本文關(guān)鍵詞：SATB2促進(jìn)BMP9誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨分化　出處：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 特異序列AT結(jié)合蛋白2 骨形態(tài)發(fā)生蛋白9 間充質(zhì)干細(xì)胞 成骨分化

【摘要】：目的:研究特異序列AT結(jié)合蛋白2(Special AT-rich Sequence-Binding Protein 2,SATB2)對(duì)骨形態(tài)發(fā)生蛋白9(Bone Morphogenetic Proteins 9,BMP9)誘導(dǎo)的間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal Stem Cells)的影響,并簡(jiǎn)單探討這種影響可能涉及的機(jī)制。方法:首先,用重組腺病毒Ad-BMP9處理C2C12、C3H10T1/2、MEFs細(xì)胞,分別用RT-PCR和Western Blot檢測(cè)BMP9對(duì)內(nèi)源性SATB2表達(dá)的影響;構(gòu)建過表達(dá)SATB2的重組腺病毒Ad-SATB2,Western Blot驗(yàn)證Ad-SATB2的效果;其次,堿性磷酸酶(ALP)活性定量分析及染色和茜素紅染色分析SATB2對(duì)BMP9誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞的早期成骨分化指標(biāo)ALP和晚期成骨分化指標(biāo)鈣鹽沉積的影響;再次,Q-PCR或Western Blot檢測(cè)SATB2對(duì)BMP9誘導(dǎo)的靶基因Id1、Id2、Id3以及轉(zhuǎn)錄因子Runx2、Osterix、Dlx5等成骨相關(guān)基因的影響;最后,熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SATB2對(duì)BMP9誘導(dǎo)的磷酸化Smad1/5/8的影響。結(jié)果:首先,BMP9可以促進(jìn)SATB2的表達(dá),Ad-SATB2能在間充質(zhì)干細(xì)胞中成功表達(dá);其次,SATB2可以誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞的ALP活性和鈣鹽沉積,且能明顯增加BMP9誘導(dǎo)的間充質(zhì)干細(xì)胞的ALP活性和鈣鹽沉積;再次,SATB2可以誘導(dǎo)Id1、Id2、Id3以及轉(zhuǎn)錄因子Runx2、Osterix、Dlx5等成骨相關(guān)基因的表達(dá),且能加強(qiáng)BMP9誘導(dǎo)的Id1、Id2、Id3以及轉(zhuǎn)錄因子Runx2、Osterix、Dlx5等成骨相關(guān)基因的表達(dá);最后,SATB2誘導(dǎo)Smad1/5/8的調(diào)控活性,且能增強(qiáng)BMP9誘導(dǎo)的Smad1/5/8的調(diào)控活性。結(jié)論:SATB2可以誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨早期和晚期分化,以及Id1、Id2、Id3、Runx2、Osterix、Dlx5基因的表達(dá);SATB2能加強(qiáng)BMP9誘導(dǎo)的間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨早期和晚期分化,以及Id1、Id2、Id3、Runx2、Osterix、Dlx5基因的表達(dá);SATB2可以通過調(diào)控Smad1/5/8的轉(zhuǎn)錄活性來加強(qiáng)BMP9誘導(dǎo)的間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨分化。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R318.08;R687

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本文編號(hào)：1317728