本文關(guān)鍵詞：PDLLA骨組織工程支架材料的構(gòu)建及體外生物學(xué)性能的研究

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【摘要】：由各種原因引起的大段骨缺損所導(dǎo)致的各種并發(fā)癥，不但增加病人的痛苦和治療費(fèi)用，還降低了病人的生活質(zhì)量，此類疾病常規(guī)的治療方法是骨移植。目前,常規(guī)的骨移植方法有自體骨移植、異體骨移植以及人工骨移植，但都存在一定的問(wèn)題和限制，難以滿足臨床需要。對(duì)骨缺損治療的研究已成為骨科領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一，目前尚缺乏較為理想的治療方法。 上世紀(jì)80年代興起的組織工程學(xué)為骨缺損的修復(fù)提供了一個(gè)全新的思路和方法。組織工程學(xué)是應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和工程學(xué)的原理,構(gòu)建體外受損組織的生物替代物。一般來(lái)說(shuō),骨組織工程的3個(gè)核心要素是:種子細(xì)胞、生物支架材料以及細(xì)胞因子，它是繼細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)之后,生命科學(xué)發(fā)展史上的又一新的里程碑,標(biāo)志著醫(yī)學(xué)將走出器官移植的范疇,步入人工組織和器官的新時(shí)代。 近年來(lái),骨組織工程在種子細(xì)胞、支架材料、細(xì)胞因子等方面取得了巨大的進(jìn)展，并成功培養(yǎng)出骨樣組織,為大塊骨缺損的修復(fù)開辟了新的途徑,但離臨床應(yīng)用仍有一段距離。如何快速、高效、穩(wěn)定地獲得種子細(xì)胞和構(gòu)建性能良好的支架材料,是目前骨組織工程領(lǐng)域所面臨的重要問(wèn)題。 目的：分離獲取BMSCs并將生長(zhǎng)良好的BMSCs做為種子細(xì)胞，觀察PDLLA支架材料對(duì)它的體外細(xì)胞相容性，評(píng)估PDLLA支架材料作為骨組織工程支架材料進(jìn)行后續(xù)研究的可行性。 方法： 1.采用全骨髓貼壁并紅細(xì)胞裂解的方法分離BMSCs，通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察，表面抗原的測(cè)定以及成骨分化情況鑒定BMSCs，將其體外擴(kuò)增至第3代作為本次研究的種子細(xì)胞。 2.使用溶液澆鑄/顆粒瀝析技術(shù)制備PDLLA三維多孔支架作為本次研究的支架材料,用材料在不同時(shí)間點(diǎn)的降解液培養(yǎng)種子細(xì)胞,從降解液pH值的變化、對(duì)種子細(xì)胞的毒性作用、對(duì)種子細(xì)胞的活力和成骨分化的影響、從細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察種子細(xì)胞在材料上的生長(zhǎng)情況等方面,綜合評(píng)估其對(duì)種子細(xì)胞的相容性。 結(jié)果： 1.體外分離的原代BMSCs在形態(tài)上呈長(zhǎng)梭形，魚群樣聚集生長(zhǎng)，第3代BMSCs更具特征性的漩渦狀聚集生長(zhǎng)，，并且表達(dá)CD29、CD90陽(yáng)性，表達(dá)CD45陰性；經(jīng)過(guò)3w的成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)，成功地誘導(dǎo)為成骨類細(xì)胞。 2. PDLLA支架材料各時(shí)間點(diǎn)降解液對(duì)種子無(wú)明顯毒性作用,對(duì)種子細(xì)胞的活力未發(fā)現(xiàn)明顯的負(fù)面影響,對(duì)細(xì)胞的成骨分化過(guò)程未發(fā)現(xiàn)明顯負(fù)面影響，BMSCs在PDLLA支架材料內(nèi)部孔隙表面呈現(xiàn)較好的貼壁生長(zhǎng)態(tài)勢(shì),各組細(xì)胞在形態(tài)學(xué)上無(wú)明顯差異。 結(jié)論： 1.本次實(shí)驗(yàn)成功體外分離并擴(kuò)增BMSCs，經(jīng)鑒定，具有良好的細(xì)胞增殖和成骨分化性能，具備干細(xì)胞家族普遍的特性，基本可以確定為BMSCs。 2. PDLLA支架材料具有較好的生物安全性和細(xì)胞相容性，可作為組織工程支架類材料的一種選擇進(jìn)行后續(xù)的研究。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R318.08

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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本文編號(hào)：1153433