本文關(guān)鍵詞：miR-210促進(jìn)人牙周膜干細(xì)胞血管向分化作用的初步研究

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【摘要】：目的構(gòu)建miR-210的慢病毒載體(Lenti-miR-210-Luciferase),轉(zhuǎn)染人牙周膜干細(xì)胞(h PDLSCs)后,檢測(cè)成血管因子低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)在h PDLSCs的表達(dá)。方法分離培養(yǎng)h PDLSCs,并根據(jù)人miR-210基因(NC_000011.9)序列行引物設(shè)計(jì)及序列片段的PCR擴(kuò)增,將目的基因PCR產(chǎn)物連接到載體p LVX-EGFP-3FLAG-EF1-Luc上。將目的基因PCR產(chǎn)物和目的載體用EcoRⅠ和XbaⅠ分別進(jìn)行酶切,對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行鑒定。采用LR重組系統(tǒng)構(gòu)建慢病毒載體Lenti-miR-210-Luciferase(Lenti-Lac Z-Luciferase為對(duì)照組)。轉(zhuǎn)染h PDLSCs后,通過(guò)q PCR和免疫組化法檢測(cè)HIF-1α及VEGF的表達(dá)。結(jié)果通過(guò)對(duì)構(gòu)建質(zhì)�？寺∵M(jìn)行測(cè)序及酶切,證實(shí)Lenti-miR-210-Luciferase構(gòu)建成功。Lenti-miR-210-Luciferase轉(zhuǎn)染h PDLSCs,0、1、4、7、14 d后行q PCR檢測(cè),結(jié)果表明第4天HIF-1α和VEGF明顯過(guò)表達(dá),且持續(xù)到第14天。免疫組化結(jié)果顯示,miR-210轉(zhuǎn)染h PDLSCs后,抗HIF-1α和抗VEGF染色呈陽(yáng)性,對(duì)照組呈陰性。結(jié)論成功構(gòu)建了慢病毒載體Lenti-miR-210-Luciferase,并且miR-210具有促進(jìn)h PDLSCs血管向分化的作用。
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口腔頜面外科;
【關(guān)鍵詞】： 牙周膜干細(xì)胞 miR- 低氧誘導(dǎo)因子-α 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 慢病毒載體
【基金】：安徽省科技廳重點(diǎn)課題(編號(hào):10021303003)
【分類號(hào)】：R318.08
【正文快照】： 2015-05-08接收microRNAs(miRNAs)是一種內(nèi)源性非編碼的單鏈小分子RNA,長(zhǎng)度為20~22個(gè)核苷酸,到目前為止,人類基因組中有超過(guò)1 400個(gè)miRNA序列(1424 miRbase:17.0)[1]。參與血管生成的內(nèi)皮miR-NAs,也被稱為angiomiRs[2],其中miR-210在細(xì)胞低氧時(shí)高表達(dá),在組織缺血時(shí),miR-210對(duì)

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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2 武成聰;李強(qiáng);陳佳濱;茹嘉;蔡偉良;寧寅寬;;短期凍存兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)其生物特性的影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2014年04期

3 陳聰聰;程迅生;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞基因治療骨缺損的研究進(jìn)展[J];安徽醫(yī)學(xué);2014年04期

4 戴杰;陳現(xiàn)紅;鄧偉民;;機(jī)械振動(dòng)對(duì)骨內(nèi)細(xì)胞效應(yīng)基礎(chǔ)研究進(jìn)展[J];中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志;2014年03期

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6 李瓊;王佐林;;血管內(nèi)皮祖細(xì)胞在構(gòu)建組織工程骨中的研究進(jìn)展[J];口腔頜面外科雜志;2013年06期

7 薛丹;許哲;孫江;馮延民;孫俊毅;;殼聚糖載藥膜引導(dǎo)牙周組織再生的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[J];臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志;2014年08期

8 唐弈遙;周諾;;基因修飾在牽張成骨的研究進(jìn)展[J];口腔頜面外科雜志;2014年05期

9 李瑜;劉媛媛;李帥;梁剛;張亞男;胡慶夕;;交聯(lián)直寫(xiě)海藻酸鹽水凝膠中空纖維的凝膠率與溶脹度[J];化工學(xué)報(bào);2014年12期

10 李春明;舒適;尤艷利;李莎莎;周爽;;microRNAs與血管新生最新研究進(jìn)展[J];遼寧中醫(yī)雜志;2014年12期

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1 鄒凱杰;高海s，

本文編號(hào)：1015933