基于檢測近紅外發(fā)光和探針熒光的單態(tài)氧定量分析方法
發(fā)布時(shí)間:2018-03-06 14:23
本文選題:光敏化 切入點(diǎn):單態(tài)氧 出處:《福建師范大學(xué)》2012年博士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:單態(tài)氧(Singlet oxygen,1O2)是光動(dòng)力學(xué)療法(Photodynamic therapy, PDT)過程中Ⅱ型光化學(xué)反應(yīng)的主要細(xì)胞毒性物質(zhì)。隨著PDT基礎(chǔ)研究的不斷深入和臨床應(yīng)用的廣泛開展,如何定量檢測PDT過程中產(chǎn)生的1O2已成為PDT劑量學(xué)研究亟待解決的難題。本論文結(jié)合國內(nèi)外的研究現(xiàn)狀,開展了基于檢測近紅外發(fā)光和探針熒光的1O2測量技術(shù)研究,主要成果如下: 首先,利用高靈敏度的近紅外光電倍增管和多道光子計(jì)數(shù)技術(shù)開發(fā)一種具有氧分壓和光敏劑熒光監(jiān)測功能的1O2近紅外發(fā)光檢測系統(tǒng)。通過分析鑒別器閾值電壓對時(shí)間分辨1O2發(fā)光信號(hào)的影響,獲得了1O2近紅外發(fā)光檢測系統(tǒng)的最佳閾值電壓。 其次,利用該系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)研究了光敏化1O2在有機(jī)溶劑、含淬滅劑疊代鈉(Sodium azide, NaN3)水溶液、生物組織模型以及不同氧含量水溶液中的發(fā)光動(dòng)力學(xué)過程。在此基礎(chǔ)上,利用激光閃光光解技術(shù)和1O2淬滅法,揭示了不同微環(huán)境中時(shí)間分辨1O2發(fā)光檢測結(jié)果所表征的物理意義。研究結(jié)果表明,已開發(fā)的1O2近紅外發(fā)光檢測系統(tǒng)能夠準(zhǔn)確測得光敏劑在不同微環(huán)境中的激發(fā)三重態(tài)壽命、1O2壽命和1O2淬滅失活的速率常數(shù)。 再者,開拓一種1O2熒光探針Singlet Oxygen Sensor Green (SOSG)的定量分析技術(shù)。通過測量不同濃度SOSG與1O2的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)過程,得到了SOSG與1O2反應(yīng)的初始反應(yīng)速率。根據(jù)初始反應(yīng)速率與SOSG濃度的關(guān)系曲線,獲得了SOSG定量檢測1O2的優(yōu)化條件。 最后,在熒光探針定量分析技術(shù)研究的基礎(chǔ)上,以三種血卟啉類光敏劑喜泊分(HiPorfin)、血卟啉單甲醚(HMME)和癌光啉(PsD-007)作為研究對象,首次測定了三種血卟啉類光敏劑在PBS水溶液中的1O2量子產(chǎn)率,并利用已開發(fā)的1O2近紅外發(fā)光檢測系統(tǒng)對SOSG的定量檢測結(jié)果進(jìn)行評估。研究結(jié)果表明,在滿足定量分析的實(shí)驗(yàn)條件下,利用熒光探針SOSG能夠準(zhǔn)確測得光敏劑在水溶液中的1O2量子產(chǎn)率。 綜上所述,1O2近紅外發(fā)光檢測系統(tǒng)能夠直接測量得到光敏化1O2的發(fā)光強(qiáng)度和壽命,為深入開展PDT-1O2劑量學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。本論文所開拓的1O2熒光探針定量分析技術(shù),為測定新型光敏劑1O2量子產(chǎn)率提供一種更加便捷的手段。
[Abstract]:Singlet oxygen1O2) is the main cytotoxic substance of photochemical reaction type 鈪,
本文編號(hào):1575216
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