本文關(guān)鍵詞： 臍帶沃頓膠 軟骨組織工程 去細(xì)胞 冷凍干燥成型 軟骨支架　出處：《中南大學(xué)》2012年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的探索以人臍帶沃頓膠制備新型生物軟骨支架的方法,及其作為軟骨組織工程支架載體的可行性。對不同工藝條件下所制備的支架進(jìn)行大體外形和顯微結(jié)構(gòu)觀察,并對其理化性能進(jìn)行檢測,研究何種工藝條件下制備的支架最符合軟骨支架的理化性能要求,為新型生物軟骨支架的研究提供實(shí)驗依據(jù)。 方法從新鮮胎兒臍帶中分離出沃頓膠組織,分6組(A1、A2、A3、B1、B2、B3)經(jīng)酶消化法聯(lián)合物理凍融法脫細(xì)胞,再經(jīng)冷凍干燥成型法制作軟骨支架。其中,各組的消化時間和預(yù)凍溫度依次為：30min、-196℃(A1組),30min、-80℃(A2組),30min、-20℃(A3組),1h、-196℃(B1組),1h、-80℃(B2組),1h、-20℃(B3組)。并行支架大體外形、HE染色及SEM照片觀察,并對支架的孔徑、孔隙率、密度、溶脹率、降解率等進(jìn)行測定。 結(jié)果得到的支架大體觀察為表面多孔隙的白色疏松海綿泡沫樣物質(zhì),在HE染色及SEM照片下觀察呈多孔網(wǎng)狀交織的三維結(jié)構(gòu),孔隙分布較均勻,材料內(nèi)空隙相互連通。各組支架均脫細(xì)胞完全,經(jīng)30min消化的各組消化良好,而經(jīng)1h消化的各組出現(xiàn)消化過度現(xiàn)象,孔壁完整性及連續(xù)性欠佳。隨預(yù)凍溫度的升高,各組支架孔徑、孔隙率、吸水率及降解率變大,密度減小。 結(jié)論人臍帶沃頓膠可制備出呈三維多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)、孔隙相互連通的生物軟骨支架。其中,經(jīng)30min消化、-80℃預(yù)凍制備的沃頓膠生物軟骨支架去細(xì)胞完全,孔壁完整性滿意,有效孔徑、孔隙率、密度、吸水率及降解率等均附合軟骨組織工程支架的要求。
[Abstract]:Objective to explore the method of preparing a novel biological cartilage scaffold with human umbilical cord Walton glue system, and its feasibility as a scaffold for cartilage tissue engineering carrier. To observe the general shape and microstructure of the prepared scaffolds in different conditions, and the physicochemical properties were detected, research what process conditions for the preparation of the bracket to meet the requirements of physical and chemical properties of cartilage scaffold, to provide the experimental basis for the research of novel biological cartilage scaffold.
Methods isolated from fresh umbilical cord tissue adhesive Walton, divided into 6 groups (A1, A2, A3, B1, B2, B3) by enzyme digestion combined with physical freeze thawing method of acellular cartilage scaffold, and then by making freeze drying method. Among them, each of the digestion time and freezing temperature are as follows: 30min C, -196 (group A1), 30min, -80 C (A2 group), 30min, -20 C (A3 group), 1H, -196 C (B1 group), 1H, -80 C (B2 group), 1H, -20 C (B3 group). The parallel support general shape observed by HE staining and SEM photos. And, to the support of the aperture, porosity, density, swelling ratio, degradation rate were determined.
The results obtained support general observation for white loose sponge foam like material surface of porous, three-dimensional porous structure was observed in HE staining and reticular SEM photos, the pore distribution is more homogeneous and the material pores connected with each other. All stents were decellularized completely by 30min digestion were good digestion, and after each 1H the digestive digestive excessive phenomenon, hole wall integrity and continuity is poor. With the pre freezing temperature, each scaffold pore size, porosity, water absorption rate and degradation rate becomes larger, the density decreases.
Conclusion human umbilical cord Walton glue can be prepared with a three-dimensional porous structure, biological cartilage scaffold pores connected with each other. Among them, by 30min digestion, -80 C freezing Walton glue biological cartilage scaffold prepared to complete cell wall integrity, hole, effective aperture, porosity, density, water absorption rate and degradation rate etc. all of the scaffold for cartilage tissue engineering requirements.

【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R318.08

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本文編號：1472499