本文關(guān)鍵詞：吲哚胺2,3-雙加氧酶2（IDO2）在小鼠黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移中的作用研究

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【摘要】：目的:檢測IDO1、IDO2分別在正常小鼠和荷黑色素瘤小鼠組織中的表達(dá);探討吲哚胺2,3-雙加氧酶2(IDO2)抑制劑左旋-1-甲基色氨酸(L-1-MT)對小鼠黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移的影響;體外實(shí)驗(yàn)觀察L-1-MT和沉默腫瘤細(xì)胞中IDO2分別對細(xì)胞增殖、遷移、侵襲特性的影響。方法:1、C57BL/6雄鼠背部皮下接種黑色素瘤細(xì)胞B16-BL6 5×105個/只成瘤,不同時間處死小鼠并收集各臟器組織,用RT-PCR技術(shù)檢測組織中IDO1和IDO2mRNA水平的表達(dá);2、C57BL/6小鼠皮下接種黑色素瘤細(xì)胞B16-BL6成瘤后,再次靜脈注射B16-BL6細(xì)胞建立小鼠黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移模型。應(yīng)用IDO的化學(xué)抑制劑L-1-MT對荷瘤小鼠進(jìn)行干預(yù)治療,觀察肺部成瘤情況并統(tǒng)計肺部成瘤結(jié)節(jié)數(shù);3、分別應(yīng)用IDO化學(xué)抑制劑L-1-MT及IDO2siRNA處理體外培養(yǎng)的黑色素瘤細(xì)胞B16-BL6。qPCR檢測IDO2沉默效率,細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)、transwell細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)觀察對腫瘤細(xì)胞遷移的影響;平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測腫瘤細(xì)胞的增殖情況;transwell細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)觀察腫瘤細(xì)胞侵襲;結(jié)果:1、IDO1在正常小鼠和荷瘤小鼠的表達(dá)都在結(jié)腸和附睪,無明顯差異,而IDO2除了在正常和荷瘤小鼠的肝臟、腎臟、大腦、小腦、附睪中均有表達(dá)外,在荷瘤小鼠的脾臟、肺、結(jié)腸、胸腺存在異常表達(dá),在上述小鼠中均未發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移。2、口服L-1-MT治療可抑制C57BL/6小鼠皮下黑色素瘤的生長,同時使黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移模型小鼠肺部成瘤率減少。3、體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn):L-1-MT和沉默細(xì)胞中IDO2均能使B16-BL6細(xì)胞劃痕遷移變慢、單克隆形成密度將低、transwell細(xì)胞遷移數(shù)減少、transwell細(xì)胞侵襲數(shù)減少。結(jié)論:1.荷黑色素瘤小鼠組織中異常表達(dá)的IDO2促進(jìn)小鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移。2.IDO2影響黑色素瘤細(xì)胞B16-BL6的增殖、遷移、和侵襲。
【關(guān)鍵詞】：2 3-雙加氧酶2(IDO2) 左旋-1-甲基色氨酸(L-1-MT) 黑色素瘤 肺轉(zhuǎn)移
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R739.5
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮寫一覽表9-10
• 第1章 引言10-13
• 1.1 IDO與腫瘤免疫10-11
• 1.2 IDO2抑制劑 1-MT11-13
• 第2章 材料與方法13-24
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動物、試劑與設(shè)備13-15
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動物及細(xì)胞株13
• 2.1.2 主要的實(shí)驗(yàn)試劑13
• 2.1.3 主要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備13-14
• 2.1.4 主要的試劑配制14-15
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法15-24
• 2.2.1 腫瘤細(xì)胞株B16-BL6的體外培養(yǎng)15
• 2.2.2 小鼠動物成瘤實(shí)驗(yàn)分組15
• 2.2.3 RT-PCR檢測小鼠組織中IDO1、IDO2mRNA水平的表達(dá)15-18
• 2.2.4 構(gòu)建黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移模型[31-33]及L1MT治療18-19
• 2.2.5 轉(zhuǎn)染IDO2SiRNA沉默B16-BL6腫瘤細(xì)胞中的IDO219-21
• 2.2.6 平板克隆形成實(shí)驗(yàn)21-22
• 2.2.7 劃痕實(shí)驗(yàn)22
• 2.2.8 Transwell細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)22
• 2.2.9 Transwell細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)22-23
• 2.2.10 統(tǒng)計學(xué)分析23-24
• 第3章 結(jié)果24-32
• 3.1 IDO1、IDO2 分別在正常小鼠和荷黑色素瘤小鼠組織中的表達(dá)24-25
• 3.2 動物實(shí)驗(yàn)小鼠的腫瘤生長情況25-27
• 3.2.1 L-1-MT 對小鼠皮下黑色素瘤的治療效果25-26
• 3.2.2 L-1-MT 對小鼠黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移的治療效果26-27
• 3.3 體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)觀察L1MT和沉默細(xì)胞中IDO2分別對B16-BL6細(xì)胞生物學(xué)特性的影響27-32
• 3.3.1 RT-PCR檢測B16-BL6細(xì)胞中IDO的表達(dá)及qPCR檢測細(xì)胞中IDO2的沉默效果27
• 3.3.2 qPCR 檢測 B16-BL6 細(xì)胞中 IDO2 的沉默效果27
• 3.3.3 B16-BL6 細(xì)胞平板克隆形成實(shí)驗(yàn)27-29
• 3.3.4 B16-BL6 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)29-30
• 3.3.5 B16-BL6細(xì)胞transwell侵襲實(shí)驗(yàn)30
• 3.3.6 B16-BL6 細(xì)胞 transwell 侵襲實(shí)驗(yàn)30-32
• 第4章 討論32-35
• 第5章 結(jié)論35-36
• 致謝36-37
• 參考文獻(xiàn)37-40
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果40-41
• 綜述41-47
• 參考文獻(xiàn)44-47

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 李堯;岳志強(qiáng);陶麗;朱智杰;王愛云;陳文星;陸茵;;去甲斑蝥素抑制B16F10黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移的研究[J];中國藥理學(xué)通報;2013年10期

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本文編號：914098