不同程度低氧培養(yǎng)對(duì)多孔鉭-人成骨細(xì)胞復(fù)合物細(xì)胞形態(tài)及COL-Ⅰ、OC蛋白表達(dá)的影響
發(fā)布時(shí)間:2018-02-26 17:33
本文關(guān)鍵詞: 低氧 多孔鉭-成骨細(xì)胞復(fù)合物 細(xì)胞增殖 缺氧反應(yīng) 出處:《中國矯形外科雜志》2017年08期 論文類型:期刊論文
【摘要】:[目的]探討低氧培養(yǎng)條件對(duì)多孔鉭-成骨細(xì)胞形態(tài)學(xué)、增殖能力以及COL-Ⅰ、OC蛋白表達(dá)的影響。[方法]選用MG63成骨細(xì)胞原代培養(yǎng)及傳代。將第3代細(xì)胞以1×10~6/L~(-1)細(xì)胞濃度接種于多孔鉭材料進(jìn)行復(fù)合培養(yǎng)。采用三氣培養(yǎng)箱,以20%氧體積分?jǐn)?shù)作為常氧環(huán)境,氧體積分?jǐn)?shù)2%作為缺氧環(huán)境,同時(shí)設(shè)1%及3%氧體積分?jǐn)?shù)作為缺氧反應(yīng)對(duì)比條件。實(shí)驗(yàn)分組:將多孔鉭-成骨細(xì)胞復(fù)合物分為4組:常氧鉭組(對(duì)照組),3%缺氧鉭組、2%缺氧鉭組及1%缺氧鉭組(實(shí)驗(yàn)組)。CCK-8法檢測(cè)多孔鉭-成骨細(xì)胞復(fù)合培養(yǎng)第1、3、5、7、9、11 d各組成骨細(xì)胞生長和增殖狀態(tài);掃描電鏡觀察缺氧對(duì)多孔鉭-成骨細(xì)胞復(fù)合物形態(tài)特征影響;透射電鏡觀察缺氧條件下成骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變;免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)缺氧各組成骨細(xì)胞COL-Ⅰ、OC蛋白的表達(dá)。[結(jié)果]CCK-8法檢測(cè)顯示缺氧條件下各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較,細(xì)胞隨培養(yǎng)時(shí)間的延長,成骨細(xì)胞生長及增殖速度明顯放慢,除第1 d外,其余各時(shí)間點(diǎn)OD值差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);各實(shí)驗(yàn)組組間比較除第3 d外,其余時(shí)間點(diǎn)各組間比較差異均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),掃描電鏡顯示在缺氧條件下多孔鉭-成骨細(xì)胞對(duì)缺氧反應(yīng)表現(xiàn)為體積變小,偽足少而細(xì),只分泌極少量的細(xì)胞外基質(zhì)覆蓋于多孔鉭表面。透射電鏡顯示:在缺氧條件下鉭-成骨細(xì)胞復(fù)合培養(yǎng)與常氧培養(yǎng)的成骨細(xì)胞相比,線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張,空泡樣變性,線粒體嵴斷裂或消失。免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)結(jié)果得出:缺氧條件下各實(shí)驗(yàn)組成骨細(xì)胞COL-Ⅰ、OC蛋白表達(dá)較對(duì)照組顯著降低(P0.05)。[結(jié)論]多孔鉭-成骨細(xì)胞復(fù)合物在缺氧條件下成骨細(xì)胞增殖能力降低,細(xì)胞形態(tài)及超微結(jié)構(gòu)改變,功能降低以及成骨蛋白COL-Ⅰ、OC表達(dá)降低。提示:監(jiān)測(cè)骨缺損局部氧分壓將有助于三維結(jié)構(gòu)骨移植材料內(nèi)部成骨細(xì)胞生長及骨形成量。
[Abstract]:[objective] to study the morphological changes of porous tantalum-osteoblasts in hypoxic culture. Proliferation ability and the expression of COL- 鈪,
本文編號(hào):1539049
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