皮膚光老化SD大鼠模型的構(gòu)建及p38MAPK通路的組織學(xué)表達(dá)
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更多相關(guān)文章: 光老化 動物模型 p38MAPK 熱休克蛋白 免疫組化
【摘要】:目的:探索皮膚光老化Sprague-Dawley大鼠模型的構(gòu)建方法,探討該模型的評價標(biāo)準(zhǔn)。并對光老化中p38絲裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信號通路的表達(dá)進(jìn)行組織學(xué)檢測,探討其在光老化中的意義。方法:SD大鼠隨機(jī)分為空白對照組,紫外線低劑量組、中劑量組、高劑量組,每組8只。采用長波紫外線結(jié)合中波紫外線模擬日光,照射低、中、高劑量組大鼠背部皮膚,每天一次,持續(xù)10周,其中:1)低劑量組以10 min/d維持;2)中劑量組以10 min/d起始,每2周遞增10 min至20 min/d,并以20 min/d維持;3)高劑量組以10 min/d起始,每2周遞增10 min至30 min/d,并以30 min/d維持。觀察皮膚外觀,行皺紋等級評分;HE染色、Masson染色、透射電鏡驗(yàn)證組織病理及超微結(jié)構(gòu)改變;生化指標(biāo)選擇丙二醛(MDA)、羥脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)檢測氧化衰老程度。并評價各組的造模水平。取造模成功組進(jìn)一步行免疫組化,檢測p38MAPK、基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)、熱休克蛋白27(Hsp27)的表達(dá),通過圖像分析系統(tǒng)分析其平均光密度值。結(jié)果:10周結(jié)束后,低、中、高劑量組大鼠皮膚均出現(xiàn)不同程度的皺紋,其中高劑量組皺紋深大、持久,皮膚明顯粗糙、缺乏彈性,其老化表現(xiàn)能穩(wěn)定維持、不易消退。組織學(xué)上高劑量組出現(xiàn)典型的表皮增厚、腺體增生、膠原纖維減少,超微結(jié)構(gòu)下可見老化壞死細(xì)胞增多、真皮結(jié)構(gòu)破壞,均較低、中劑量組顯著。生化指標(biāo)結(jié)果提示,低、中、高劑量組MDA含量均較對照組升高,Hyp降低,但二者僅有高劑量組與對照組存在統(tǒng)計學(xué)差異(P(27)0.05);SOD的活性在紫外線照射的三組中有不同程度降低,但差別與對照組均無統(tǒng)計學(xué)意義(P(29)0.05)。結(jié)合以上評判標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)為高劑量組為造模較成功的一組,行免疫組化,結(jié)果提示光老化組織中p38MAPK于角質(zhì)形成細(xì)胞胞漿、腺體、真皮淺層纖維間陽性表達(dá),MMP-1主要于角質(zhì)形成細(xì)胞胞漿、真皮淺層纖維間及成纖維細(xì)胞胞漿陽性表達(dá),Hsp27主要于表皮細(xì)胞內(nèi)及真皮淺層陽性表達(dá);三者平均光密度值均較對照組升高且有顯著差異(P(27)0.01)。結(jié)論:高劑量組SD大鼠皮膚具備光老化的典型特征,表明利用紫外線劑量遞增、維持10周的方法可更為穩(wěn)定、有效地誘導(dǎo)光老化動物模型。在光老化中,p38MAPK通路相關(guān)因子的組織學(xué)表達(dá)增高,分析提示其在光老化發(fā)展及損傷后修復(fù)中有著重要作用。
【關(guān)鍵詞】:光老化 動物模型 p38MAPK 熱休克蛋白 免疫組化
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R-332;R758.1
【目錄】:
- 英漢縮略語名詞對照4-6
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-11
- 前言11-12
- 1 材料和儀器12-13
- 2 方法13-20
- 3 結(jié)果20-28
- 討論及結(jié)論28-34
- 參考文獻(xiàn)34-38
- 附圖38-39
- 文獻(xiàn)綜述39-45
- 參考文獻(xiàn)41-45
- 致謝45-46
- 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及參與項(xiàng)目46
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