發(fā)布時(shí)間：2018-03-30 02:01

  本文選題：軟骨組織工程　切入點(diǎn)：絲素蛋白　出處：《中國修復(fù)重建外科雜志》2014年07期

【摘要】：目的制備不同質(zhì)量比的絲素蛋白復(fù)合膠原蛋白支架,分析其綜合性能,優(yōu)選軟骨組織工程支架材料。方法按絲素蛋白∶膠原蛋白不同質(zhì)量比,采用真空冷凍干燥法制備3種復(fù)合支架,分別為4∶2(A組)、4∶4(B組)和4∶8(C組);檢測每組復(fù)合支架的孔隙率、吸水膨脹率、力學(xué)性能及孔徑。采用密度梯度離心法分離培養(yǎng)4周齡雄性Wistar大鼠BMSCs,取第3代BMSCs接種于各組復(fù)合支架,培養(yǎng)1、3、5、7、9、11、13 d,MTT檢測支架內(nèi)細(xì)胞增殖情況;培養(yǎng)14 d采用HE染色和掃描電鏡觀察細(xì)胞在支架內(nèi)部增殖、分布情況。結(jié)果 A、B、C組支架孔隙率分別為94.6%±1.6%、80.6%±1.1%、60.6%±1.0%,A組顯著高于B、C組,B組高于C組(P0.05)。吸水膨脹率分別為1 523.7%±186.6%、1 091.0%±151.6%、659.6%±161.4%,A組顯著高于B、C組,但組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=6.67,P=0.08);各組支架均具有較好的黏彈性,A、B、C組彈性模量分別為(23.1±2.5)、(25.1±2.3)、(29.8±2.6)kPa,組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=2.00,P=0.28),符合關(guān)節(jié)軟骨彈性模量值(4~35 kPa);A、B、C組支架孔徑分別為(103±12)、(80±15)、(60±16)μm,3組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=2.22,P=0.26)。MTT檢測示,7、9、11、13 d時(shí)A組細(xì)胞增殖高于B、C組(P0.05)。培養(yǎng)14 d,掃描電鏡觀察示A組支架孔徑大小較一致,相通性好,細(xì)胞在支架內(nèi)部生長良好,伸展充分,基質(zhì)分泌多;B、C組支架孔徑較小,孔隙間相通性差,細(xì)胞在內(nèi)部生長較差;HE染色和掃描電鏡示支架內(nèi)部A組細(xì)胞數(shù)量明顯多于B、C組。結(jié)論以絲素蛋白∶膠原蛋白質(zhì)量比為4∶2制備復(fù)合支架具有合適的孔隙率、吸水膨脹率、彈性模量和孔徑,細(xì)胞在支架內(nèi)部增殖更好,是軟骨組織工程的理想支架材料。
[Abstract]:Objective to prepare fibroin composite collagen scaffolds with different mass ratios, analyze their comprehensive properties and select cartilage tissue engineering scaffolds. Three kinds of composite scaffolds were prepared by vacuum freeze-drying (group 4: 2A, group 4: 4: 4B) and group C (group C, 4: 8). The porosity and water swelling rate of each group of composite scaffolds were measured. Mechanical properties and pore diameter. BMSCs of 4-week-old male Wistar rats were isolated and cultured by density gradient centrifugation. The third generation of BMSCs was inoculated into each group of composite scaffolds. The cell proliferation in the scaffold was observed by HE staining and scanning electron microscope on the 14th day of culture. Results the porosity of stent in group A was 94.6% 鹵1.60.The porosity of group A was significantly higher than that of group B (P 0.05). The swelling rate of group A was 1 523.7% 鹵186.6% 鹵151.6% 鹵659.6% 鹵161.4%, respectively, and that of group A was significantly higher than that of group B (P < 0.05), and that of group A was significantly higher than that of group B (P < 0.05), and that of group A was significantly higher than that of group B (P < 0.05), and that of group A was significantly higher than that of group B (P < 0.05), and that of group A was significantly higher than that of group B (P < 0.05). However, there was no significant difference between the two groups, and the elastic modulus of each group was 23.1 鹵2.5kPa29.8 鹵2.6kPa.There was no significant difference between the two groups, and there was no significant difference between the two groups, which was consistent with the elastic modulus of articular cartilage and the diameter of the scaffold in ABC group. There was no significant difference among the three groups (103 鹵12), 80 鹵15 (60 鹵16) 渭 m ~ (-1). MTT assay showed that the proliferation of cells in group A was higher than that in group A at day 1113. The diameter of stents in group A was the same as that in group A after 14 days of culture, and the diameter of stents in group A was the same as that in group A by scanning electron microscopy (SEM), the results showed that the cell proliferation of group A was higher than that of group B at 1113 d. The cells grew well and stretched well in the scaffold. The pore diameter of the scaffold was smaller and the interpore permeability was poor in the group of multi-secretory matrix. The results of HE staining and SEM showed that the number of cells in group A was significantly higher than that in group B (C). Conclusion the composite scaffold prepared by 4:2 ratio of silk fibroin to collagen has a suitable porosity and water swelling rate. With elastic modulus and pore diameter, cells proliferate better in the scaffold, which is the ideal scaffold material for cartilage tissue engineering.
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)研究生院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生裝備研究所;天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院骨科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(11072266)~~
【分類號】：R318.08

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本文編號：1683835