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生物可降解鎂合金與腸道上皮細胞的生物相容性及其對腸道緊密連接的影響研究

發(fā)布時間:2017-10-11 21:40

  本文關(guān)鍵詞:生物可降解鎂合金與腸道上皮細胞的生物相容性及其對腸道緊密連接的影響研究


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【摘要】:目的:鎂合金因其優(yōu)良的機械性能以及可生物降解吸收等特點,在普外科胃腸吻合材料方面具有良好的應用前景。本課題主要研究鎂合金與大鼠腸道上皮細胞的生物相容性及其對腸道緊密連接相關(guān)因子的影響。材料與方法:本課題主要包括體外細胞實驗和體內(nèi)動物實驗。體內(nèi)實驗:將鎂合金制成條柱狀植入大鼠盲腸,術(shù)前及術(shù)后各時間點檢測血生化指標;植入部位組織做常規(guī)病理和免疫組化檢測;放射影像學評估鎂合金降解情況。體外實驗:不同濃度鎂合金浸提液培養(yǎng)大鼠腸上皮細胞,通過MTT評估浸提液毒性;通過流式細胞儀檢測細胞凋亡;通過Real-time PCR檢測腸道緊密連接相關(guān)因子。結(jié)果:1.體內(nèi)實驗:鎂合金植入后肝腎功能及血鎂離子無明顯影響;植入?yún)^(qū)組織沒有明顯的病理學改變,免疫組化顯示鎂合金上調(diào)組織ZO-1、Occludin和caspase-3表達。2.體外實驗:MTT分析,鎂合金浸提液在40%及以下濃度對腸上皮細胞毒性作用較弱,處于0-1級,對細胞的生長無明顯影響;流式細胞分析,鎂合金浸提液在40%濃度對腸上皮細胞有促凋亡作用。RT-PCR分析,鎂合金浸提液上調(diào)ZO-1、Occludin與Claudins表達,保持細胞穩(wěn)定性;40%濃度浸提液上調(diào)caspase-3表達促進細胞凋亡。結(jié)論鎂合金植入大鼠盲腸后,肝腎功能及血鎂離子濃度無明顯影響,對腸道緊密連接相關(guān)因子表達有促進作用。低濃度合金浸取液對細胞毒性較弱,相對較高濃度合金浸提液促進細胞凋亡;阪V合金可生物降解吸收,良好的力學性能及生物安全性等特點,我們認為其具有潛力適用于普外科胃腸道吻合手術(shù)。
【關(guān)鍵詞】:可降解 鎂合金 生物相容性 盲腸
【學位授予單位】:上海交通大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R656;R318.08
【目錄】:
  • 中文摘要5-6
  • ABSTRACT6-9
  • 符號和單位說明9-10
  • 前言10-17
  • 參考文獻14-17
  • 第一部分 鎂合金體內(nèi)實驗17-35
  • 1 實驗材料、試劑和主要儀器17-20
  • 1.1 實驗動物17
  • 1.2 鎂合金材料制備17-18
  • 1.3 主要實驗試劑18-19
  • 1.4 主要實驗儀器19-20
  • 2 實驗方法20-22
  • 2.1 建立實驗動物模型20
  • 2.2 動物實驗相關(guān)評價指標檢測20-21
  • 2.3 統(tǒng)計方法21-22
  • 3 實驗結(jié)果22-32
  • 3.1 實驗動物一般情況22
  • 3.2 血清學檢測結(jié)果22-24
  • 3.3 盲腸組織病理學檢查結(jié)果24-26
  • 3.4 盲腸組織免疫組化檢測結(jié)果26-31
  • 3.5 合金降解影像學結(jié)果31-32
  • 4 討論32-35
  • 第二部分 鎂合金體外實驗35-54
  • 1 實驗材料、試劑和主要儀器35-38
  • 1.1 主要實驗試劑35
  • 1.2 主要實驗儀器35-36
  • 1.3 實驗細胞培養(yǎng)36
  • 1.4 鎂合金浸提液制備36-38
  • 2 實驗方法38-41
  • 2.1 噻唑藍(MTT)法檢測鎂合金浸提液對腸上皮細胞的毒性38
  • 2.2 流式細胞儀檢測腸上皮細胞凋亡38-39
  • 2.3 Realtime-PCR檢測ZO1、Occludin、Claudin和Caspases-3 基因表達39-40
  • 2.4 統(tǒng)計方法40-41
  • 3 實驗結(jié)果41-51
  • 3.1 MTT法檢測鎂合金浸提液對腸上皮細胞的毒性結(jié)果41-43
  • 3.2 流式細胞儀檢測細胞凋亡結(jié)果43-44
  • 3.3 RT-PCR檢測相關(guān)基因表達結(jié)果44-51
  • 4 討論51-54
  • 全文小結(jié)54-55
  • 參考文獻55-60
  • 致謝60-61
  • 攻讀學位期間發(fā)表的論文61

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本文編號:1014921

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