本文關(guān)鍵詞：毛發(fā)移植對(duì)頭皮白癜風(fēng)復(fù)色的臨床療效評(píng)估及作用機(jī)制的研究

  更多相關(guān)文章： 白癜風(fēng) 毛發(fā)移植 毛囊部神經(jīng)嵴干細(xì)胞 黑素細(xì)胞 白發(fā)

【摘要】：研究背景白癜風(fēng)是一種常見的皮膚色素缺失性疾病,發(fā)病率在0.1%到3%不等,在不同種族和地域之間存在顯著的差異,且有50%左右的患者是在20歲之前發(fā)病的,對(duì)患者本人及家庭帶來了巨大心理壓力。臨床上治療白癜風(fēng)的方法繁多,包括系統(tǒng)或局部的藥物治療,光療,以及多種外科手段(吸皰移植,環(huán)鉆移植,毛囊移植、非培養(yǎng)的黑素細(xì)胞移植等)治療。發(fā)生在某些特殊部位的白癜風(fēng)對(duì)一般的藥物治療或光療等效果均不理想,其中包括肢端、粘膜部位、節(jié)段性白癜風(fēng)等,尤其是對(duì)頭皮白發(fā),目前還沒有一種確實(shí)有效的方法可以對(duì)其進(jìn)行復(fù)色。頭皮發(fā)生白癜風(fēng)的情況并不多見,不同于俗稱“少白頭”的早老性白發(fā),其表現(xiàn)為頭皮局部區(qū)域的毛發(fā)全部變白,同時(shí)伴有頭皮脫色,對(duì)患者的外貌及心理產(chǎn)生非常強(qiáng)烈的負(fù)面影響。利用毛囊移植治療白癜風(fēng)在國(guó)外有個(gè)別報(bào)道,這種治療方法都是基于對(duì)毛囊的ORS部位,尤其是上三分之二的部分為大量黑素前體細(xì)胞的儲(chǔ)存部位的認(rèn)識(shí),因此臨床觀察到的情況是患者在治療后可以通過圍繞毛囊產(chǎn)生色素的方式進(jìn)行復(fù)色。但是,目前對(duì)于白癜風(fēng)所致頭皮白發(fā)的各種治療方法還缺乏足夠的臨床試驗(yàn)來進(jìn)一步證實(shí)其有效性,且作用機(jī)理也不明確。目前已有的研究證實(shí)毛囊的隆突部位是神經(jīng)嵴干細(xì)胞(neural crest stem cell, NCSC)的儲(chǔ)存部位,且位置不隨毛發(fā)周期的變化而變化。NCSC在毛發(fā)生長(zhǎng)初期分化為成熟的黑素細(xì)胞,且在毛發(fā)著色和表皮著色是不同步的,其機(jī)制也完全不同,故有學(xué)者提出了“表皮黑素單位”和“毛囊黑素單位”的說法。對(duì)于“毛囊黑素單位”來說,著色是伴隨在毛發(fā)生長(zhǎng)周期中,NCSC產(chǎn)生出的子代進(jìn)一步遷移到毛球中分化成熟為黑素細(xì)胞,并產(chǎn)生大量的黑素顆粒,沿毛干的皮質(zhì)向上運(yùn)輸,產(chǎn)生了臨床上看到的有色的毛發(fā)。白癜風(fēng)的發(fā)生不僅僅累及表皮黑素細(xì)胞,在毛發(fā)部位的毛囊黑素細(xì)胞也受到影響(可以見到毛發(fā)脫色現(xiàn)象)。本研究主要是針對(duì)毛囊黑素細(xì)胞在白癜風(fēng)發(fā)生、發(fā)展過程中所受到的影響而進(jìn)行的。本課題組在既往的研究中已經(jīng)成功建立體外NCSC模型,并對(duì)其在生理?xiàng)l件下向黑素細(xì)胞分化的調(diào)控進(jìn)行了研究。我們對(duì)白癜風(fēng)累及頭皮毛發(fā)的患者進(jìn)行了毛發(fā)移植,并在隨訪過程中評(píng)估了療效及安全性；對(duì)其復(fù)色機(jī)理進(jìn)行了研究,初步了解白癜風(fēng)可能的發(fā)病機(jī)理,以及在此過程中毛囊黑素細(xì)胞系發(fā)生的病理變化、調(diào)控因素等。研究目的本課題設(shè)想通過單株毛發(fā)移植來治療白癜風(fēng)所致頭皮白發(fā),探討該方法臨床應(yīng)用的優(yōu)缺點(diǎn),并統(tǒng)計(jì)白發(fā)復(fù)色的隨訪結(jié)果,評(píng)價(jià)該方法應(yīng)用價(jià)值；并以此實(shí)驗(yàn)結(jié)果為基礎(chǔ),根據(jù)臨床觀察結(jié)果進(jìn)行白癜風(fēng)復(fù)色機(jī)制方面的免疫組化研究；我們選取衰老引起的白發(fā)為研究對(duì)象,通過對(duì)衰老白發(fā)中黑素細(xì)胞系分化調(diào)控的研究,進(jìn)一步理解白癜風(fēng)可能的發(fā)病機(jī)制。