本文選題：去細(xì)胞 + 肝　； 參考：《解剖學(xué)報(bào)》2017年04期

【摘要】：目的通過灌注法制備大鼠單葉肝去細(xì)胞生物支架,并對(duì)其進(jìn)行鑒定。方法健康成年SD大鼠20只,隨機(jī)分為去細(xì)胞組和正常對(duì)照組,每組10只。去細(xì)胞組經(jīng)門靜脈灌胃針插管,恒溫37℃依次灌注肝素化PBS溶液,1%Triton X-100(p H 7.5~8.0)及PBS溶液。HE、Masson染色及掃描電子顯微鏡觀察組織學(xué)及超微結(jié)構(gòu)改變;免疫熒光結(jié)合4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)觀察2組膠原蛋白Ⅳ和Ⅰ、層黏連蛋白和纖維連接蛋白觀察細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分;DNA定性和定量分析組織中殘留DNA濃度和片段長(zhǎng)度;聚甲基丙烯酸甲酯鑄型觀察肝臟內(nèi)血管分布情況。結(jié)果 Triton X-100灌注4h左右即可制備單葉肝臟去細(xì)胞生物支架。在灌注過程中,肝內(nèi)細(xì)胞和細(xì)胞碎片逐漸被清洗,最終變成半透明狀。HE、Masson、免疫熒光染色及掃描電子顯微鏡顯示,去細(xì)胞組肝生物支架較完整地保留了細(xì)胞外支架的成分,未見明顯細(xì)胞及細(xì)胞核成分殘留;去細(xì)胞組支架DNA殘留量較正常對(duì)照組下降了97.32%,瓊脂糖凝膠電泳未見明顯的DNA條帶。血管鑄型標(biāo)本顯示,去細(xì)胞組血管分布與正常對(duì)照組相仿,其分支完整、清晰。結(jié)論運(yùn)用Triton X-100灌注法所制備的大鼠單葉肝生物支架去細(xì)胞徹底,較完整地保留細(xì)胞外基質(zhì)和血管網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),是一種簡(jiǎn)單易行且較為理想的制備實(shí)驗(yàn)用單葉肝生物支架的方法。
[Abstract]:Objective to prepare and identify the acellular scaffold of rat single lobe liver by perfusion method. Methods 20 healthy adult SD rats were randomly divided into acellular group and normal control group with 10 rats in each group. In the acellular group, the heparinized PBS solution was perfused at 37 鈩，

本文編號(hào)：1886298