ADSCs和β-TCP復(fù)合支架制備及其對(duì)豬膝關(guān)節(jié)軟骨缺損組織CollagenⅡ、Sox-9表達(dá)的影響
本文關(guān)鍵詞:ADSCs和β-TCP復(fù)合支架制備及其對(duì)豬膝關(guān)節(jié)軟骨缺損組織CollagenⅡ、Sox-9表達(dá)的影響 出處:《山東醫(yī)藥》2016年32期 論文類(lèi)型:期刊論文
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【摘要】:目的制備豬脂肪干細(xì)胞(ADSCs)和β-磷酸三鈣(β-TCP)復(fù)合支架,觀察其對(duì)豬膝關(guān)節(jié)軟骨缺損組織CollagenⅡ和Sox-9表達(dá)的影響。方法取1只巴馬小型仔豬的頸部皮下脂肪組織,分離并鑒定ADSCs。以β-TCP作為支架材料,將其制成12個(gè)圓柱體支架,隨機(jī)選擇其中6個(gè)進(jìn)行成骨誘導(dǎo)。將12個(gè)支架與ADSCs復(fù)合培養(yǎng),制備復(fù)合支架,對(duì)經(jīng)成骨誘導(dǎo)后復(fù)合支架上的ADSCs進(jìn)行茜素紅和堿性磷酸酶染色。將18只巴馬小型豬隨機(jī)分為空白對(duì)照組、支架組、成骨誘導(dǎo)支架組,每組6只。支架組、成骨誘導(dǎo)支架組制備與支架大小相符的膝關(guān)節(jié)軟骨缺損模型,并分別植入未經(jīng)過(guò)、經(jīng)過(guò)成骨誘導(dǎo)的復(fù)合支架;空白對(duì)照組切開(kāi)膝關(guān)節(jié)后直接縫合,不進(jìn)行其他處理。各組常規(guī)飼養(yǎng)4周后處死,取缺損處軟骨組織,采用熒光定量PCR法檢測(cè)CollagenⅡmRNA和Sox-9 mRNA相對(duì)表達(dá)量,Western blotting法檢測(cè)CollagenⅡ蛋白和Sox-9蛋白相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果分離提取的ADSCs在分離初期鏡下顯示為圓形單個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞的邊緣比較清楚,細(xì)胞貼壁并形成均勻分布的細(xì)胞。免疫組化染色顯示,分離的細(xì)胞CD44和CD105表達(dá)均為陽(yáng)性,證明其為ADSCs。與空白對(duì)照組比較,支架組和成骨誘導(dǎo)支架組軟骨組織CollagenⅡ和Sox-9 mRNA及蛋白相對(duì)表達(dá)量均降低,但支架組降低更明顯(P均0.05)。結(jié)論成功制備了ADSCs和β-TCP的復(fù)合支架;該支架經(jīng)成骨誘導(dǎo)后可提高豬膝關(guān)節(jié)軟骨缺損組織CollagenⅡ和Sox-9的表達(dá)。
【作者單位】: 沈陽(yáng)軍區(qū)總醫(yī)院;
【基金】:遼寧省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2013020175) 遼寧省科技攻關(guān)項(xiàng)目(2013225089)
【分類(lèi)號(hào)】:R318.08;R684
【正文快照】: 脂肪干細(xì)胞(ADSCs)是來(lái)源于脂肪組織中的具有多向分化潛能的成體干細(xì)胞。研究表明,ADSCs與骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)具有相同的干細(xì)胞特征,包括不斷的自我更新和多向分化潛能[1,2]。AD-SCs具有全身分布廣泛、容易獲取、對(duì)機(jī)體損傷小以及容易為患者所接受等特點(diǎn),已成為近年來(lái)干細(xì)
【相似文獻(xiàn)】
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2 蘇sセ,
本文編號(hào):1319085
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