研究方法通過單株毛發(fā)移植的方法對(duì)白癜風(fēng)累及頭皮的患者進(jìn)行治療,將枕部黑發(fā)分離成單株毛發(fā)后植入皮損區(qū)域。經(jīng)過2年時(shí)間的隨訪,觀察臨床復(fù)色情況,并通過數(shù)碼相機(jī)和電子顯微鏡記錄結(jié)果；對(duì)患者進(jìn)行焦慮抑郁量表測(cè)試,評(píng)估精神狀態(tài)；評(píng)估該方法優(yōu)缺點(diǎn)和安全性。接下來,我們?cè)偻ㄟ^免疫組化的方法,將人類毛囊隆突部位的NCSC細(xì)胞和黑素細(xì)胞譜系細(xì)胞作為研究對(duì)象,以正常人黑發(fā)做對(duì)照,對(duì)由白癜風(fēng)所致白發(fā)的毛囊NCSC細(xì)胞到分化為黑素細(xì)胞的路徑相關(guān)調(diào)控基因表達(dá)的蛋白進(jìn)行相關(guān)研究。由于白癜風(fēng)毛發(fā)取材有限,制片困難,我們選取衰老引起的白發(fā)和黑發(fā)作為研究對(duì)象,通過對(duì)白發(fā)發(fā)生過程中黑素細(xì)胞系定向分化調(diào)控過程的研究,進(jìn)一步理解白癜風(fēng)可能的發(fā)病機(jī)制。研究結(jié)果和結(jié)論第一部分：毛發(fā)移植治療白癜風(fēng)所致頭皮白發(fā)的療效和安全性評(píng)估1.頭皮白癜風(fēng)患者進(jìn)行毛發(fā)移植治療后心理抑郁焦慮狀態(tài)有明顯改善,同時(shí)生活質(zhì)量有了很大提升,與正常人無差異。2.我們研究的發(fā)生在頭皮且累及毛發(fā)的白癜風(fēng)都是節(jié)段型。3.人類毛發(fā)部位NCSC和毛球部干細(xì)胞分化為毛囊黑素細(xì)胞產(chǎn)生黑素顆粒的功能和毛質(zhì)角質(zhì)形成細(xì)胞可能并不受到完整的ORS周圍微環(huán)境的影響�！@種免疫逃避現(xiàn)象值得進(jìn)一步研究解釋。4.隨著毛發(fā)移植患者隨訪時(shí)間的延長(zhǎng),毛發(fā)復(fù)色是可以期待的。5. 毛囊隆突部位NCSC細(xì)胞和毛球部干細(xì)胞儲(chǔ)存庫的植入帶來了黑素祖細(xì)胞,證實(shí)了表皮黑素細(xì)胞可以突破ORS的限制,經(jīng)過分化、增殖和移行,.最終達(dá)到表皮的完全復(fù)色,而毛囊黑素細(xì)胞是否能夠正常分化增殖或是移行有無障礙需要進(jìn)一步的觀察隨訪；證實(shí)毛囊黑素細(xì)胞和表皮黑素細(xì)胞各自在原位有不同的抗原結(jié)構(gòu)的學(xué)說,形成了臨床觀察到的表皮與毛囊復(fù)色不平行的結(jié)果；且以上結(jié)果不受性別和年齡的影響。6. 臨床觀察毛發(fā)移植治療頭皮白癜風(fēng)安全性良好,優(yōu)點(diǎn)主要是比起傳統(tǒng)治療方法療程較短；無口服或外用藥物可能引起的藥物副作用；不會(huì)產(chǎn)生排異反應(yīng)；植入的毛發(fā)存活后保持黑色不變,在視覺上感到病損區(qū)域毛發(fā)全白的現(xiàn)象有改善；頭皮復(fù)色均勻,未見鵝卵石樣表現(xiàn)。缺點(diǎn)與一般毛發(fā)移植一致。7. 隨訪2年,白癜風(fēng)所致白發(fā)仍沒有明顯的復(fù)色,可能原因分析如下：生成毛囊黑素細(xì)胞的干細(xì)胞功能損傷；毛囊黑素細(xì)胞生成的黑素小體產(chǎn)生異常,或是參與黑素小體運(yùn)輸?shù)拿医琴|(zhì)形成細(xì)胞功能異常造成黑素小體不能到達(dá)毛干等；植入毛發(fā)隆突部位的黑素前體細(xì)胞未能遷移至白發(fā)部位對(duì)其復(fù)色。在接下來的研究中對(duì)此會(huì)有進(jìn)一步探討。第二部分：白癜風(fēng)所致白發(fā)毛囊神經(jīng)嵴干細(xì)胞向黑素細(xì)胞系定向分化的調(diào)控過程的免疫組化研究1.對(duì)標(biāo)本切片前的處理十分關(guān)鍵,取得標(biāo)本后首先要沿毛發(fā)生長(zhǎng)方向,將標(biāo)本塊切成一個(gè)毛囊單位厚薄的皮片,這樣才能取得盡量多的毛囊縱切面的切片。