不同程度低氧培養(yǎng)對多孔鉭-人成骨細胞復合物細胞形態(tài)及COL-Ⅰ、OC蛋白表達的影響
發(fā)布時間:2018-02-26 17:33
本文關(guān)鍵詞: 低氧 多孔鉭-成骨細胞復合物 細胞增殖 缺氧反應 出處:《中國矯形外科雜志》2017年08期 論文類型:期刊論文
【摘要】:[目的]探討低氧培養(yǎng)條件對多孔鉭-成骨細胞形態(tài)學、增殖能力以及COL-Ⅰ、OC蛋白表達的影響。[方法]選用MG63成骨細胞原代培養(yǎng)及傳代。將第3代細胞以1×10~6/L~(-1)細胞濃度接種于多孔鉭材料進行復合培養(yǎng)。采用三氣培養(yǎng)箱,以20%氧體積分數(shù)作為常氧環(huán)境,氧體積分數(shù)2%作為缺氧環(huán)境,同時設1%及3%氧體積分數(shù)作為缺氧反應對比條件。實驗分組:將多孔鉭-成骨細胞復合物分為4組:常氧鉭組(對照組),3%缺氧鉭組、2%缺氧鉭組及1%缺氧鉭組(實驗組)。CCK-8法檢測多孔鉭-成骨細胞復合培養(yǎng)第1、3、5、7、9、11 d各組成骨細胞生長和增殖狀態(tài);掃描電鏡觀察缺氧對多孔鉭-成骨細胞復合物形態(tài)特征影響;透射電鏡觀察缺氧條件下成骨細胞超微結(jié)構(gòu)改變;免疫細胞化學法檢測缺氧各組成骨細胞COL-Ⅰ、OC蛋白的表達。[結(jié)果]CCK-8法檢測顯示缺氧條件下各實驗組與對照組比較,細胞隨培養(yǎng)時間的延長,成骨細胞生長及增殖速度明顯放慢,除第1 d外,其余各時間點OD值差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);各實驗組組間比較除第3 d外,其余時間點各組間比較差異均存在統(tǒng)計學意義(P0.05),掃描電鏡顯示在缺氧條件下多孔鉭-成骨細胞對缺氧反應表現(xiàn)為體積變小,偽足少而細,只分泌極少量的細胞外基質(zhì)覆蓋于多孔鉭表面。透射電鏡顯示:在缺氧條件下鉭-成骨細胞復合培養(yǎng)與常氧培養(yǎng)的成骨細胞相比,線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張,空泡樣變性,線粒體嵴斷裂或消失。免疫細胞化學檢測結(jié)果得出:缺氧條件下各實驗組成骨細胞COL-Ⅰ、OC蛋白表達較對照組顯著降低(P0.05)。[結(jié)論]多孔鉭-成骨細胞復合物在缺氧條件下成骨細胞增殖能力降低,細胞形態(tài)及超微結(jié)構(gòu)改變,功能降低以及成骨蛋白COL-Ⅰ、OC表達降低。提示:監(jiān)測骨缺損局部氧分壓將有助于三維結(jié)構(gòu)骨移植材料內(nèi)部成骨細胞生長及骨形成量。
[Abstract]:[objective] to study the morphological changes of porous tantalum-osteoblasts in hypoxic culture. Proliferation ability and the expression of COL- 鈪,
本文編號:1539049
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