本文關(guān)鍵詞：脂筏調(diào)控人惡性黑色素瘤細(xì)胞遷移的作用機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 脂筏 黏著斑 肌動(dòng)蛋白骨架 細(xì)胞遷移

【摘要】：腫瘤轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致癌癥患者死亡的主要原因。為了成功轉(zhuǎn)移，腫瘤細(xì)胞必須利用其固有的遷移能力侵入周圍組織并穿過(guò)血管壁。因此腫瘤細(xì)胞的遷移是腫瘤轉(zhuǎn)移的必要條件，，理解腫瘤細(xì)胞遷移的分子機(jī)制將對(duì)抗腫瘤轉(zhuǎn)移的治療有非常重要的意義。 腫瘤細(xì)胞在基質(zhì)上的遷移是一個(gè)多步驟協(xié)調(diào)的過(guò)程，包括細(xì)胞前端向前突出，突出黏附于細(xì)胞外基質(zhì)（Extracellular matrix，ECM），胞體向前移動(dòng)，尾部收縮等幾個(gè)階段。這幾個(gè)步驟的循環(huán)往復(fù)使細(xì)胞能夠發(fā)生持續(xù)的遷移運(yùn)動(dòng)。在這些過(guò)程中，肌動(dòng)蛋白骨架和黏著斑的動(dòng)態(tài)變化起關(guān)鍵作用。肌動(dòng)蛋白骨架的重排為細(xì)胞前端突出的形成及胞體的向前移動(dòng)提供了動(dòng)力，而黏著斑在細(xì)胞前端的形成將突出錨定于基質(zhì)，在細(xì)胞尾部的去組裝使細(xì)胞收縮向前移動(dòng)。同時(shí)，肌動(dòng)蛋白骨架與黏著斑之間存在密切的關(guān)系。肌動(dòng)蛋白骨架能夠調(diào)控黏著斑的形成及穩(wěn)定。因此，影響肌動(dòng)蛋白骨架重排的因素很可能參與調(diào)控黏著斑的動(dòng)態(tài)變化。脂筏是細(xì)胞膜上富含膽固醇和鞘磷脂的特殊結(jié)構(gòu)，能夠作為信號(hào)平臺(tái)調(diào)控蛋白與蛋白，蛋白與脂質(zhì)之間的相互作用。有文獻(xiàn)報(bào)道，在T細(xì)胞活化及神經(jīng)軸突生長(zhǎng)中，脂筏能夠募集一些脂質(zhì)及蛋白進(jìn)而影響肌動(dòng)蛋白骨架的動(dòng)態(tài)變化，但是在腫瘤細(xì)胞中脂筏是否能夠通過(guò)調(diào)控肌動(dòng)蛋白骨架的重排影響?zhàn)ぶ叩膭?dòng)態(tài)變化及其作用機(jī)制仍不清楚。 在本文中，我們通過(guò)劃痕實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，脂筏的擾亂能夠抑制人惡性黑色素瘤A375和M21細(xì)胞的遷移及偽足形成。免疫熒光標(biāo)記及活細(xì)胞顯微成像系統(tǒng)分析顯示，脂筏的擾亂能夠增強(qiáng)細(xì)胞中應(yīng)力纖維的形成，而抑制黏著斑的去組裝過(guò)程。進(jìn)一步深入的研究證明，脂筏對(duì)于黏著斑去組裝的影響是通過(guò)肌動(dòng)蛋白骨架來(lái)調(diào)控的。脂筏擾亂所誘導(dǎo)的應(yīng)力纖維的增加阻抑了黏著斑蛋白paxillin和vinculin的去磷酸化和黏著斑核心成分β3整聯(lián)蛋白的內(nèi)化，進(jìn)而抑制黏著斑的去組裝。而脂筏對(duì)肌動(dòng)蛋白骨架的調(diào)控則是通過(guò)Src-RhoA-Rho激酶（Rho kinase，ROCK）信號(hào)通路實(shí)現(xiàn)的�？傊覀兊膶�(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，脂筏通過(guò)調(diào)控肌動(dòng)蛋白骨架介導(dǎo)的黏著斑去組裝影響惡性黑色素瘤細(xì)胞的遷移。
【關(guān)鍵詞】：脂筏 黏著斑 肌動(dòng)蛋白骨架 細(xì)胞遷移
【學(xué)位授予單位】：東北師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R739.5
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 引言9-27
• 一、 脂筏概述10-16
• （一） 脂筏的結(jié)構(gòu)和分類10-13
• （二） 脂筏的生理功能13-14
• （三） 脂筏與腫瘤發(fā)展進(jìn)程14-15
• （四） 脂筏的研究方法15-16
• 二、 黏著斑概述16-22
• （一） 黏著斑的結(jié)構(gòu)和分類16-19
• （二） 遷移細(xì)胞中黏著斑的動(dòng)態(tài)變化19-21
• （三） 黏著斑在細(xì)胞遷移中的作用21-22
• 三、 肌動(dòng)蛋白骨架概述22-26
• （一） 偽足處的肌動(dòng)蛋白微絲22-23
• （二） 細(xì)胞中的應(yīng)力纖維23-26
• 四、 本論文的研究目的和意義26-27
• 材料與方法27-37
• 一、 實(shí)驗(yàn)材料27-28
• （一） 細(xì)胞27
• （二） 抗體27
• （三） 試劑27-28
• （四） 質(zhì)粒28
• （五） 主要儀器及設(shè)備28
• 二、 實(shí)驗(yàn)方法28-37
• （一） 細(xì)胞培養(yǎng)28-29
• （二） 劃痕實(shí)驗(yàn)29
• （三） 細(xì)胞形態(tài)觀察29
• （四） 免疫熒光標(biāo)記29-30
• （五） 細(xì)胞轉(zhuǎn)染30
• （六） 活細(xì)胞顯微成像分析30-31
• （七） 免疫共沉淀31
• （八） SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳和免疫印跡31-32
• （九） 內(nèi)化實(shí)驗(yàn)32-33
• （十） 流式細(xì)胞術(shù)33
• （十一） 膜質(zhì)成分分離33-34
• （十二） Rho GTPase 活化實(shí)驗(yàn)34-35
• （十三） 脂筏提取35
• （十四） 軟件分析35-36
• （十五） 統(tǒng)計(jì)分析36-37
• 結(jié)果與分析37-56
• 一、 脂筏調(diào)控人惡性黑色素瘤細(xì)胞的形態(tài)和遷移37-39
• 二、 脂筏調(diào)控惡性黑色素瘤細(xì)胞肌動(dòng)蛋白骨架的重排及黏著斑的去組裝39-44
• 三、 脂筏對(duì)黏著斑去組裝的影響是通過(guò)肌動(dòng)蛋白骨架介導(dǎo)的44-47
• 四、 脂筏擾亂誘導(dǎo)的應(yīng)力纖維的形成抑制黏著斑蛋白的去磷酸化47-49
• 五、 脂筏擾亂誘導(dǎo)的應(yīng)力纖維的形成抑制β3 整聯(lián)蛋白的內(nèi)化49-53
• 六、 脂筏通過(guò) Src-RhoA-ROCK 信號(hào)通路調(diào)控肌動(dòng)蛋白骨架重排53-56
• 討論56-60
• 一、 脂筏調(diào)控肌動(dòng)蛋白骨架重排和黏著斑去組裝56-57
• 二、 脂筏對(duì)黏著斑去組裝的調(diào)控是由肌動(dòng)蛋白骨架介導(dǎo)的57-58
• 三、 脂筏通過(guò) Src-RhoA-ROCK 信號(hào)通路調(diào)控肌動(dòng)蛋白骨架動(dòng)態(tài)變化58-60
• 主要結(jié)論和創(chuàng)新點(diǎn)60-61
• 參考文獻(xiàn)61-72
• 附錄72-73
• 致謝73-74
• 在學(xué)期間公開(kāi)發(fā)表論文情況74

