本文關(guān)鍵詞：蛇毒活性蛋白Natrin與雙相生物陶瓷BCP協(xié)同促進(jìn)成骨作用的研究

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【摘要】：目的：通過體內(nèi)和體外實驗研究生物活性因子廣西眼鏡蛇毒活性蛋白Natrin和具有骨誘導(dǎo)性的雙相生物陶瓷（BCP）對大鼠成骨的影響，探討活性因子與活性陶瓷材料協(xié)同促進(jìn)成骨的作用，為臨床修復(fù)大面積顱骨缺損提供依據(jù)。 方法：（1）考察單獨Natrin蛋白對成骨細(xì)胞的作用：體外培養(yǎng)3-7天SD乳鼠原代成骨細(xì)胞，用不同濃度的蛋白Natrin（0g/ml,2.5g/ml,5g/ml和10g/ml）干預(yù)，分別于2,5，8天測定MTT，ALP活性和成骨相關(guān)基因（BMP2， RUNX2，ALP，BSP，OCN，COL1A1）表達(dá)，并行FDA/PI、鬼筆環(huán)肽、一型膠原、ALP和茜素紅染色；（2）考察Natrin蛋白及BCP活性陶瓷對成骨細(xì)胞作用的體外實驗：將原代成骨細(xì)胞種植在多孔HA/β-TCP雙相生物陶瓷（BCP,質(zhì)量比6:4，直徑12mm，厚度2mm，孔隙率75%）材料上，然后用不同濃度的蛋白Natrin（0g/ml,1.25g/ml,2.5g/ml和5g/ml）干預(yù)，分別于2,5,8天檢測MTT，ALP活性和成骨相關(guān)基因（BMP2，RUNX2，ALP，BSP，OCN，COL1A1）表達(dá)，并行FDA/PI、鬼筆環(huán)肽染色和掃描電鏡；（3）Natrin蛋白及BCP活性陶瓷用于顱骨缺損修復(fù)的動物實驗：將成年雄性SD大鼠40只（體重300±20g）隨機(jī)分配成四組（A, B, C, D組，每組10只），建立矢狀縫與人字縫十字交叉右上象限5mm直徑圓形顱骨缺損模型，A、B組為不加材料的空白組，，C、D組植入雙相生物陶瓷（BCP，質(zhì)量比6:4，直徑5mm，厚度2mm,孔隙率75%）材料，抗炎3天后，A、C組注射等量生理鹽水，B、D組于顱骨缺損局部注射Natrin蛋白濃度為5g/ml、2.5g/ml的生理鹽水0.5ml，于術(shù)后1個月、2個月每組分別處死5只大鼠，行大體觀察、硬組織切片，錐束CT掃描。 結(jié)果：（1）考察單獨Natrin蛋白對成骨細(xì)胞的作用：在二維培養(yǎng)中，MTT、ALP活性與成骨相關(guān)基因表達(dá)的檢測等結(jié)果表明單獨Natrin對成骨細(xì)胞的增殖和分化具有促進(jìn)作用，其最適作用濃度為5g/ml；（2）考察Natrin蛋白及BCP活性陶瓷對成骨細(xì)胞作用的體外實驗：在三維培養(yǎng)中，MTT、掃描電鏡、ALP活性與成骨相關(guān)基因表達(dá)的檢測等結(jié)果表明Natrin和BCP陶瓷對成骨細(xì)胞的增殖和分化具有協(xié)同促進(jìn)作用，尤其是在Natrin蛋白為2.5g/ml時作用最為明顯；（3）Natrin蛋白及BCP活性陶瓷用于顱骨缺損修復(fù)的動物實驗：大體觀察、錐束CT掃描和硬組織切片等檢測看出BCP有良好的生物相容性，可促進(jìn)顱骨缺損修復(fù)，添加蛋白Natrin后促進(jìn)效果更為明顯。 結(jié)論：Natrin蛋白及BCP活性陶瓷可協(xié)同促進(jìn)顱骨缺損修復(fù)，具有較好的臨床開發(fā)價值。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R687;R318.08

【參考文獻(xiàn)】

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1 蔣興明;焦楊;宋慧;馬興才;周燕;周元聰;舒雨雁;;廣西眼鏡蛇毒中Natrin蛋白的分離及純化[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2011年05期

本文編號：1167828