本文關(guān)鍵詞：慢病毒載體介導(dǎo)CDK2基因沉默對黑素瘤B16-F1細(xì)胞生物學(xué)行為的影響

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【摘要】：目的:探討由慢病毒載體p UL介導(dǎo)的p UL-CDK2-shRNA3(CDK2-shRNA)沉默CDK2基因后對小鼠黑素瘤B16-F1細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的影響,初步探索其作用機(jī)制。方法:利用重組慢病毒載體CDK2-shRNA轉(zhuǎn)染B16-F1細(xì)胞,MTT法檢測其對細(xì)胞增殖的影響,DAPI染色、Annexin V-FITC/PI雙染流式術(shù)檢測細(xì)胞凋亡情況,流式術(shù)檢測細(xì)胞周期變化,細(xì)胞黏附實驗、transwell小室實驗分別檢測細(xì)胞黏附、侵襲和遷移能力變化,Western blotting檢測細(xì)胞周期信號通路上RB蛋白(成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤蛋白)、pRB蛋白、細(xì)胞周期相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子E2F1及侵襲遷移相關(guān)蛋白基質(zhì)金屬酶-2(MMP-2)、基質(zhì)金屬酶-9(MMP-9)的表達(dá)水平。結(jié)果:與空白對照組和陰性對照組相比,CDK2-shRNA組細(xì)胞相對增殖率、細(xì)胞黏附率、細(xì)胞侵襲和遷移能力均顯著下降(均P0.05)。細(xì)胞凋亡率顯著增加(均P0.05);G1期細(xì)胞顯著增加而S期和G2期顯著降低(P0.05)。細(xì)胞周期相關(guān)蛋白pRB、E2F1明顯降低而RB顯著升高(P0.05),細(xì)胞侵襲和遷移相關(guān)蛋白MMP-2、MMP-9明顯降低(P0.05)。結(jié)論:慢病毒載體p UL介導(dǎo)的shRNA沉默CDK2基因?qū)16-F1細(xì)胞惡性生物學(xué)行為有顯著的抑制作用,其機(jī)制主要與細(xì)胞周期和細(xì)胞侵襲遷移相關(guān)蛋白表達(dá)變化有關(guān)。
【作者單位】： 鶴壁職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院;湖北省食品藥品監(jiān)督檢驗研究院;鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗科;
【關(guān)鍵詞】： 黑素瘤 B-F細(xì)胞 CDK基因 sh-RNA 惡性生物學(xué)行為 機(jī)制
【基金】：河南省科技計劃項目(No.122300410193) 河南省高等學(xué)校青年骨干教師資助計劃項目(No.2011GGJS-262)~~
【分類號】：R739.5
【正文快照】： [Chin J Cancer Biother,2016,23(2):243-249.DOI:10.3872/j.issn.1007-385X.2016.02.015]惡性黑素瘤是最具侵襲性的皮膚腫瘤,早期惡性黑素瘤可以通過手術(shù)切除的方式得到緩解;一旦發(fā)生轉(zhuǎn)移,雖可應(yīng)用各種化學(xué)藥物和生物藥物治療,但預(yù)后很差[1-3],原因是晚期黑素瘤會不可避免地

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1 孟靜;于建斌;張江安;;骨橋蛋白在黑素瘤中的表達(dá)[J];中國皮膚性病學(xué)雜志;2011年02期

2 李鶴;魏志平;劉彥群;;黑素瘤生物治療的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2011年12期

3 李薇薇;涂平;汪e，

本文編號：753952