本文關(guān)鍵詞：鈦片表面LAMC2基因涂層的制備、表征及生物學(xué)評(píng)價(jià)　出處：《浙江大學(xué)》2013年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 層粘連蛋白5 層層靜電自組裝 基因 轉(zhuǎn)染

【摘要】：研究背景： 種植體周圍軟組織的附著喪失易導(dǎo)致種植體周圍炎,從而影響種植體的遠(yuǎn)期成功率。研究表明內(nèi)基板(IBL)中層粘連蛋白5(LN-5)的表達(dá)不足,是造成種植體牙齦界面中上2/3結(jié)合薄弱的重要原因。為了使種植體植入后能長期抵抗口腔細(xì)菌的感染以維持種植體的功能穩(wěn)定,有研究嘗試改善鈦種植體的表面特性,從而建立良好的種植體-軟組織生物學(xué)封閉�；蛑委熓墙陙砩镝t(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn),從基因水平出發(fā)來研究鈦片表面上皮細(xì)胞的粘附機(jī)制,進(jìn)一步促進(jìn)種植體牙齦界面的愈合,是一種很有前景的治療方法。我們之前的研究也已證明利用層層靜電自組裝技術(shù)(LBL)能在鈦片表面成功構(gòu)建基因薄層并使其發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)。 研究目的： 本實(shí)驗(yàn)通過在鈦片表面構(gòu)建LAMC2(cDNA)基因薄層,改善種植體表面的理化性能,并評(píng)價(jià)基因薄層對(duì)上皮細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng),為種植體-軟組織界面生物學(xué)封閉的完善形成提供治療思路及科學(xué)合理的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 研究方法： 本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用基因治療技術(shù)和層層靜電自組裝技術(shù)(LBL)在光滑鈦片表面組裝由殼聚糖(CS)、透明質(zhì)酸(HA)、陽離子脂質(zhì)體-cDNA復(fù)合物(LDc)組成的基因薄層。通過X射線光電子能譜(XPS),原子力顯微鏡(AFM),表面接觸角測量(SCA)來分析組裝基因薄層前后鈦片表面的理化性能；采用核酸標(biāo)記,熒光顯微鏡分析基因薄層對(duì)cDNA的釋控；在有基因薄層的鈦片表面(CS-(HA-LDc)5)及對(duì)照組鈦片表面(CS-(HA-Lip)5. control)培養(yǎng)HEK293細(xì)胞,評(píng)價(jià)基因薄層對(duì)HEK293細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)。 研究結(jié)果： XPS、AFM、SCA及核酸標(biāo)記結(jié)果證明LAMC2基因薄層成功組裝到鈦片表面；基因薄層對(duì)cDNA控制釋放時(shí)間與其組裝層數(shù)呈正相關(guān)；HEK293細(xì)胞可被轉(zhuǎn)染,且在組裝層數(shù)達(dá)到5層時(shí)轉(zhuǎn)染效率最高,ELISA結(jié)果顯示在4d時(shí)CS-(HA-LDc)5組HEK293細(xì)胞分泌的LN-5濃度高于其他兩組,且三組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。2d和6d時(shí)CS-(HA-Lip)5組和CS-(HA-LDc)5組明顯高于control組(P0.01),而CS-(HA-Lip)5組和CS-(HA-LDc)5組之間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。CS-(HA-LDc)5組和CS-(HA-Lip)5組早期(24h內(nèi))粘附和后期(2d、4d和6d)增殖粘附效率相較control組均有顯著提高(P0.01),且培養(yǎng)4d和6d后CS-(HA-Lip)5和CS-(HA-LDc)5兩組之間亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),CS-(HA-LDc)5組鈦片表面粘附的細(xì)胞數(shù)明顯增加。 結(jié)論： 層層靜電自組裝技術(shù)構(gòu)建的LAMC2基因薄層能成功組裝到光滑鈦片表面,改善鈦片表面的理化性能,提高鈦片表面的生物相容性。該基因薄層形成的釋控系統(tǒng)能夠緩慢釋放cDNA,并轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞,促進(jìn)LN-5的表達(dá),對(duì)HEK293細(xì)胞早期粘附和晚期增殖粘附都有促進(jìn)作用。因此,構(gòu)建LAMC2基因薄層是提高上皮細(xì)胞在種植體材料表面粘附增殖效率的一種可行而有效的方法。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R318.08

