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細(xì)菌纖維素在組織工程半月板支架的基礎(chǔ)研究

發(fā)布時間:2017-12-20 15:31

  本文關(guān)鍵詞:細(xì)菌纖維素在組織工程半月板支架的基礎(chǔ)研究 出處:《安徽醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文


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【摘要】:研究目的:膝關(guān)節(jié)半月板損傷是一種常見的疾病,可由外傷,關(guān)節(jié)退化等因素引起,膝關(guān)節(jié)半月板切除后可導(dǎo)致軟骨退變引起骨性關(guān)節(jié)炎;由于半月板的來源有限,組織工程技術(shù)的發(fā)展,能夠為半月板損傷切除后的修復(fù)和再造開辟了新的方法;利用該技術(shù)構(gòu)建與原有功能類似的半月板在防治半月板切除后的并發(fā)癥中有重要意義。在膝關(guān)節(jié)半月板的組織工程中,支架在半月板的構(gòu)建中起決定性作用,纖維軟骨細(xì)胞的附著,增殖,分化和新陳代謝都離不開支架。因此,支架材料是半月板組織工程研究的一個重點(diǎn)。本課題以實(shí)驗研究探索細(xì)菌纖維素支架作為半月板移植組織工程的可行性。研究方法:將兔骨髓間充干細(xì)胞及乳兔半月板纖維軟骨細(xì)胞分離培養(yǎng),用乳兔半月板纖維軟骨細(xì)胞特異性抗體Collagen type Ⅱ來鑒定所制備的細(xì)胞是否為兔半月板纖維軟骨細(xì)胞,采用CD29和CD44抗體以及羊抗兔IgG-FITC二抗對乳兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞流式鑒定;將細(xì)菌細(xì)菌纖維素支架浸泡于纖維軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基對半月板細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)并進(jìn)行MTT檢測纖維軟骨細(xì)胞生長情況,鑒定支架對細(xì)胞是否具有安全性;乳兔半月板纖維軟骨細(xì)胞、兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與支架共培養(yǎng)電鏡觀察細(xì)胞生長情況,利用RT-PCR檢測兔骨髓間充干細(xì)胞和兔半月板纖維軟骨細(xì)胞共培養(yǎng)后相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平及HE染色,明確細(xì)菌纖維素組織工程半月板與兩種干細(xì)胞的組織相容性;將細(xì)菌纖維素支架植入兔子的臀部,定期收集血液進(jìn)行免疫組化檢測CD68表達(dá)量測量支架體內(nèi)的毒理反應(yīng),ELISA檢測血液中炎癥因子鑒定支架對體內(nèi)的炎性反應(yīng),取出臀部支架標(biāo)本進(jìn)HE染色觀察局部的修復(fù)及周圍范圍。結(jié)果:當(dāng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和半月板纖維軟骨細(xì)胞共培養(yǎng)時,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞能夠被誘導(dǎo)形成半月板纖維軟骨細(xì)胞;將浸泡過細(xì)菌纖維素支架的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞對細(xì)胞沒有明顯的干擾作用,在電鏡觀察及特異的細(xì)胞免疫組化能夠證明細(xì)胞在支架上的貼附和生長;植入兔子臀部體內(nèi)的支架,并沒有明顯引起炎癥因子的變化,而且支持組織的修復(fù)。結(jié)論由于細(xì)菌纖維素支架對細(xì)胞的安全性及對體內(nèi)的無免疫反應(yīng),骨髓間充干細(xì)胞及半月板纖維軟骨細(xì)胞在細(xì)菌纖維素支架上的相容性,并且兩種細(xì)胞表現(xiàn)出不同的生長性,證明細(xì)菌纖維素支架對在半月板移植組織工程具有很大可行性,對半月板移植組織工程實(shí)驗研究具有重要的意義,具有更貼近于臨床的目的。
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R684;R318.17

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:1312614

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