本文關鍵詞：改性PBT平板膜對血漿蛋白吸附及血小板、白細胞黏附的初步研究

  更多相關文章： 聚對苯二甲酸丁二醇酯 蛋白吸附 白蛋白 纖維蛋白原 白細胞 血小板

【摘要】：背景蛋白與材料表面的相互作用一直是生物相容性領域研究的重點之一。當材料表面與含有可溶性蛋白的液體(血液,組織液等)接觸時,首先是蛋白質迅速的吸附在材料表面,其次才是細胞。細胞與吸附在材料表面的蛋白分子層相互作用,而不是與材料直接接觸。因而,在一定程度上調整蛋白質層在生物材料表面的吸附狀態(tài),可以調控細胞與吸附蛋白質層的特異性相互作用等一系列信號轉導,來決定細胞的生物應答。因此,控制材料表面吸附蛋白的數(shù)量,類型,以及蛋白質的方向,構象和排布方式從而控制細胞應答成為重要研究方向。 目的制備具有不同官能團(-CH3、-COOH、-OH、兩性基團)的聚對苯二甲酸丁二醇酯(PBT)平板膜,并初步研究其對血漿蛋白吸附情況,及其對白細胞(WBC)、血小板(PLT)的黏附效果。 方法(1)利用紫外改性的方法,將不同單體接枝到PBT表面得到PBT-AA(-COOH)、 PBT-HEMA (-OH)、PBT-SMDB (兩性基團)并進行表征。(2)采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)方法測定四種材料吸附的HSA、Fgn含量的差異,且不同接枝率是否對蛋白含量有影響。(3)利用SEM觀察四種材料在分別吸附HSA和Fgn前后,黏附白細胞、血小板的數(shù)量變化。(4)利用AFM力曲線測量蛋白材料間相互作用。結果(1)四種材料的親水性排名順序為：PBT-HEMAPBT-SMDBPBT-AAPBT。 (2)PBT-AA的人血清白蛋白(HSA)吸附量遠高于其余三者(p0.05)；PBT和PBT-AA的纖維蛋白原(Fgn)吸附量高于PBT-HEMA和PBT-SMDB(P0.05)。(3)四種材料在吸附蛋白前后,白細胞和血小板的黏附量發(fā)生顯著變化,其中吸附Fgn后,兩種細胞量均明顯增加,而吸附HSA后白細胞量明顯減少。(4)Fgn只對PBT有特異性吸附；HSA對四種材料沒有特異性吸附。 結論HSA對四種材料沒有特異性吸附；Fgn則傾向于吸附疏水性表面。Fgn對兩種細胞的黏附均有促進作用,而HSA對白細胞的黏附有一定抑制性。HSA對血細胞的影響可能主要由其吸附在材料表面的構象決定,而不是其吸附數(shù)量。
【關鍵詞】：聚對苯二甲酸丁二醇酯 蛋白吸附 白蛋白 纖維蛋白原 白細胞 血小板
【學位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R318.08
【目錄】：