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 嚴(yán)炳海,林漢楠;梅花狀鈦片修補(bǔ)顱骨缺損50例[J];中華神經(jīng)外科雜志;1997年02期

2 李德華,劉寶林;人胚成骨細(xì)胞體外培養(yǎng)三維實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷慕J];實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2000年02期

3 張叔辰,司永兵,韓麗華,胡曉吾,解相禮;鈦片修補(bǔ)顱骨缺損的幾點(diǎn)體會(huì)[J];中華神經(jīng)外科雜志;1989年03期

4 鄭紀(jì)偉;韓斐斐;王瑾;韓建國;丁志江;;TGF-β_1對(duì)鈦表面成骨相關(guān)蛋白基因表達(dá)的影響[J];中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志;2011年02期

5 羅曉婷;鄧煒;高振;陳水親;劉新征;;鈦表面粗糙度對(duì)牙周韌帶細(xì)胞骨鈣素表達(dá)的影響[J];中國臨床康復(fù);2006年41期

6 劉長虹;楊曉喻;梁星;孫俊;;不同鈦表面對(duì)人牙周膜細(xì)胞功能和細(xì)胞周期的影響[J];實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2009年01期

7 趙冰凈;趙悅;曲爍;呂明霞;王稚英;;鈦表面不同處理對(duì)成骨細(xì)胞生長影響的實(shí)驗(yàn)研究[J];口腔頜面修復(fù)學(xué)雜志;2009年05期

8 盛迅;丁仲鵑;錢捷;楊策堯;;TGF-β_1影響鈦表面成骨細(xì)胞增殖分化的體外研究[J];現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志;2006年06期

9 姜煥煥;劉鑫;喬士沖;莊龍飛;張志勇;賴紅昌;;親水性純鈦表面對(duì)成骨細(xì)胞黏附行為的影響[J];中國口腔頜面外科雜志;2011年01期

10 鄧天燕;王少安;謝佐理;龍文;;鈦表面形貌對(duì)人單核細(xì)胞活力和粘附影響的實(shí)驗(yàn)研究[J];廣東牙病防治;2011年06期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 洪霞;羊玉榮;趙麗;;顳下頜關(guān)節(jié)成形(間置鈦片及帶蒂顳筋膜瓣)術(shù)的功能康復(fù)[A];全國外科護(hù)理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會(huì)議論文匯編[C];2002年

2 李曉東;;一種鈦基種植體頸部表面改性新方法[A];第十屆全國抗炎免疫藥理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2010年

3 易佳;譚包生;;下頜骨種植體周圍炎模型建立的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[A];第六屆全國口腔種植學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

4 李彥;鄧飛龍;曾融生;李可通;;Branemark種植體修復(fù)中出現(xiàn)的問題探討[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會(huì)第三次全國口腔修復(fù)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];1997年

5 尋春雷;曾祥龍;王興;;微型種植體正畸支抗的臨床應(yīng)用[A];第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院2004第七屆全國口腔正畸學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

6 朱紅;鄒德榮;劉翳雯;瞿曉輝;;種植體周圍炎治療對(duì)患者齦溝液IL-8水平的影響[A];2004年上海市口腔醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2004年

7 黃蘭;黃遠(yuǎn)亮;;三種種植系統(tǒng)用于單冠修復(fù)的臨床比較研究[A];2004年上海市口腔醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2004年

8 王鶯;林野;王興;崔宏燕;;漢族人眼眶部種植體植入位置的研究[A];第四屆全國口腔種植學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年

9 黃茜;王少安;潘亭瀝;王聰;;種植體-基樁界面結(jié)構(gòu)的三維有限元應(yīng)力分析[A];第四屆全國口腔種植學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年

10 林潤臺(tái);顧亞軍;李德超;宿玉成;;人工種植牙的臨床效果分析[A];FDI、CSA臨床口腔進(jìn)展學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];1999年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院口腔科 王慶;實(shí)現(xiàn)精確“種牙”[N];健康時(shí)報(bào);2009年

