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脫細(xì)胞兔髓核支架的形態(tài)學(xué)及體外細(xì)胞毒性研究

發(fā)布時間:2018-04-24 14:42

  本文選題:支架 + 髓核; 參考:《實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志》2014年07期


【摘要】:目的:運(yùn)用去污劑及核酸酶法制備兔脫細(xì)胞髓核支架,體外評價該支架的形態(tài)學(xué)及細(xì)胞毒性改變,探討其作為組織工程髓核支架的可行性。方法:取健康成年新西蘭大白兔髓核組織50枚,隨機(jī)分為新鮮對照組(n=25)和脫細(xì)胞組(n=25),后者用0.3%TritonX-100+0.5%脫氧膽酸鈉聯(lián)合核酸酶進(jìn)行脫細(xì)胞處理24 h,通過肉眼觀、病理染色及掃描電鏡觀察髓核形態(tài)改變、細(xì)胞脫除和細(xì)胞外基質(zhì)變化情況,并取兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞為對象,運(yùn)用CCK-8法及死活細(xì)胞染色法在體外評價該支架的細(xì)胞毒性。結(jié)果:髓核脫細(xì)胞支架形態(tài)保持良好,細(xì)胞清除徹底,細(xì)胞外膠原基質(zhì)結(jié)構(gòu)破壞較小,與正常髓核相比,支架組織及其浸提液對兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞無明顯毒副作用。結(jié)論:TritonX-100與脫氧膽酸鈉聯(lián)合核酸酶可有效脫除髓核細(xì)胞成分,較好地保留細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu),且該支架對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞無明顯毒副作用,可以作為髓核組織工程研究的理想材料。
[Abstract]:Objective: to prepare rabbit nucleus pulposus scaffold with decontamination agent and nuclease method, to evaluate the morphology and cytotoxicity of the scaffold in vitro, and to explore the feasibility of the scaffold as tissue engineering nucleus pulposus. Method: 50 healthy adult New Zealand white rabbit nucleus pulposus were randomly divided into fresh control group (n=25) and acellular group (n=25), and the latter used 0.. 3%TritonX-100+0.5% deoxycholic acid sodium combined with nuclease for 24 h. The morphological changes of nucleus pulposus, cell removal and extracellular matrix change were observed by naked eye view, pathological staining and scanning electron microscope, and rabbit bone marrow mesenchymal stem cells were taken as the object. The cells of the scaffold were evaluated by CCK-8 method and dead cell staining method in vitro. Results: the morphology of the nucleus pulposus acellular scaffolds remained well, the cells were cleared thoroughly, the destruction of the extracellular matrix structure was small. Compared with the normal nucleus, the scaffold tissue and its extract had no toxic side effects on the rabbit bone marrow mesenchymal stem cells. Conclusion: the combined nuclease of TritonX-100 and sodium deoxycholate can effectively remove the components of the nucleus pulposus cells. This scaffold has no obvious toxic and side effects on bone marrow mesenchymal stem cells, and can be used as an ideal material for tissue engineering of nucleus pulposus.

【作者單位】: 南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院骨科中心;
【基金】:國家自然科學(xué)基金面上項目(編號:81372869)
【分類號】:R318.08

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號:1797066


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