本文關(guān)鍵詞：防海水浸泡膠原蛋白復(fù)合醫(yī)用敷料研究

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【摘要】：膠原蛋白是一種常見的止血材料,具有良好的生物相容性和止血性能,可防止水分與體液的流失,與創(chuàng)面有很好的親合性和粘合力,能夠促使毛細(xì)血管形成,加速肉芽組織生長,可縮短創(chuàng)面愈合的時間,加速損傷組織的愈合,促進(jìn)痊愈。殼聚糖同樣是一種常見的止血促愈合生物材料,具備優(yōu)秀的生物相容性和降解性,還具有一定程度抑菌性能,在創(chuàng)面愈合過程中,能保護(hù)創(chuàng)面不被細(xì)菌感染而繼發(fā)炎癥反應(yīng)。海藻酸鈣具有很強(qiáng)的吸液性能,能夠保持創(chuàng)面濕潤,利于創(chuàng)面愈合;同時其中的Ca2+能夠在止血過程中與體液內(nèi)的Na+進(jìn)行交換,促進(jìn)機(jī)體凝血酶的產(chǎn)生,從而加速機(jī)體自身凝血過程。本文采用Lee-White體外凝血法,通過單因素及正交實(shí)驗(yàn),獲得了關(guān)于膠原蛋白、殼聚糖以及海藻酸鈣的最佳復(fù)合配方,采用冷凍干燥法,制備出一款膠原蛋白/海藻酸鈣/殼聚糖凍干海綿(Collagen/Calcium Alginate/Chitosan Matrix,CCCM),通過動物實(shí)驗(yàn)和阻菌阻水實(shí)驗(yàn)來篩選防海水材料,與之結(jié)合初步形成一款防海水浸泡醫(yī)用敷料,并對其表征結(jié)構(gòu)、止血和促愈合功能以及生物安全性進(jìn)行系統(tǒng)探究。采用靜電紡絲技術(shù)在海藻酸鹽敷料底布上紡出膠原蛋白/殼聚糖靜電紡絲膜,通過割傷愈合實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)和全身急性毒性實(shí)驗(yàn),初步探究開展了靜電紡絲膜的促愈合功效和安全性評價研究。1.采用單因素實(shí)驗(yàn),對膠原蛋白、海藻酸鈣和殼聚糖進(jìn)行體外凝血研究,獲得三者各自較佳凝血濃度,通過正交實(shí)驗(yàn),最終得到三者的最佳組合配方為膠原蛋白:海藻酸鈣:殼聚糖=20 mg/m L:0.4 mg/m L:0.1 mg/m L。采用冷凍干燥技術(shù)制備CCCM凍干海綿,采用SEM(掃描電鏡)、紅外光譜、吸水性和孔隙率測試對CCCM凍干海綿進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征,結(jié)果表明CCCM凍干海綿為多孔層狀結(jié)構(gòu),具備良好的孔隙率以及吸水性能,膠原-殼聚糖-海藻酸鹽之間發(fā)生了化學(xué)鍵連接,不是三種材料簡單的復(fù)合。2.采用BCI(Blood Clotting Index)體外凝血實(shí)驗(yàn),兔耳動脈止血模型、背部全皮層止血模型、肝臟止血模型,割傷愈合實(shí)驗(yàn),以及血小板黏附實(shí)驗(yàn),系統(tǒng)研究了復(fù)合CCCM凍干海綿的止血性能和促愈合性能。結(jié)果顯示,CCCM凍干海綿具有良好的止血作用,能夠有效縮短止血時間,減少出血量,從而達(dá)到快速止血的效果;能有效縮短創(chuàng)面愈合時間,降低炎癥反應(yīng),促進(jìn)多種創(chuàng)面愈合相關(guān)生長因子的表達(dá)。3.根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn),采用細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)、致敏性實(shí)驗(yàn)、全身急性毒性實(shí)驗(yàn)和皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)研究了該CCCM凍干海綿的生物安全性。結(jié)果表明,CCCM凍干海綿無明顯細(xì)胞毒性,無致敏性和急性毒性,同時對皮膚不具備刺激性。4.采用靜電紡絲技術(shù),以海藻酸鹽敷料為底布,將膠原蛋白/殼聚糖靜電紡絲于海藻酸鹽敷料,制備獲得膠原蛋白/殼聚糖靜電紡絲海藻酸鹽敷料,采用割傷愈合實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)以及全身急性毒性實(shí)驗(yàn),研究了該靜電紡絲復(fù)合膜的促愈合功效和安全性。結(jié)果顯示,該靜電紡絲復(fù)合膜具備良好的促愈合功能,能有效縮短創(chuàng)面愈合時間,降低炎癥反應(yīng),促進(jìn)多種生長因子的表達(dá),同時,該電紡膜無急性全身毒性,對細(xì)胞毒性小。5.建立海水浸泡動物模型,采用醫(yī)療行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),選用浙江醫(yī)鼎醫(yī)用敷料有限公司和淄博奈琦爾生物科技公司生產(chǎn)的高粘性PU膜(分別簡稱醫(yī)鼎PU膜、奈琦爾PU膜)進(jìn)行防海水浸泡、阻菌與阻水性能的測試,篩選獲得醫(yī)鼎PU膜能長時間有效防止海水浸泡,阻隔細(xì)菌與海水的浸透;防海水浸泡時間6 h。將所篩選的PU膜通過醫(yī)用生物膠與膠原蛋白/海藻酸鈣/殼聚糖凍干海綿和膠原蛋白/殼聚糖靜電紡絲海藻酸鹽敷料粘合固定,初步制備兩種防海水浸泡膠原蛋白醫(yī)用敷料,采用防海水浸泡割傷愈合實(shí)驗(yàn),研究這兩種醫(yī)用敷料的性能。研究表明,這兩種醫(yī)用敷料均能有效防止海水對傷口的侵染,促進(jìn)傷口愈合,但可能是樣本數(shù)量太少,故兩者相比,差異不顯著。
【學(xué)位授予單位】：上海海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R318.08;TQ340.64

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本文編號：1291916