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木糖葡聚糖作為胞外基質(zhì)材料對(duì)HepG2細(xì)胞的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-11-06 22:22

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【摘要】:目的:肝組織工程中胞外基質(zhì)(Extracellular matrix, ECM)材料起著對(duì)種子細(xì)胞的支持、營(yíng)養(yǎng)、信號(hào)交流等作用,是肝組織工程中的重要研究?jī)?nèi)容。本文以木糖葡聚糖(Xyloglucan, XG)為ECM材料,研究其對(duì)人肝癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞在細(xì)胞培養(yǎng)板上的貼壁性以及對(duì)微囊化HepG2細(xì)胞的清蛋白合成速率、胺清除速率、細(xì)胞增殖速率以及Cx32(Connexin32,間隙連接蛋白)、E-cadherin (Epithelial-cadherin,細(xì)胞黏附分子)表達(dá)的影響。方法:采用BCA法測(cè)定細(xì)胞在XG包被的細(xì)胞培養(yǎng)板上的貼壁率;采用Human Serum Albumin Elisa kit、Ammonia Assay Kit分別測(cè)定不同濃度XG微囊化細(xì)胞的清蛋白合成速率、對(duì)體系中NH4+的清除速率;采用BCA法檢測(cè)微囊化細(xì)胞的增殖;采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Reverse transcriptase-polymerase chain reaction, RT-PCR)技術(shù)探究最適XG濃度微囊化細(xì)胞中Cx32、E-cadherin的表達(dá)情況。結(jié)果:HepG2細(xì)胞在XG包被的細(xì)胞培養(yǎng)板上的貼壁率隨著XG濃度的增加呈現(xiàn)增加的趨勢(shì),同時(shí)微囊內(nèi)細(xì)胞數(shù)量隨XG濃度的增加、培養(yǎng)時(shí)間的增加而增加,說(shuō)明XG對(duì)細(xì)胞/基質(zhì)間相互作用具有促進(jìn)作用,可促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖;微囊化HepG2細(xì)胞的清蛋白合成速率與胺清除速率在XG濃度為1mg/mL時(shí)最大且較空白組高,說(shuō)明XG對(duì)細(xì)胞的合成、胺代謝功能具有一定促進(jìn)作用;加入XG的微囊內(nèi)細(xì)胞表達(dá)Cx32、E-cadherin的時(shí)間較空白組提前,說(shuō)明XG的存在促進(jìn)了HepG2細(xì)胞功能的維持和體現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示XG對(duì)微囊化HepG2細(xì)胞的增殖及肝臟功能的體現(xiàn)都具有一定的促進(jìn)作用。
【學(xué)位授予單位】:華中師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R318.08;R735.7

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1149637

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