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大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞與樹枝狀兩親性多肽自組裝凝膠支架的生物相容性

發(fā)布時間:2017-10-10 21:21

  本文關(guān)鍵詞:大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞與樹枝狀兩親性多肽自組裝凝膠支架的生物相容性


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【摘要】:目的研究大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)與樹枝狀兩親性多肽自組裝凝膠支架的生物相容性。方法獲取大鼠BMSCs,傳至第3代行流式細胞術(shù)表面抗原檢測及成脂分化誘導鑒定干細胞。設(shè)計含雙鏈-IKVAV活性集團的樹枝狀兩親性多肽,用固相合成法合成多肽,質(zhì)譜儀(MS)測其分子量,高效液相色譜儀(HPLC)測其純度;將10mg/mL樹枝狀兩親性多肽溶液在兔膝關(guān)節(jié)滑液作用下自組裝為凝膠支架,透射電鏡觀察凝膠超微結(jié)構(gòu);1×109/L的BMSCs懸液分別接種于凝膠內(nèi)部(三維培養(yǎng)體系)及多聚賴氨酸包被的蓋玻片表面(二維培養(yǎng)體系),CCK-8法繪制細胞生長曲線。DEAD/LIVE雙標染色,熒光顯微鏡觀察BMSCs在三維多肽凝膠中成活及增殖情況。結(jié)果分離獲取的細胞高表達CD29、CD90,不表達CD34、CD45,經(jīng)成脂誘導2周出現(xiàn)脂滴,油紅O染色成紅色。MS測得合成多肽相對分子質(zhì)量為2 344.2,與其理論值一致;HPLC分析其純度為95.15%;透射電鏡觀察凝膠由多孔納米纖維構(gòu)成,納米纖維直徑為5~7nm,長度為數(shù)百納米至數(shù)微米;CCK8試驗示三維體系中細胞增殖率明顯高于二維培養(yǎng)體系(P0.05)。DEAD/LIVE雙熒光染色后顯示三維培養(yǎng)體系中細胞生存、增殖情況良好,未出現(xiàn)明顯的細胞毒性導致細胞死亡。結(jié)論含-IKVAV活性基團的樹枝狀兩親性多肽與BMSCs具有良好的細胞相容性并能促進其增殖。
【作者單位】: 南昌大學第二附屬醫(yī)院骨科;
【關(guān)鍵詞】骨髓間充質(zhì)干細胞 -IKVAV 樹枝狀兩親性多肽 細胞相容性
【基金】:國家自然科學基金資助項目(No.81360271) 江西省教育廳科學技術(shù)研究重點項目(No.GJJ14054)~~
【分類號】:R318.08;R651.2
【正文快照】: Supported by the National Natural Science Foundation of China(No.81360271)and Key Science and Technology Research Programsof Jiangxi Provincial Education Department(No.GJJ14054)隨著我國交通和工業(yè)的快速發(fā)展,脊髓損傷發(fā)生率不斷增加,治療及康復困難,導致患者勞,

本文編號:1008680

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