本文關(guān)鍵詞：成纖維細(xì)胞生長因子對銀屑病皮膚間充質(zhì)干細(xì)胞影響的研究

  更多相關(guān)文章： 銀屑病 SMSCs培養(yǎng)鑒定 MSC生長增殖 bFGF

【摘要】：[目的] 通過研究成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)對銀屑病患者皮膚間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells, SMSCs)在體外培養(yǎng)生長的影響,明確其bFGF在SMSCs生長增殖中發(fā)揮的重要作用,同時(shí)通過對銀屑病患者皮膚MSCs體外生物學(xué)活性的鑒定及其細(xì)胞因子分泌水平的測定,為bFGF在參與銀屑病皮膚微環(huán)境改變提供其理論基礎(chǔ)。 [方法] ①分離、培養(yǎng)20例銀屑病患者皮損與20例健康人皮膚的單個(gè)核細(xì)胞,②用流式細(xì)胞儀檢測其細(xì)胞表面相關(guān)標(biāo)記物包括CD34、CD45、CD29、CD105、CD73、CD90及HLA-DR③經(jīng)相應(yīng)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞,并鑒定多向分化的細(xì)胞④ELISA法檢測第3代皮膚單個(gè)核細(xì)胞培養(yǎng)上清液細(xì)胞因子水平⑤采用bFGF的濃度為10g/L,通過添加(bFGF)這個(gè)對細(xì)胞生長增殖有影響作用的細(xì)胞因子,且依據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)的天數(shù),在規(guī)定時(shí)間內(nèi)利用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀對SMSCs進(jìn)行計(jì)數(shù),繪制bFGF作用下的細(xì)胞生長曲線圖,觀察bFGF對MSCs細(xì)胞生長增殖的影響⑥依據(jù)Pearson相關(guān)分析,對其銀屑病皮損程度和面積大小進(jìn)行PASI評分,從而探討細(xì)胞因子bFGF分泌在銀屑病發(fā)病中的重要作用。[結(jié)果] ①經(jīng)分離、培養(yǎng)MSCs,待細(xì)胞貼壁達(dá)90%以上,傳至第3代,倒置顯微鏡下觀察,銀屑病組和健康對照組MSCs細(xì)胞形態(tài)相似；②銀屑病組與健康對照組皮膚MSCs,細(xì)胞表面抗原均表達(dá)CD29、CD44、CD73、CD90、CD105,而CD34、CD45及HLA-DR表達(dá)陰性,說明所培養(yǎng)的SMMSCs純度較高；③銀屑病組與健康對照組皮膚MSCs多向分化能力相似,均可向脂肪細(xì)胞和成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞分化④通過繪制細(xì)胞生長曲線,發(fā)現(xiàn)bFGF實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞生長增殖明顯快于bFGF對照組,；⑤銀屑病患者皮損MSCs上清液中bFGF升高，，IL-6、HGF顯著降低(P0.05),而兩組VEGF比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；銀屑病患者SMSCs細(xì)胞因子水平與PASI評分無相關(guān)性。[結(jié)論] ①建立并分離、培養(yǎng)、鑒定了SMSCs,為培養(yǎng)SMSCs提供了正確、有效的方法,明確了SMSCs的生物學(xué)活性；2.在皮膚間充質(zhì)干細(xì)胞SMSCs的原代生長增殖中,成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)具有明顯的促生長作用；3.銀屑病患者皮損SMSCs細(xì)胞因子分泌水平異常,皮損SMSCs分泌的堿性成纖維細(xì)胞因子(bFGF),可能間接地促進(jìn)了銀屑病皮膚微環(huán)境的炎癥反應(yīng),從而促進(jìn)了銀屑病的發(fā)生和發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】：銀屑病 SMSCs培養(yǎng)鑒定 MSC生長增殖 bFGF
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R758.63
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 縮略詞表9-10
• 前言10-12
• 第一章 材料與方法12-18
• 1. 標(biāo)本來源12
• 2. 主要試劑12-13
• 3. 主要儀器設(shè)備13
• 4. 主要試劑配制13-15
• 5. 實(shí)驗(yàn)方法15-17
• 6. 統(tǒng)計(jì)處理17-18
• 第二章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果18-20
• 1. S-MSCs培養(yǎng)形態(tài)學(xué)的觀察18
• 1.1. bFGF實(shí)驗(yàn)組SMSCs生長18
• 1.2. bFGF對照組SMSCs生長18
• 1.3. 傳代后兩組SMSCs生長比較18
• 2 SMSCs表面標(biāo)記物鑒定結(jié)果18
• 3 SMSCs多項(xiàng)誘導(dǎo)分化潛能鑒定結(jié)果18-19
• 4. bFGF作用下SMSCs生長增殖能力檢測結(jié)果19
• 5. ELISA法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液中細(xì)胞因子結(jié)果19
• 6. Pearson相關(guān)分析患者細(xì)胞因子水平與病變嚴(yán)重程度19-20
• 第三章 討論20-22
• 第四章 結(jié)論22-23
• 參考文獻(xiàn)23-25
• 附圖25-30
• 文獻(xiàn)綜述30-36
• 參考文獻(xiàn)34-36
• 個(gè)人簡歷36-37
• 致謝37

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

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本文編號：703096