xì)胞增殖率于第一和第三天高于陰性對(duì)照組。經(jīng)ELISA法檢測(cè)COL/PRP支架釋放的四種生長(zhǎng)因子含量結(jié)果表明：TGF-β1含量在第4天達(dá)到高峰,然后2激活組組于第7天和第10天濃度逐漸下降,但是與對(duì)照組相比,均能維持相對(duì)較高的濃度；FGF和PDGF含量隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而呈現(xiàn)逐步下降的趨勢(shì),但是凝血酶組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的FGF和PDGF釋放量均明顯高于膠原組；VEGF含量隨著時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)波浪式釋放趨勢(shì),第1天至第4天呈現(xiàn)上升趨勢(shì),第7天出現(xiàn)下降,而第10天又出現(xiàn)上升,并且2組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的VEGF釋放量均相當(dāng)。 結(jié)論：經(jīng)過(guò)凍干法制備的COL/PRP支架擁有良好的孔隙率、抗壓縮強(qiáng)度、以及無(wú)細(xì)胞毒性。釋放的四種生長(zhǎng)因子可以維持較長(zhǎng)的時(shí)間和較高的濃度,為其作為骨修復(fù)材料的應(yīng)用提供了理論依據(jù)。 第四章COL/PRP支架修復(fù)大鼠顱蓋骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究 目的：建立大鼠顱蓋骨缺損模型,植入制備的COL/PRP支架,通過(guò)組織學(xué)(HE染色和Masson三色染色)、Micro-CT掃描評(píng)價(jià)骨缺損的修復(fù)情況,為其將來(lái)在臨床上的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。 方法：制備酶激活的COL/PRP支架和單純膠原支架(同第三章),經(jīng)過(guò)環(huán)氧乙烷滅菌后待用。取體重為250g的大鼠48只,隨機(jī)分成3組,0.3%苯巴比妥鈉腹腔注射麻醉,無(wú)菌操作暴露顱蓋骨,用直徑5mm環(huán)形鉆頭于單側(cè)顱蓋骨造一圓形缺損區(qū),邊鉆邊滴注生理鹽水,防止損傷下面的硬腦膜。將手術(shù)動(dòng)物分為三組：COL/PRP組、單純COL支架組和空白組,植入材料前用生理鹽水沖洗切口以去除組織碎屑,然后按組別應(yīng)用相對(duì)應(yīng)的材料填充缺損區(qū)。分別于術(shù)后的4,8,12周每組隨機(jī)選取4只大鼠,處死后取材,高分辨率Micro-CT掃描標(biāo)本并三維重建。然后標(biāo)本脫鈣進(jìn)行組織學(xué)切片,行HE染色和Masson三色染色,光鏡下觀察缺損區(qū)域的組織修復(fù)情況。 結(jié)果：術(shù)后動(dòng)物飲食、活動(dòng)均正常,切口部位無(wú)紅腫、滲液及化膿等,均為一期愈合。于4周取材時(shí),COL/PRP組與膠原組無(wú)顯著區(qū)別,缺損區(qū)域均有一薄層膜狀組織覆蓋,空白組雖然也有膜狀組織,但是更為透明。術(shù)后8周,COL/PRP組覆蓋缺損區(qū)域的膜狀組織相對(duì)較厚,而膠原組和空白組依次薄于前者,12周時(shí)情況愈發(fā)明顯,各組均未見組織壞死情況的發(fā)生。術(shù)后4周,COL/PRP支架組骨缺損區(qū)域未見明顯的新生骨組織形成,主要由纖維組織填充,可見大量的成纖維細(xì)胞,新生毛細(xì)血管較豐富。膠原支架組骨缺損區(qū)域可見纖維結(jié)締組織填充,其間仍然可見未被完全降解的經(jīng)Masson染色染成淡藍(lán)色的膠原纖維,亦可見少量的新生血管形成,宿主骨邊緣未見新骨生成�？瞻讓�(duì)照組骨缺損區(qū)域被纖維結(jié)締組織填充,與另外二組相比相對(duì)較薄,纖維結(jié)締組織內(nèi)幾乎無(wú)血管長(zhǎng)入,宿主骨邊緣未見新生骨組織生成。術(shù)后8周,COL/PRP支架組骨缺損區(qū)域可見相對(duì)不成熟的板層骨出現(xiàn),與纖維結(jié)締組織一起填充缺損區(qū)域。膠原支架組骨缺損區(qū)域被纖維結(jié)締組織填充,其間及宿主骨周圍未見新生骨組織,Masson染色亦可見淡藍(lán)色的膠原纖維。空白對(duì)照組骨缺損區(qū)域被纖維結(jié)締組織填充,其間及宿主骨周圍未見新生骨組織,與4周時(shí)相比變化不大。術(shù)后12周,COL/PRP支架組于骨缺損區(qū)域可見相對(duì)成熟的板層骨,可以填充大部分缺損區(qū)域,余下則被纖維結(jié)締組織填充。膠原支架組骨缺損區(qū)域可見少量新生骨組織及大量纖維結(jié)締組織填充,新生骨組織開始于宿主骨的周圍,Masson染色染仍然可見淡藍(lán)色的膠原纖維�？瞻讓�(duì)照組仍被纖維結(jié)締組織填充,而且其厚度無(wú)明顯增加,其間及宿主骨邊緣未見新生骨組織。高分辨率Micro-CT掃描并三維重建結(jié)果顯示,術(shù)后4周COL/PRP支架組骨缺損區(qū)域未見明顯縮小,宿主骨邊緣有小量的骨修復(fù)發(fā)生,8周時(shí)缺損區(qū)域開始變得不規(guī)則,由宿主骨向外延伸區(qū)域可見密度較高的礦化新生骨組織,12周時(shí)缺損區(qū)域進(jìn)一步縮小,大部分為新生的骨組織覆蓋,密度接近于正常的宿主骨。由Micro-CT自帶分析軟件可以檢測(cè)骨缺損區(qū)域的各項(xiàng)成骨指標(biāo),隨著時(shí)間的延長(zhǎng),大部分指標(biāo)有逐漸增高的趨勢(shì),從而表明COL/PRP支架有誘導(dǎo)成骨的能力。膠原支架組術(shù)后在Micro-CT上表現(xiàn)為,宿主骨邊緣有少量的成骨反應(yīng),8周和12周時(shí)缺損區(qū)域似乎有縮小的趨勢(shì),但是不如COL/PRP組明顯,分析軟件得出8周和12周的各項(xiàng)成骨指標(biāo)也高于4周,表明膠原或許存在一定的骨誘導(dǎo)能力�？瞻捉M術(shù)后在Micro-CT上表現(xiàn)無(wú)明顯的變化,雖然宿主骨邊緣有少許的成骨反應(yīng),但是整個(gè)缺損區(qū)域的變化不明顯,盡管8周和12周的各項(xiàng)成骨指標(biāo)均高于4周,但是影像學(xué)表明空白組的修復(fù)能力是最差的。 結(jié)論：本研究中所制備的COL/PRP支架具有良好的骨誘導(dǎo)和修復(fù)骨缺損的能力。
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【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R318.08

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 余海,廖小宜,周志瑜;鼠尾肌腱膠原蛋白的提取及凝膠的制備[J];海南醫(yī)學(xué);2000年03期

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本文編號(hào)：1914339