本文關(guān)鍵詞：新鮮骨髓吸出物直接種植支架材料構(gòu)建組織工程韌帶的可行性研究

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【摘要】：目的：種子細(xì)胞與支架材料復(fù)合培養(yǎng)是構(gòu)建組織工程韌帶的基本方法，但是種子細(xì)胞體外分離、培養(yǎng)、傳代等步驟費(fèi)時(shí)、費(fèi)力，延長(zhǎng)了組織工程韌帶的構(gòu)建周期，應(yīng)用于臨床無疑增加了患者的住院周期及治療費(fèi)用，，我們查閱了國內(nèi)外文獻(xiàn)，少有提及關(guān)于應(yīng)用新鮮骨髓吸出物直接種植于支架材料構(gòu)建組織工程韌帶的研究報(bào)告，但是有關(guān)于應(yīng)用新鮮骨髓吸出物直接注射入關(guān)節(jié)內(nèi)前交叉韌帶（ACL）部分損傷局部來修復(fù)韌帶損傷的報(bào)導(dǎo)，因此我們假設(shè)新鮮骨髓吸出物直接種植于支架材料同樣可以促進(jìn)種子細(xì)胞的粘附、增殖、分化及分泌細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）等，并且效果不劣于以往分離培養(yǎng)BMSCs種植支架的效果，通過評(píng)價(jià)此兩種細(xì)胞種植方法來探討應(yīng)用新鮮骨髓吸出物直接種植支架材料構(gòu)建組織工程韌帶的可行性，并試圖找到一種新的更為簡(jiǎn)單易行且效果確切的細(xì)胞種植方法,同時(shí)評(píng)價(jià)絲素纖維/小腸粘膜下層（SIS）復(fù)合物作為韌帶組織工程支架的可行性。 方法：構(gòu)建絲素纖維/小腸粘膜下層（SIS）復(fù)合支架材料；提取SD大鼠新鮮骨髓2ml，均分為A,B兩份；A組：新鮮骨髓吸出物1ml直接種植于前述支架材料上為骨髓種植組；B組：提取骨髓通過全骨髓法體外分離純化、培養(yǎng)至第三代的BMSCs種植于相同支架材料為細(xì)胞種植組；另以未復(fù)合任何成分的支架作為對(duì)照組C組，檢測(cè)三組材料細(xì)胞體外生物相容性，細(xì)胞粘附情況及增殖活性、Ⅰ型、Ⅲ型膠原分泌量，然后通過標(biāo)準(zhǔn)化重建家兔橫斷之前交叉韌帶方式將A組材料植入動(dòng)物體內(nèi)，4周后取材，評(píng)價(jià)骨髓種植組材料體內(nèi)生物相容性。 結(jié)果：骨髓種植組孵育4h細(xì)胞粘附密度顯著高于細(xì)胞種植組；骨髓種植組各時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞增殖率均顯著高于細(xì)胞種植組；骨髓種植組及細(xì)胞種植組Ⅰ型、Ⅲ型膠原分泌量均顯著高于對(duì)照組，但骨髓種植組及細(xì)胞種植組兩組間Ⅰ型、Ⅲ型膠原分泌量未見顯著性差異；骨髓種植組材料植入體內(nèi)4周未引起致死性免疫排斥反應(yīng)及嚴(yán)重炎癥反應(yīng)，未見明顯韌帶再生及血管化。 結(jié)論：新鮮骨髓吸出物直接種植支架材料可見細(xì)胞在材料上的粘附、增殖及細(xì)胞外基質(zhì)的分泌，且體內(nèi)短期生物相容性可；同時(shí)前期材料生物力學(xué)測(cè)定證實(shí)該支架材料生物力學(xué)性能滿足韌帶組織工程支架材料力學(xué)要求。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R318.08

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1152180