本文關(guān)鍵詞：皮膚光老化SD大鼠模型的構(gòu)建及p38MAPK通路的組織學表達

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【摘要】：目的:探索皮膚光老化Sprague-Dawley大鼠模型的構(gòu)建方法,探討該模型的評價標準。并對光老化中p38絲裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信號通路的表達進行組織學檢測,探討其在光老化中的意義。方法:SD大鼠隨機分為空白對照組,紫外線低劑量組、中劑量組、高劑量組,每組8只。采用長波紫外線結(jié)合中波紫外線模擬日光,照射低、中、高劑量組大鼠背部皮膚,每天一次,持續(xù)10周,其中:1)低劑量組以10 min/d維持;2)中劑量組以10 min/d起始,每2周遞增10 min至20 min/d,并以20 min/d維持;3)高劑量組以10 min/d起始,每2周遞增10 min至30 min/d,并以30 min/d維持。觀察皮膚外觀,行皺紋等級評分;HE染色、Masson染色、透射電鏡驗證組織病理及超微結(jié)構(gòu)改變;生化指標選擇丙二醛(MDA)、羥脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)檢測氧化衰老程度。并評價各組的造模水平。取造模成功組進一步行免疫組化,檢測p38MAPK、基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)、熱休克蛋白27(Hsp27)的表達,通過圖像分析系統(tǒng)分析其平均光密度值。結(jié)果:10周結(jié)束后,低、中、高劑量組大鼠皮膚均出現(xiàn)不同程度的皺紋,其中高劑量組皺紋深大、持久,皮膚明顯粗糙、缺乏彈性,其老化表現(xiàn)能穩(wěn)定維持、不易消退。組織學上高劑量組出現(xiàn)典型的表皮增厚、腺體增生、膠原纖維減少,超微結(jié)構(gòu)下可見老化壞死細胞增多、真皮結(jié)構(gòu)破壞,均較低、中劑量組顯著。生化指標結(jié)果提示,低、中、高劑量組MDA含量均較對照組升高,Hyp降低,但二者僅有高劑量組與對照組存在統(tǒng)計學差異(P(27)0.05);SOD的活性在紫外線照射的三組中有不同程度降低,但差別與對照組均無統(tǒng)計學意義(P(29)0.05)。結(jié)合以上評判標準認為高劑量組為造模較成功的一組,行免疫組化,結(jié)果提示光老化組織中p38MAPK于角質(zhì)形成細胞胞漿、腺體、真皮淺層纖維間陽性表達,MMP-1主要于角質(zhì)形成細胞胞漿、真皮淺層纖維間及成纖維細胞胞漿陽性表達,Hsp27主要于表皮細胞內(nèi)及真皮淺層陽性表達;三者平均光密度值均較對照組升高且有顯著差異(P(27)0.01)。結(jié)論:高劑量組SD大鼠皮膚具備光老化的典型特征,表明利用紫外線劑量遞增、維持10周的方法可更為穩(wěn)定、有效地誘導光老化動物模型。在光老化中,p38MAPK通路相關(guān)因子的組織學表達增高,分析提示其在光老化發(fā)展及損傷后修復中有著重要作用。
【關(guān)鍵詞】：光老化 動物模型 p38MAPK 熱休克蛋白 免疫組化
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R-332;R758.1
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照4-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-12
• 1 材料和儀器12-13
• 2 方法13-20
• 3 結(jié)果20-28
• 討論及結(jié)論28-34
• 參考文獻34-38
• 附圖38-39
• 文獻綜述39-45
• 參考文獻41-45
• 致謝45-46
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術(shù)論文及參與項目46

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