本文選題：骨髓 + 間質(zhì)干細胞��； 參考：《中國組織工程研究》2017年17期

【摘要】：背景:成骨細胞是骨組織構(gòu)建的重要組織細胞之一。成骨細胞取材困難,不同方法獲得的成骨細胞純度及鈣化能力不盡相同。目的:比較小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞成骨誘導(dǎo)、細胞系MC3T3-E1成骨誘導(dǎo)和小鼠顱骨原代細胞培養(yǎng)3種方法獲得的成骨細胞的純度及鈣化能力。方法:采用貼壁純化法分離出小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞,傳至3代后用成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)21 d;將前成骨細胞系MC3T3分別用成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液1和成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液2誘導(dǎo)21 d;使用Ⅰ型膠原酶消化法取得乳鼠顱骨原代成骨細胞。對3種方法獲得的成骨細胞進行茜素紅鈣結(jié)節(jié)染色,觀察其成骨特性。結(jié)果與結(jié)論:(1)骨髓間充質(zhì)干細胞誘導(dǎo)后鈣結(jié)節(jié)平均為16.3個/低倍鏡視野;(2)前成骨細胞系MC3T3誘導(dǎo)培養(yǎng)液1組可觀察到稀疏的鈣結(jié)節(jié),平均為1.7個/低倍鏡視野,誘導(dǎo)培養(yǎng)液2組可觀察到密集的鈣結(jié)節(jié),平均為44.6個/低倍鏡視野,兩種誘導(dǎo)液相比鈣結(jié)節(jié)形成能力差異有顯著性意義(P0.01);(3)原代成骨細胞鈣結(jié)節(jié)平均為0.6個/低倍鏡視野;(4)除MC3T3誘導(dǎo)液1組與原代成骨細胞相比差異無顯著性意義外,其余兩兩相比成骨能力差異均有顯著性意義(P0.01);(5)由于骨髓間充質(zhì)干細胞分離培養(yǎng)具有更多不可控因素,因此MC3T3細胞用含有地塞米松的誘導(dǎo)培養(yǎng)液2進行成骨誘導(dǎo)方法較好。
[Abstract]:Background: osteoblasts are one of the important tissue cells in bone tissue construction.The purity and calcification ability of osteoblasts obtained by different methods are different.Aim: to compare the purity and calcification of mouse bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) induced by osteogenic induction, MC3T3-E1 osteogenesis induction and primary culture of mouse skull cells.Methods: mouse bone marrow mesenchymal stem cells were isolated by adherent purification.The osteoblasts were induced by osteoblast induction medium for 21 days, MC3T3 cells were induced with osteogenic medium 1 and osteogenic culture medium 2 for 21 days, and the primary osteoblasts were obtained by type I collagenase digestion.The osteoblasts obtained by three methods were stained with alizarin red calcium nodule and their osteogenic characteristics were observed.Results and conclusion the average number of calcium nodules induced by bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) was 16.3 / LVE2) the sparse calcium nodules were observed in the culture medium of preosteoblast cell line MC3T3, with an average of 1.7 / LVEL.Dense calcium nodules were observed in group 2, with an average of 44.6 / low power field of vision.There was significant difference in the ability of calcium nodule formation between the two inducers (P 0.01). The average calcium nodule of primary osteoblasts was 0.6 / low magnification field of vision (LVE4). There was no significant difference between group 1 and primary osteoblasts except MC3T3 inducer group 1 and primary osteoblast.There were significant differences in osteogenic ability between the other two groups. (P 0.01) because the isolation and culture of bone marrow mesenchymal stem cells had more uncontrollable factors, it was better for MC3T3 cells to use dexamethasone induced culture medium 2 to induce osteogenesis.
【作者單位】： 華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院骨科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助(81472134)~~
【分類號】：R318.08;R68

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本文編號：1765931