小檗堿對(duì)人皮膚黑素瘤A375細(xì)胞周期相關(guān)miRNA的影響
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【摘要】:目的探討小檗堿對(duì)皮膚黑素瘤A375細(xì)胞株增殖及細(xì)胞周期相關(guān)miRNA及其靶基因表達(dá)的影響。方法體外培養(yǎng)A375細(xì)胞,加入不同濃度小檗堿(0,20,40,60,80,100μmol/L),用噻唑藍(lán)(MTT)法測(cè)定小檗堿對(duì)A375細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用;流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞周期;實(shí)時(shí)定量RT-PCR法檢測(cè)小檗堿對(duì)A375細(xì)胞miRNA-34a,miRNA-154,miRNA-26a,miRNA-124及其對(duì)應(yīng)靶基因CDK4,Cyclin D1,CyclinE,CDK2表達(dá)的影響。采用SPSS13.0軟件進(jìn)行多因素方差分析。結(jié)果 MTT法結(jié)果顯示小檗堿抑制A375細(xì)胞增殖,具有時(shí)效依賴性和量效依賴性(P0.05)。流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明低濃度(20,40μmol/L)小檗堿作用后細(xì)胞周期呈S期阻滯和G2/M期阻滯(均P0.05),高濃度(60,80μmol/L)小檗堿作用后細(xì)胞周期呈G_2/M期阻滯(P0.05)。實(shí)時(shí)定量RT-PCR結(jié)果表明,小檗堿作用后隨著濃度的增加miRNA-34a,miRNA-154,miRNA-26a,miRNA-124表達(dá)增加(均P0.05),其對(duì)應(yīng)的靶基因CDK4,CyclinD1,CyclinE,CDK2表達(dá)減弱(均P0.05)。結(jié)論小檗堿對(duì)A375細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用呈時(shí)間和濃度依賴性;小檗堿可能通過調(diào)控細(xì)胞周期相關(guān)miRNA及其靶基因?qū)谒亓鯝375細(xì)胞發(fā)揮抑制作用。
【作者單位】: 內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院;內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)研究中心;
【關(guān)鍵詞】: 小檗堿 黑素瘤 miRNA 細(xì)胞增殖 細(xì)胞周期
【基金】:2014年內(nèi)蒙古自治區(qū)科技計(jì)劃項(xiàng)目(kjt14sf16) 2016年內(nèi)蒙古自治區(qū)自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(2016MS08137)
【分類號(hào)】:R739.5
【正文快照】: 黑素瘤是最具侵襲性的一種高度惡性、易轉(zhuǎn)移的皮膚腫瘤,早期診斷和及時(shí)治療甚為重要。開發(fā)毒副作用小、具有抑制腫瘤作用的中草藥意義深遠(yuǎn)。小檗堿(berberine)為一種季胺類化合物,屬異喹啉類生物堿,具有多種藥理作用,目前其抗腫瘤作用成為研究熱點(diǎn)。文獻(xiàn)中有小檗堿對(duì)黑素瘤B16
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3 $$點(diǎn)評(píng)人:陸佳韻(現(xiàn)為中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤研究所分子腫瘤學(xué)國(guó)家重點(diǎn)試驗(yàn)室博士生) $$吳eㄖ泄窖Э蒲г褐琢鲅芯克赴鍤抑魅,,我国医学遗传学的奠基人之一
本文編號(hào):973649
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