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BMSCs旁分泌對(duì)軟骨細(xì)胞IL-1β?lián)p傷后的保護(hù)作用

發(fā)布時(shí)間:2017-12-11 06:01

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  更多相關(guān)文章: BMSCs 間接共同培養(yǎng) 旁分泌 抗炎癥 抗凋亡 組織工程 種子細(xì)胞


【摘要】:目的研究BMSCs對(duì)于軟骨細(xì)胞IL-1β?lián)p傷后的保護(hù)作用,以及BMSCs存在情況下軟骨細(xì)胞對(duì)于IL-1β抵抗能力的變化。方法取SD大鼠6只隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(制備膝關(guān)節(jié)軟骨缺損)和對(duì)照組,6 h后取軟骨組織行實(shí)時(shí)定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)和ELISA檢測(cè)IL-1β基因表達(dá)和相對(duì)含量。BMSCs修復(fù)功能實(shí)驗(yàn):取培養(yǎng)的18孔SD大鼠軟骨細(xì)胞隨機(jī)分為3組(n=6),空白組不作處理,損傷組和共同培養(yǎng)組細(xì)胞采用IL-1β干預(yù)后,共同培養(yǎng)組使用Transwell小室建立SD大鼠BMSCs與軟骨細(xì)胞共同培養(yǎng)體系,采用q RT-PCR法測(cè)定軟骨細(xì)胞含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)和含凝血酶敏感素基序的去整合素金屬蛋白4(a disintegrin and metalloprotease with Thrombospondin motifs 4,ADAMTS-4)、ADAMTS-5 m RNA相對(duì)表達(dá)量,ELISA法檢測(cè)各組Caspase-3含量,以及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡率。BMSCs保護(hù)功能實(shí)驗(yàn):將12孔軟骨細(xì)胞分為2組(n=6),共同培養(yǎng)組置入含BMSCs的Transwell小室后,兩組均采用IL-1β干預(yù),檢測(cè)指標(biāo)同修復(fù)功能實(shí)驗(yàn)。結(jié)果動(dòng)物體內(nèi)損傷現(xiàn)象研究結(jié)果示,實(shí)驗(yàn)組IL-1βm RNA相對(duì)表達(dá)量和IL-1β相對(duì)含量均高于對(duì)照組(P0.05)。BMSCs修復(fù)功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果示,損傷組和共同培養(yǎng)組Caspase-3、ADAMTS-4、ADAMTS-5 m RNA相對(duì)表達(dá)量及Caspase-3含量、細(xì)胞凋亡率均顯著高于空白組,損傷組顯著高于共同培養(yǎng)組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。BMSCs保護(hù)功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果示,共同培養(yǎng)組Caspase-3、ADAMTS-4、ADAMTS-5 m RNA相對(duì)表達(dá)量及Caspase-3含量、細(xì)胞凋亡率均顯著低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論作為組織工程種子細(xì)胞的BMSCs同時(shí)具有抗炎、抗凋亡的應(yīng)用潛質(zhì)。
【作者單位】: 第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長(zhǎng)征醫(yī)院骨科;第二軍醫(yī)大學(xué)解剖學(xué)教研室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81472071) 國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863)資助項(xiàng)目(2013AA032203)~~
【分類號(hào)】:R687;R318.08
【正文快照】: divided into 2 groups(n=6),Transwell chamber was used to establish co-culture system of BMSCs with chondrocyte inco-cultured group before the 2 groups were both intervened by IL-1β,then the same detected indexes were taken as theBMSCs repairing function

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本文編號(hào):1277406


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