該方法的實(shí)施給毛發(fā)研究提供了很多便利。此方法以往未見有過相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。2.淋巴細(xì)胞攻擊的目標(biāo)為毛囊隆突部位,即NCSC所處部位,而在毛球部位則未見淋巴細(xì)胞浸潤(rùn),故而考慮白癜風(fēng)發(fā)生的細(xì)胞毒性攻擊可能僅針對(duì)NCSC或是隆突部位的黑素干細(xì)胞,從而影響正常的黑素細(xì)胞生成、遷移等,而不是由成熟的黑素細(xì)胞遭到攻擊而凋亡引起的。同時(shí)角質(zhì)形成細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生了空泡樣變化,正常細(xì)胞間的橋粒連接也不清晰,呈現(xiàn)出凋亡樣表現(xiàn)。3.白癜風(fēng)毛囊隆突部位干細(xì)胞過早分化,干細(xì)胞數(shù)量減少；在表皮基底層和毛球部位可以看到白癜風(fēng)的表皮黑素細(xì)胞和毛囊黑素細(xì)胞均有減少,而不是完全消失,且毛囊黑素細(xì)胞沿ORS分布,提示了毛囊黑素細(xì)胞從隆突部位到毛球可能的運(yùn)輸路徑。4.大量的角質(zhì)形成細(xì)胞發(fā)生類似毛發(fā)退行期的凋亡樣表現(xiàn),因此其產(chǎn)生促進(jìn)黑素細(xì)胞正常分化增殖的細(xì)胞因子的功能缺失,可能是造成黑素細(xì)胞不能正常生成的原因之一。5.白癜風(fēng)的某些表現(xiàn)類似老年人毛囊中的發(fā)現(xiàn),可能此過程與衰老機(jī)制相關(guān)。6.臨床上看到的白斑確實(shí)是缺乏黑素細(xì)胞直接造成的,而在生成黑素細(xì)胞的隆突部位,和本應(yīng)在毛囊黑素細(xì)胞數(shù)量較多的毛球部位,抗Tyr陽性細(xì)胞也大大減少,生成黑素顆粒的能力削弱,所以造成了臨床上看到的白發(fā)。第三部分：白發(fā)毛囊黑素細(xì)胞譜系表型的相關(guān)研究1.黑發(fā)的隆突部位存在形成毛干和填充黑素顆粒的干細(xì)胞；白發(fā)的隆突部位仍然有干細(xì)胞存在,但Nestin和p75NTR表達(dá)相對(duì)降低。2.白發(fā)的發(fā)生過程中Nestin基因表達(dá)的變化可能是影響黑素干細(xì)胞→毛囊黑素細(xì)胞過程關(guān)鍵點(diǎn)。3.白發(fā)隆突部位NCSC或黑素干細(xì)胞細(xì)胞數(shù)量減少,造成下游成熟黑素細(xì)胞數(shù)量減少。4.人類毛囊的著色過程是獨(dú)特的,與表皮不同,同時(shí)與小鼠毛囊部位得出的結(jié)論不平行,因此不能將小鼠作為毛發(fā)模型完全代替人類。5.表皮中有表皮干細(xì)胞和表皮黑素細(xì)胞的正常表達(dá),無論白發(fā)還是黑發(fā)差別不大。6.如果研究?jī)H納入白發(fā)隆突和毛球部位,可以模擬白癜風(fēng)在毛發(fā)部位的表達(dá),為白癜風(fēng)研究提供便利。局限性由于研究時(shí)間有限,毛發(fā)移植后隨訪病人還需延長(zhǎng)至少1年并進(jìn)行再次評(píng)價(jià)；由于白癜風(fēng)累及頭皮的皮損取材和制片存在巨大困難,限制了對(duì)毛發(fā)白癜風(fēng)的研究；白發(fā)取材雖然相對(duì)簡(jiǎn)單,但不能完全模擬白癜風(fēng)發(fā)病過程。
【關(guān)鍵詞】：白癜風(fēng) 毛發(fā)移植 毛囊部神經(jīng)嵴干細(xì)胞 黑素細(xì)胞 白發(fā)
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R758.41
【目錄】：

• 術(shù)語縮寫4-5
• 中文摘要5-9
• 英文摘要9-14
• 前言14-17
• 第一部分：毛發(fā)移植治療白癜風(fēng)所致頭皮白發(fā)的療效和安全性評(píng)估17-36
• 一、引言17-18
• 二、材料和方法18-26
• 三、結(jié)果26-31
• 四、討論31-35
• 五、小結(jié)35-36
• 第二部分 白疲風(fēng)所致白發(fā)毛X/神經(jīng)U詬上赴蠔謁叵赴刀ㄏ蚍只骺毓痰拿庖咦榛芯，
  
  本文編號(hào)：623351
  boshi