2 張志勇;拔牙后即刻種牙好處多[N];健康報(bào);2006年

3 劉晨;為亞洲牙科專業(yè)人士介紹最先進(jìn)植牙技術(shù)[N];消費(fèi)日報(bào);2006年

4 安徽省安慶市食品藥品監(jiān)督管理局 李怡和;加強(qiáng)醫(yī)療器械鈦材料監(jiān)管[N];中國醫(yī)藥報(bào);2007年

5 衣曉峰 本報(bào)記者 李華虹 通訊員;還你一口美麗的牙齒[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2005年

6 張荔子;“第三副牙齒”要功能還要美觀[N];健康報(bào);2006年

7 趙杰;種植牙日常護(hù)理很重要[N];家庭醫(yī)生報(bào);2008年

8 記者 孫國根;種牙也可計(jì)算機(jī)導(dǎo)航[N];健康報(bào);2008年

9 北京口腔醫(yī)院副主任醫(yī)師 呂楨;口腔修復(fù)的新技術(shù)[N];中國婦女報(bào);2001年

10 許曉云;人工種植牙將成為缺牙修復(fù)首選[N];金華日報(bào);2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉飛;鈦合金關(guān)節(jié)假體采用氨氣等離子注入法表面改性對(duì)成骨細(xì)胞生物活性影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2012年

2 王丹;融合肽minTBP-1-PRGDN涂層影響鈦表面成骨細(xì)胞粘附、增殖及分化功能的體外研究[D];華中科技大學(xué);2010年

3 江巧紅;多孔純鈦種植體表面BMP-2基因薄層的組裝、性能和生物學(xué)評(píng)價(jià)[D];浙江大學(xué);2012年

4 劉慧穎;氟離子注入鈦表面對(duì)骨細(xì)胞相容性和抗菌性能的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2008年

5 楊帆;鈦表面含辛伐他汀藥物涂層的制備及其對(duì)骨質(zhì)疏松癥大鼠種植體骨結(jié)合作用的研究[D];浙江大學(xué);2011年

6 魏建華;活性復(fù)合鈦基種植體表面的構(gòu)建及生物學(xué)特性研究[D];中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

7 張鋒;鈦基種植體表面仿細(xì)胞外基質(zhì)活性涂層的設(shè)計(jì)、構(gòu)建及其生物學(xué)評(píng)價(jià)[D];浙江大學(xué);2010年

8 周強(qiáng);伊班膦酸鈉對(duì)口腔內(nèi)有成骨潛能細(xì)胞生物學(xué)功能的影響及microRNA相關(guān)機(jī)制初探[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

9 劉一;碳酸鈣涂層種植體在促進(jìn)早期骨整合中作用的分析研究[D];武漢大學(xué);2011年

10 黃怡;大鼠牙髓干細(xì)胞在微弧氧化鈦表面誘導(dǎo)分化成骨的研究[D];華中科技大學(xué);2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 董文靜;鈦片表面LAMC2基因涂層的制備、表征及生物學(xué)評(píng)價(jià)[D];浙江大學(xué);2013年

2 屠姍姍;純鈦表面激光熔覆處理的實(shí)驗(yàn)研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2013年

3 王亞敏;不同粗化噴砂—酸蝕純鈦表面的性能研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2011年

4 蔣穎;不同電參數(shù)對(duì)微弧氧化純鈦表面影響的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

5 盛迅;TGF-β_1對(duì)鈦片表面成骨細(xì)胞增殖分化影響的體外研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2004年

6 么遠(yuǎn);純鈦表面不同處理對(duì)成骨細(xì)胞生長的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

7 范利梅;自分泌胞外全基質(zhì)修飾鈦種植體表面的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2010年

8 陳喜君;納米TiO_2薄膜鈦片的細(xì)胞學(xué)行為研究[D];浙江大學(xué);2013年

9 宋立娜;多孔鈦表面非病毒載體介導(dǎo)的GFP基因組裝和生物學(xué)評(píng)價(jià)[D];浙江大學(xué);2011年

10 孟琳;成骨生長肽對(duì)成骨細(xì)胞在種植體表面相關(guān)生物學(xué)特性的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2008年

，

本文編號(hào)：1308373