本文關鍵詞： 竹紅菌乙素脂質(zhì)體 鼠肺血管內(nèi)皮細胞 脈絡膜新生血管 光動力療法 藥代動力學 光毒性　出處：《中國人民解放軍醫(yī)學院》2012年博士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：正文：目的：探討竹紅菌乙素脂質(zhì)體（liposomal Hypocrellin B）對鼠肺血管內(nèi)皮細胞（pulmonary microvascular endothelial cells，PMVECS）、棕色挪威（Brown Norway，BN）大鼠脈絡膜新生血管（choroidal neovascularization，CNV）動物模型的光動力效應、在正常小鼠體內(nèi)的藥動學過程以及對小鼠皮膚的光毒性，為HB脂質(zhì)體應用于臨床提供實驗依據(jù)。 方法：1. HB脂質(zhì)體對鼠肺血管內(nèi)皮細胞的光毒性和暗毒性研究。光毒組采用不同濃度HB脂質(zhì)體與鼠肺血管內(nèi)皮細胞孵育4h后，予以波長578.2nm黃光照射，功率密度20mW/cm2，能量密度20J/cm2，照射后繼續(xù)孵育24h，用MTT法測定細胞存活率。暗毒組，用不同濃度HB脂質(zhì)體在避光條件下與鼠肺血管內(nèi)皮細胞孵育24h，用MTT法測定細胞存活率，計算HB脂質(zhì)體的光毒半數(shù)殺傷濃度及暗毒半數(shù)殺傷濃度，并與HB進行比較。 2. CNV模型建立。24只BN大鼠隨機分為氪激光光凝后3d、7d、14d、21d、28d和56d組，共6組，用波長647nm、功率260mW、光斑直徑50μm、曝光時間200ms的氪激光圍繞視乳頭避開大血管進行光凝，每只眼8點。通過眼底熒光素鈉造影（fundus fluorescein angiography, FFA）圖像和病理組織學改變。觀察激光光凝后3d-56d激光誘導CNV的演變過程。將成膜良好的動物納入下一步實驗。 3.將氪激光光凝后21d的CNV模型鼠20只隨機分為空白對照組（N，4只）和光動力治療組（16只，，根據(jù)給藥劑量及PDT治療之后觀察時間分為A、B、C、D四個亞組）。所有治療組均經(jīng)大鼠股靜脈注射HB脂質(zhì)體，A、B兩組采用1mg/kgC、D兩組采用2mg/kg，所有治療組均在靜脈注射藥物后20min，以功率密度400mW/cm2，能量密度36J/cm2，波長578.2nm黃光照射眼底，眼底光斑直徑皆為1000μm。治療后24h和7d行FFA檢查和組織病理學檢查判斷療效�？瞻讓φ战M不予任何處理。 4. HB脂質(zhì)體的初步藥代動力學研究。將72只正常小鼠隨機分成12個試驗組，每組6只，每組對應一個時間點（靜脈注射前及注射后即刻、5、10、20、30、60、90、120、180、240、360min），按2mg/kg劑量一次性尾靜脈注射藥物后，用熒光法檢測不同時間點的血藥濃度，用DAS2.1.1（drug and statistics for windows）程序軟件擬合，血藥濃度-時間曲線進行自動房室模型的判別及藥動學參數(shù)的計算。 5. HB脂質(zhì)體對小鼠皮膚的光毒性研究。將200只昆明小鼠隨機分為4組，分別為生理鹽水對照組，HB脂質(zhì)體1mg/kg組，HB脂質(zhì)體2mg/kg組，HB脂質(zhì)體4mg/kg組。均采用尾靜脈注射一次性給藥。小鼠于給藥后的不同時間接受相同強度的模擬太陽光照射60min。用6mm打孔器取左、右耳廓各l耳片稱重。通過小鼠耳片重量變化及背部去毛區(qū)、耳朵、病理組織學檢查評價皮膚光毒性。 結果： 1. HB脂質(zhì)體在照光及非照光條件下，對鼠肺微血管內(nèi)皮細胞的殺傷濃度分別為53.45ng/mL和17.58μg/mL。光毒半數(shù)殺傷濃度與HB無明顯差異，暗毒半數(shù)殺傷濃度為HB的87倍。 2. FFA顯示光凝后3d CNV開始形成。組織病理顯示21d以后CNV的纖維血管狀態(tài)維持相對穩(wěn)定狀態(tài)。 3.各實驗組PDT后24h、7d未閉合CNV百分比與對照組相比大大降低，有統(tǒng)計學意義（p＜0.01）。2mg/Kg組CNV閉合率高于1mg/Kg組，2mg/Kg組對正常視網(wǎng)膜、脈絡膜的損傷為5級，1mg/Kg組對正常視網(wǎng)膜、脈絡膜的損傷為2級。HB脂質(zhì)體所需光照劑量、光敏劑用量及對正常視網(wǎng)膜、脈絡膜損傷三方面均低于HMME及Verteporfin。 4.正常小鼠按2mg/kg一次性尾靜脈注射給藥后，血清的藥-時曲線為三室模型一級吸收，其主要藥動學參數(shù)為： t1/2z=(2.319±0.462)h，Tmax=(0.127±0.048)h， Cmax=(51.105±2.869) mg/L。 5. HB脂質(zhì)體皮膚光毒實驗各光敏劑劑量組的耳片重量與對照組耳片重量差異無統(tǒng)計學意義。給藥后1天，HB脂質(zhì)體4mg/kg光照組有2例動物耳緣皮膚組織真皮內(nèi)小血管充血，有炎細胞浸潤，余均未見異常。 結論： 1.HB脂質(zhì)體對鼠肺微血管內(nèi)皮細胞的光動力殺傷效果明顯。安全性比HB高。 2.HB脂質(zhì)體-PDT治療CNV療效確切，優(yōu)勢凸顯。在光照劑量一定的情況下，CNV閉合率呈光敏劑劑量依賴型，對正常視網(wǎng)膜、脈絡膜的損傷亦呈光敏劑劑量依賴型。還需進一步研究合適的光照劑量及光敏劑劑量，在最大限度提高CNV閉合率的同時，最低限度降低對正常視網(wǎng)膜及脈絡膜的損傷，以達到光照劑量及光敏劑劑量的最大優(yōu)化。 3.HB脂質(zhì)體在正常小鼠體內(nèi)分布快、消除快，主要分布在血漿等細胞外液中，符合理想光敏劑的特點。 4. HB脂質(zhì)體對小鼠皮膚光毒性低、安全性高。
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【學位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學院
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R758.51;R454.2

【參考文獻】

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1 李超;陳耐生;魏金鋒;薛金萍;沈?qū)?黃金陵;孫嵐;王愛平;;靜脈注射福大賽因?qū)ッ餍∈蟮钠つw光毒性[J];癌變.畸變.突變;2009年05期

2 張曉光,龐利民,王桂云;脈絡膜惡性黑色素瘤的氬激光治療[J];白求恩醫(yī)科大學學報;1998年01期

3 張歆;任百超;;年齡相關性黃斑變性的治療研究新進展[J];國際眼科雜志;2007年06期

4 馬金石;卟啉類第二代光敏劑的發(fā)展[J];感光科學與光化學;2002年02期

5 俞開潮,程紅,金玲;光動力治療用酞菁類光敏劑的合成研究進展[J];感光科學與光化學;2003年02期

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