BMSCs旁分泌對軟骨細胞IL-1β?lián)p傷后的保護作用
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更多相關(guān)文章: BMSCs 間接共同培養(yǎng) 旁分泌 抗炎癥 抗凋亡 組織工程 種子細胞
【摘要】:目的研究BMSCs對于軟骨細胞IL-1β?lián)p傷后的保護作用,以及BMSCs存在情況下軟骨細胞對于IL-1β抵抗能力的變化。方法取SD大鼠6只隨機分為實驗組(制備膝關(guān)節(jié)軟骨缺損)和對照組,6 h后取軟骨組織行實時定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)和ELISA檢測IL-1β基因表達和相對含量。BMSCs修復功能實驗:取培養(yǎng)的18孔SD大鼠軟骨細胞隨機分為3組(n=6),空白組不作處理,損傷組和共同培養(yǎng)組細胞采用IL-1β干預后,共同培養(yǎng)組使用Transwell小室建立SD大鼠BMSCs與軟骨細胞共同培養(yǎng)體系,采用q RT-PCR法測定軟骨細胞含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)和含凝血酶敏感素基序的去整合素金屬蛋白4(a disintegrin and metalloprotease with Thrombospondin motifs 4,ADAMTS-4)、ADAMTS-5 m RNA相對表達量,ELISA法檢測各組Caspase-3含量,以及流式細胞術(shù)檢測各組細胞凋亡率。BMSCs保護功能實驗:將12孔軟骨細胞分為2組(n=6),共同培養(yǎng)組置入含BMSCs的Transwell小室后,兩組均采用IL-1β干預,檢測指標同修復功能實驗。結(jié)果動物體內(nèi)損傷現(xiàn)象研究結(jié)果示,實驗組IL-1βm RNA相對表達量和IL-1β相對含量均高于對照組(P0.05)。BMSCs修復功能實驗結(jié)果示,損傷組和共同培養(yǎng)組Caspase-3、ADAMTS-4、ADAMTS-5 m RNA相對表達量及Caspase-3含量、細胞凋亡率均顯著高于空白組,損傷組顯著高于共同培養(yǎng)組,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。BMSCs保護功能實驗結(jié)果示,共同培養(yǎng)組Caspase-3、ADAMTS-4、ADAMTS-5 m RNA相對表達量及Caspase-3含量、細胞凋亡率均顯著低于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論作為組織工程種子細胞的BMSCs同時具有抗炎、抗凋亡的應用潛質(zhì)。
【作者單位】: 第二軍醫(yī)大學附屬長征醫(yī)院骨科;第二軍醫(yī)大學解剖學教研室;
【基金】:國家自然科學基金資助項目(81472071) 國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863)資助項目(2013AA032203)~~
【分類號】:R687;R318.08
【正文快照】: divided into 2 groups(n=6),Transwell chamber was used to establish co-culture system of BMSCs with chondrocyte inco-cultured group before the 2 groups were both intervened by IL-1β,then the same detected indexes were taken as theBMSCs repairing function
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本文編號:1277406
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