• 摘要6-7
• Abstract7-9
• 第一章 緒論9-21
• 1.1 引言9
• 1.2 單一溶液中的蛋白質吸附行為9-12
• 1.3 復雜成分溶液中的蛋白吸附行為12-14
• 1.4 材料表面的抗蛋白吸附機理14-16
• 1.5 蛋白質與細胞間的相互作用16-17
• 1.6 展望17-18
• 1.7 課題設計18-21
• 第二章 改性PBT平板膜的制備與表征21-34
• 2.1 引言21
• 2.2 材料與方法21-27
• 2.2.1 主要儀器與試劑21-23
• 2.2.2 表面改性PBT類材料的制備23-26
• 2.2.2.1 確定最佳改性條件23-24
• 2.2.2.2 AA改性24-25
• 2.2.2.3 HEMA改性25
• 2.2.2.4 SMDB改性25-26
• 2.2.3 改性前后生物材料表征26-27
• 2.2.3.1 FTIR26
• 2.2.3.2 能譜&SEM26
• 2.2.3.3 靜態(tài)接觸角26
• 2.2.3.4 zeta電位26-27
• 2.2.3.5 細胞毒性27
• 2.3 結果與討論27-33
• 2.3.1 FTIR27-28
• 2.3.2 元素分析28-29
• 2.3.3 SEM29-30
• 2.3.4 親、疏水性30-31
• 2.3.5 zeta電位31-32
• 2.3.6 細胞毒性32-33
• 2.4 小結33-34
• 第三章 PBT類改性材料對白蛋白、纖維蛋白原吸附性能的初步研究34-42
• 3.1 引言34-35
• 3.2 材料與方法35-37
• 3.2.1 主要儀器與試劑35
• 3.2.2 血漿中的HSA、Fgn吸附35
• 3.2.3 純蛋白溶液的吸附35-36
• 3.2.4 不同接枝率的改性材料HSA、Fgn的吸附36
• 3.2.5 HSA ELISA實驗36
• 3.2.6 Fgn ELISA實驗36-37
• 3.3 結果與討論37-41
• 3.3.1 HSA37-39
• 3.3.2 Fgn39-41
• 3.4 小結41-42
• 第四章 PBT類改性材料對白細胞、血小板的黏附性能的初步研究42-52
• 4.1 引言42
• 4.2 材料與方法42-44
• 4.2.1 主要儀器與試劑42-43
• 4.2.2 高純度白細胞懸液及血小板懸液的制備43
• 4.2.3 細胞黏附實驗43-44
• 4.3 結果與討論44-51
• 4.3.1 WBC44-47
• 4.3.2 PLT47-51
• 4.4 小結51-52
• 第五章 PBT類改性材料影響凝血功能的初步評價52-59
• 5.1 引言52-54
• 5.2 材料與方法54-55
• 5.2.1 主要儀器與試劑54
• 5.2.2 樣品的制備54
• 5.2.3 凝血因子的檢測54-55
• 5.3 結果與討論55-58
• 5.3.1 四種材料對凝血功能的影響55-56
• 5.3.2 接枝率對凝血因子的影響56-58
• 5.4 小結58-59
• 第六章 蛋白與材料之間相互作用力59-66
• 6.1 引言59-60
• 6.2 材料與方法60-61
• 6.2.1 主要儀器與試劑60-61
• 6.2.2 探針的修飾61
• 6.2.3 力曲線61
• 6.3 結果與討論61-65
• 6.4 小結65-66
• 第七章 主要結論與后續(xù)工作建議66-68
• 7.1 主要結論66-67
• 7.2 后續(xù)工作建議67-68
• 參考文獻68-76
• 附錄76-77
• 致謝77-78

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 楊海華,柯勤飛;血液過濾用非織造布的發(fā)展[J];非織造布;1999年02期

2 林思聰;高分子生物材料分子工程研究進展(上)[J];高分子通報;1997年01期

3 王春仁;生物材料表面血漿蛋白的吸附[J];國外醫(yī)學.生物醫(yī)學工程分冊;1995年06期

4 周雪鋒;江筱莉;顧寧;;醫(yī)用聚氨酯表面功能化與血液相容性:水分子的作用[J];化工學報;2009年06期

5 宋巍;陳紅;;蛋白質在納米拓撲結構材料表面的吸附[J];科學通報;2007年23期

6 呂金星,汪健,張錫慶,張學光;Percoll非連續(xù)密度梯度沉降法分離人外周血中性粒細胞[J];上海免疫學雜志;2000年02期

7 王秋蘭;盧育洪;李盛璞;王牡;蔡繼業(yè);;B細胞膜CD20抗原的分布與單分子力譜探測[J];生物工程學報;2011年01期

8 歐軍飛;周金芳;簡令奇;王宏剛;楊生榮;;聚合物表面改性方法概述[J];塑料工業(yè);2007年11期

9 石卿;蘇延磊;姜忠義;;材料表面抗蛋白質污染機理研究進展[J];中國科技論文在線;2010年03期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 胡夢欣;聚丙烯微孔膜的高密度糖基化及其應用基礎研究[D];浙江大學;2009年

，

本文編號：1118621