本文關(guān)鍵詞：新型自組裝短肽用于細(xì)胞三維實(shí)時(shí)監(jiān)控和抗衰老研究

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【摘要】：目的:采用新型自組裝短肽GFS-15,模擬細(xì)胞外基質(zhì)生長(zhǎng)微環(huán)境(ECM)研究作為細(xì)胞三維培養(yǎng)材料的可行性,運(yùn)用自組裝短肽的特殊序列結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)將其連接在金電極傳感器表,探索該短肽作為細(xì)胞三維培養(yǎng)實(shí)時(shí)監(jiān)控材料的效果;在三維環(huán)境中構(gòu)建細(xì)胞衰老模型,探索白藜蘆醇抗衰老的作用過程與機(jī)制。方法:本文主要采用圓二色譜儀、原子力顯微鏡、剛果紅染色等來探究手性自組裝短肽GFS-15的二級(jí)結(jié)構(gòu)、納米形態(tài)和宏觀形貌特征;循環(huán)伏安曲線、圓二色譜儀來檢測(cè)濃度、時(shí)間、鹽離子對(duì)它自組裝過程的影響;通過研究分析三維和二維條件下不同實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的周期分布、細(xì)胞增殖、凋亡染色來研究該短肽抗衰老細(xì)胞層面的生物功能,qRT-PCR等分子技術(shù)研究該短肽抗衰老的機(jī)制過程。結(jié)果:該短肽GFS-15其二級(jí)結(jié)構(gòu)為典型的β-折疊,原子力顯微鏡(AFM)顯示其能夠在離子條件下發(fā)生自組裝,形成三維納米纖維結(jié)構(gòu);48 h剛果紅染色結(jié)果顯示該短肽形態(tài)為透明水凝膠,可以作為細(xì)胞的三維培養(yǎng)材料;循環(huán)伏安曲線結(jié)果表明一定濃度的該短肽能結(jié)合在金電極表面形成膜結(jié)構(gòu),阻止電子的傳遞,其氧化還原峰值δEp減小;三維細(xì)胞實(shí)時(shí)監(jiān)控實(shí)驗(yàn),表面該短肽能夠連接在金電極表面上形成三維支架,支持細(xì)胞生長(zhǎng)。在2 h前,數(shù)據(jù)顯示短肽能夠快速的結(jié)合在金電極傳感器上,形成三維支架;24 h后所形成的的支架依然穩(wěn)定存在支持細(xì)胞生長(zhǎng);自組裝短肽三維環(huán)境下白藜蘆醇抗衰老研究結(jié)果顯示,三維抗衰老組的細(xì)胞周期阻滯于G2期的細(xì)胞數(shù)約為11.89%,較二維抗衰老組降低約7.84%。結(jié)論:新型自組裝短肽GFS-15在鹽離子條件下能自組裝形成穩(wěn)定的三維納米纖維支架,水溶液呈凝膠狀可以作為細(xì)胞三維培養(yǎng)的理想材料;能與金電極傳感器表面結(jié)合修飾形成穩(wěn)定的三維支架,作為細(xì)胞三維培養(yǎng)實(shí)時(shí)監(jiān)控的材料;在使用該短肽構(gòu)建的三維環(huán)境下,運(yùn)用白藜蘆醇抗衰老效果更明顯。
【關(guān)鍵詞】：自組裝短肽GFS-15 細(xì)胞三維培養(yǎng) 實(shí)時(shí)監(jiān)控 抗衰老 電化學(xué)
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R318.08;TB383.1
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對(duì)照4-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-14
• 第一部分：新型自組裝短肽自組裝效能以及電化學(xué)性能檢測(cè)14-23
• 1 材料與方法14-16
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果16-22
• 3 討論22-23
• 第二部分：新型自組裝短肽GFS-15 的細(xì)胞的三維培養(yǎng)以及實(shí)時(shí)監(jiān)控研究23-30
• 1 材料與方法23-25
• 2 結(jié)果25-28
• 3 討論28-30
• 第三部分：新型自組裝短肽三維體系下探索白藜蘆醇抗衰老作用研究30-43
• 1 材料與方法30-35
• 2 結(jié)果35-40
• 3 討論40-43
• 全文總結(jié)43-44
• 參考文獻(xiàn)44-48
• 文獻(xiàn)綜述48-57
• 參考文獻(xiàn)54-57
• 致謝57-58
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文58

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 羅賢文;杜芳靜;吳燁;高樓軍;李曉霞;;基于金納米粒子組裝電化學(xué)DNA傳感器檢測(cè)p53抑癌基因的研究[J];分析化學(xué);2013年11期

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本文編號(hào)：1111702