本文關(guān)鍵詞：基于轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶交聯(lián)明膠水凝膠的脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)研究

  更多相關(guān)文章： 脂肪干細(xì)胞 三維培養(yǎng) 水凝膠 明膠 轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶

【摘要】：目的構(gòu)建轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(microbial transglutaminase,mTG)交聯(lián)明膠水凝膠的脂肪干細(xì)胞(adiposederived stem cells,ADSCs)三維培養(yǎng)體系,觀察ADSCs在該水凝膠中生長(zhǎng)情況。方法取SD大鼠腹股溝皮下脂肪組織,采用膠原酶消化及離心分離獲取ADSCs,并培養(yǎng)傳代。定量稱取明膠及mTG,分別置于PBS中溶解后,按照一定比例混勻制備mTG交聯(lián)明膠水凝膠。取P3~P4代ADSCs分別于水凝膠表面二維培養(yǎng)及包埋于水凝膠中進(jìn)行三維培養(yǎng)。培養(yǎng)期間,采用倒置相差顯微鏡觀察ADSCs的生長(zhǎng)形態(tài),并進(jìn)行HE染色和Masson染色,觀察細(xì)胞在材料中的分布形態(tài);采用熒光顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡觀察ADSCs在材料中存活狀況;掃描電鏡觀察ADSCs在水凝膠表面黏附性;采用Alamar-Blue法檢測(cè)ADSCs在水凝膠中增殖情況,以培養(yǎng)皿中常規(guī)培養(yǎng)細(xì)胞作為對(duì)照。結(jié)果二維培養(yǎng)觀察示,ADSCs在水凝膠表面生長(zhǎng)良好、細(xì)胞功能正常,貼壁良好。三維培養(yǎng)觀察示,ADSCs在mTG交聯(lián)明膠水凝膠中生長(zhǎng)良好,呈三維立體形態(tài),細(xì)胞向各方向伸展;細(xì)胞死活染色顯示凋亡細(xì)胞非常少。各時(shí)間點(diǎn)三維培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量顯著低于常規(guī)培養(yǎng)細(xì)胞,比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);但第8天開(kāi)始,三維培養(yǎng)的細(xì)胞增殖明顯加快,但常規(guī)培養(yǎng)細(xì)胞增殖開(kāi)始減慢。結(jié)論基于mTG交聯(lián)明膠水凝膠三維培養(yǎng)的ADSCs黏附性強(qiáng),生長(zhǎng)狀況良好,成活率高。
【作者單位】： 四川大學(xué)電氣信息學(xué)院醫(yī)學(xué)信息工程系;四川大學(xué)華西醫(yī)院心臟大血管外科;成都航空職業(yè)技術(shù)學(xué)院工程實(shí)訓(xùn)中心;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81500213) 四川省科技廳科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2013FZ0089)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R318.08
【正文快照】： 脂肪干細(xì)胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是從脂肪組織中分離獲得的具有多向分化潛能的多能干細(xì)胞,其在體外能穩(wěn)定增殖且衰亡率低[1-2],在一定條件下可以分化成脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞等[3]。Vallières等[4]研究表明ADSCs具有良好的力學(xué)性能和適當(dāng)?shù)膬?nèi)

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 呂軍;堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子的血管新生作用與應(yīng)用[J];邯鄲醫(yī)學(xué)高等�？茖W(xué)校學(xué)報(bào);2002年05期

2 ;[J];;年期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 吳曉妮;高玲香;高子偉;裴挫萍;劉賽珠;倪迎瑞;;不同形貌鈦酸鍶鋇/明膠水凝膠復(fù)合膠體的制備及其性能研究[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)、中國(guó)力學(xué)學(xué)會(huì)第九屆全國(guó)流變學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2008年

2 劉根起;宋金月;賈軍;;明膠/TiO_2納米雜化水凝膠電刺激響應(yīng)行為的研究[A];第七屆全國(guó)液體和軟物質(zhì)物理學(xué)術(shù)會(huì)議程序冊(cè)及論文摘要集[C];2010年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 索海瑞;負(fù)載氨基葡萄糖的光交聯(lián)明膠水凝膠性質(zhì)研究[D];浙江大學(xué);2015年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 陳肖會(huì);紡織基明膠水凝膠小口徑人工血管材料初探[D];東華大學(xué);2014年

2 張敏;化學(xué)交聯(lián)海藻酸鹽—明膠水凝膠的研究[D];天津大學(xué);2006年

3 周蕾;明膠水凝膠調(diào)控羥基磷灰石晶體生長(zhǎng)及鈦表面仿生礦化的研究[D];廣東工業(yè)大學(xué);2014年

，

本文編號(hào)：1236623