本文關(guān)鍵詞：復(fù)合N-乙酰半胱氨酸（NAC）的絲素蛋白磷酸鈣骨水泥的細(xì)胞相容性及成骨性能研究　出處：《蘇州大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： α-磷酸三鈣 絲素 N-乙酰半胱氨酸 細(xì)胞毒性 骨誘導(dǎo)性

【摘要】：目的:制備負(fù)載N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl cysteine,NAC)的絲素蛋白磷酸鈣骨水泥(α-Tricalcium Phosphate/Silk Fibroin-N-acetyl cysteine,α-TCP/SF-NAC),探討其緩釋特性,細(xì)胞相容性及成骨性能。方法:向絲素溶液中加入不同體積的1M NAC溶液配置成含有不同濃度NAC的6%SF(SF-NAC10mM,NAC1;SF-NAC25mM,NAC2)固化液,將α-TCP粉末與固化液按1g/0.4ml的比例混合制備α-TCP/SF-NAC骨水泥。使用紫外分光光度儀對(duì)α-TCP/SF-NAC骨水泥藥物釋放情況進(jìn)行評(píng)估。采用骨水泥浸提液與rBMSCs共培養(yǎng),以MTS法、乳酸脫氫酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)活性檢測(cè)、免疫熒光染色檢測(cè)復(fù)合骨水泥的細(xì)胞毒性。采用骨水泥與rBMSCs共培養(yǎng),檢測(cè)堿性磷酸酶(Alkline Phosphatase,ALP)活性及RT-PCR檢測(cè)成骨標(biāo)志性蛋白Col-Ⅰ、ALP和轉(zhuǎn)錄因子Runx2的相對(duì)表達(dá)量,評(píng)價(jià)復(fù)合骨水泥成骨活性。結(jié)果:NAC可從負(fù)載NAC的絲素蛋白磷酸鈣骨水泥(α-TCP/SF-NAC)中緩慢釋放,釋放呈濃度依賴性。3w時(shí)NAC1及NAC2的釋放率分別為45.25±2.55%及59.15±5.73%。細(xì)胞在α-TCP/SF-NAC骨水泥浸提液中生長(zhǎng)良好,外形無(wú)明顯異常,無(wú)明顯細(xì)胞毒性。rBMSCs在α-TCP/SF-NAC骨水泥表面成骨誘導(dǎo)3天后,NAC1組和NAC2組細(xì)胞培養(yǎng)基上清ALP活性高于對(duì)照組(p0.05),其中NAC2組顯著高于其他各組(p0.01)。在誘導(dǎo)培養(yǎng)后,NAC1組及NAC2組細(xì)胞的Col-Ⅰ、ALP與Runx2的相對(duì)表達(dá)量高于對(duì)照組,且隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸增高。結(jié)論:負(fù)載不同濃度NAC的絲素蛋白磷酸鈣骨水泥能夠緩慢持續(xù)釋放NAC。負(fù)載不同濃度NAC的絲素蛋白磷酸鈣骨水泥無(wú)細(xì)胞毒性,不影響細(xì)胞增殖。負(fù)載不同濃度NAC的絲素蛋白磷酸鈣骨水泥能夠提高rBMSCs外分泌的堿性磷酸酶活性,并促進(jìn)成骨特異性蛋白及轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R318.08;R687

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本文編號(hào)：1348963