發(fā)布時(shí)間：2017-10-10 21:21

  本文關(guān)鍵詞：大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與樹枝狀兩親性多肽自組裝凝膠支架的生物相容性

  更多相關(guān)文章： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 -IKVAV 樹枝狀兩親性多肽 細(xì)胞相容性

【摘要】：目的研究大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)與樹枝狀兩親性多肽自組裝凝膠支架的生物相容性。方法獲取大鼠BMSCs,傳至第3代行流式細(xì)胞術(shù)表面抗原檢測及成脂分化誘導(dǎo)鑒定干細(xì)胞。設(shè)計(jì)含雙鏈-IKVAV活性集團(tuán)的樹枝狀兩親性多肽,用固相合成法合成多肽,質(zhì)譜儀(MS)測其分子量,高效液相色譜儀(HPLC)測其純度;將10mg/mL樹枝狀兩親性多肽溶液在兔膝關(guān)節(jié)滑液作用下自組裝為凝膠支架,透射電鏡觀察凝膠超微結(jié)構(gòu);1×109/L的BMSCs懸液分別接種于凝膠內(nèi)部(三維培養(yǎng)體系)及多聚賴氨酸包被的蓋玻片表面(二維培養(yǎng)體系),CCK-8法繪制細(xì)胞生長曲線。DEAD/LIVE雙標(biāo)染色,熒光顯微鏡觀察BMSCs在三維多肽凝膠中成活及增殖情況。結(jié)果分離獲取的細(xì)胞高表達(dá)CD29、CD90,不表達(dá)CD34、CD45,經(jīng)成脂誘導(dǎo)2周出現(xiàn)脂滴,油紅O染色成紅色。MS測得合成多肽相對分子質(zhì)量為2 344.2,與其理論值一致;HPLC分析其純度為95.15%;透射電鏡觀察凝膠由多孔納米纖維構(gòu)成,納米纖維直徑為5~7nm,長度為數(shù)百納米至數(shù)微米;CCK8試驗(yàn)示三維體系中細(xì)胞增殖率明顯高于二維培養(yǎng)體系(P0.05)。DEAD/LIVE雙熒光染色后顯示三維培養(yǎng)體系中細(xì)胞生存、增殖情況良好,未出現(xiàn)明顯的細(xì)胞毒性導(dǎo)致細(xì)胞死亡。結(jié)論含-IKVAV活性基團(tuán)的樹枝狀兩親性多肽與BMSCs具有良好的細(xì)胞相容性并能促進(jìn)其增殖。
【作者單位】： 南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院骨科;
【關(guān)鍵詞】： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 -IKVAV 樹枝狀兩親性多肽 細(xì)胞相容性
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81360271) 江西省教育廳科學(xué)技術(shù)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(No.GJJ14054)~~
【分類號(hào)】：R318.08;R651.2
【正文快照】： Supported by the National Natural Science Foundation of China(No.81360271)and Key Science and Technology Research Programsof Jiangxi Provincial Education Department(No.GJJ14054)隨著我國交通和工業(yè)的快速發(fā)展,脊髓損傷發(fā)生率不斷增加,治療及康復(fù)困難,導(dǎo)致患者勞，

本文編號(hào)：1008680