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成骨誘導(dǎo)后的ADSCs的抗原性及對(duì)骨缺損修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2017-11-10 04:27

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【摘要】:目的 探討成骨誘導(dǎo)后的脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞(Adipose tissue-derived MSCs,ADSCs)的抗原性及對(duì)骨缺損修復(fù)的影響。 方法 取誘導(dǎo)成骨后的WKY大鼠的ADSCs,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone marrow stemcell,BMSCs)與羥基磷灰石支架(Hydroxyapatite,HA)構(gòu)成ADSCs/HA、BMSCs/HA細(xì)胞支架復(fù)合體,植入Wistar大鼠橈骨缺損區(qū),Wistar大鼠隨機(jī)分為四組:對(duì)照組(僅骨缺損)、實(shí)驗(yàn)A組(支架移植組)、實(shí)驗(yàn)B組(BMSCs/HA移植組)、實(shí)驗(yàn)C組(ADSCs/HA移植組),每組又分為1、2、4、8W四個(gè)亞組(n=5),分別于植入后1、2、4、8W對(duì)骨缺損區(qū)進(jìn)行放射線檢測(cè),HE染色光鏡觀察,,免疫組化檢測(cè)IL-2、TGF-β、TNF-α、CD4、CD8,采用ELISA法檢測(cè)術(shù)后2、4周脾細(xì)胞培養(yǎng)液上清IL-2、TGF-β、TNF-α的含量。 結(jié)果 (1)光鏡下觀察:B、C兩組于術(shù)后2W時(shí),可見較多的纖維組織充填,4W有類骨質(zhì)形成及骨陷窩出現(xiàn),8W骨細(xì)胞增多,骨小梁明顯;對(duì)照組及A組于術(shù)后2W缺損區(qū)域周圍有少量結(jié)締組織長(zhǎng)入,缺損修復(fù)晚于B、C兩組。炎細(xì)胞計(jì)數(shù):各時(shí)間點(diǎn)A、B、C組與對(duì)照組比較有顯著差異(P0.05),各組炎細(xì)胞計(jì)數(shù)隨著移植周數(shù)增加而降低;(2)免疫組化顯示:術(shù)后2W時(shí),A、B、C三組于骨缺損區(qū)可見少量CD8、CD4、IL-2、TGF-β1、TNF-α陽性表達(dá)細(xì)胞,組間表達(dá)無顯著差異(P0.05),但與對(duì)照組比較差異顯著;術(shù)后8W,各組陽性表達(dá)降低;(3)ELISA顯示:術(shù)后2W,脾細(xì)胞上清中IL-2、TGF-β1、TNF-α蛋白含量A、B、C組組間比較無顯著差異,與對(duì)照組比較有顯著差異,4W各組蛋白含量均降低,對(duì)照組與其他三組比較有顯著差異;(4)放射線觀察:骨缺損區(qū)可見B、C兩組術(shù)后2W兩端有少量骨痂形成,術(shù)后4W兩斷端有大量模糊骨痂形成,術(shù)后8W新骨密度增高;對(duì)照組術(shù)后1W未見骨性修復(fù),術(shù)后8W未見骨性修復(fù)最后形成骨不連;A組術(shù)后8W支架周圍有少量骨痂形成。組織學(xué)評(píng)分對(duì)照組和A組與B、C兩組比較差異顯著(P0.05),修復(fù)效果B、C兩組優(yōu)于對(duì)照組和A組。 結(jié)論 成骨誘導(dǎo)后的ADSCs的抗原性不明顯,移植后可對(duì)大鼠橈骨缺損修復(fù),且修復(fù)效果優(yōu)于支架移植組。
【學(xué)位授予單位】:遼寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R318.08

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 董巧鳳;賀韋東;尹哲;王迎雪;李麗珍;郭成山;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外擴(kuò)增及其對(duì)T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ和IL-10的影響[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2007年02期

2 陳健琳,郭子寬,徐晨,李欲航,侯春梅,毛寧,陳虎;間充質(zhì)干細(xì)胞分泌TGF-β1抑制異體T細(xì)胞反應(yīng)性[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2002年04期

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4 李孜壯,盧世壁,王繼芳;緩慢自然復(fù)溫冷凍干燥異體骨修復(fù)實(shí)驗(yàn)性骨缺損[J];中華外科雜志;1994年12期

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本文編號(hào):1165084

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