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 丁淑靜;;脈絡(luò)膜和睫狀體的惡性黑色素瘤[J];醫(yī)學(xué)文摘(眼科學(xué));1964年03期

2 ;脈絡(luò)膜及睫狀體的良性黑色素瘤(痣)[J];醫(yī)學(xué)文摘(眼科學(xué));1966年03期

3 周雅芳,賈泰元;惡性黑色素瘤中樞神經(jīng)系統(tǒng)及內(nèi)臟廣泛轉(zhuǎn)移并引起脾臟破裂1例報(bào)告[J];新醫(yī)學(xué);1986年10期

4 徐延德,劉振華;惡性黑色素瘤侵犯鄰近骨組織誤診兩例[J];蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1988年01期

5 張孝通,吳學(xué)愚,常榮先;70例鼻腔、鼻竇惡性黑色素瘤臨床分析[J];腫瘤;1990年02期

6 馬棟才;張燕;李清芬;;喉惡性黑色素瘤的診斷與治療[J];河北醫(yī)藥;1991年03期

7 任勇亞，高國(guó)亮;原發(fā)性結(jié)腸惡性黑色素瘤一例[J];山西醫(yī)藥雜志;1993年02期

8 杜向慧;楊關(guān)海;;鼻咽原發(fā)惡性黑色素瘤1例報(bào)告[J];浙江腫瘤;1994年02期

9 高建鋼，張瑞明，張麗英，王光;乳腺惡性黑色素瘤一例報(bào)告[J];實(shí)用腫瘤雜志;1995年03期

10 黃維彥，王江輝;乳房惡性黑色素瘤2例[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;1995年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 鄧德權(quán);倪杏艷;車敦發(fā);胡文星;;誤診為甲癬的甲下惡性黑色素瘤1例[A];2010全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

2 杜培革;呂剛;田丹;安麗萍;韓笑;徐廣宇;楊松;高莉囡;;GHGKHKNK八肽抑制小鼠惡性黑色素瘤B16-F10轉(zhuǎn)移及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[A];全國(guó)第十一屆生化與分子藥理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

3 北京快中子治療協(xié)作組;;快中子治療惡性黑色素瘤初報(bào)[A];Fast Neutron Radiation Therapy--Proceedings of CCAST (World Laboratory) Workshop[C];1999年

4 蘇立眾;徐文娟;陳盈;;鼻腔惡性黑色素瘤診治分析[A];浙江省抗癌協(xié)會(huì)頭頸腫瘤外科專業(yè)委員會(huì)成立大會(huì)暨第一屆學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

5 許建鋒;;睫狀體惡性黑色素瘤1例的超聲表現(xiàn)[A];中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第七屆全國(guó)眼科超聲診斷學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2009年

6 張英;;32例惡性黑色素瘤的術(shù)后護(hù)理[A];中華護(hù)理學(xué)會(huì)全國(guó)腫瘤護(hù)理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會(huì)議論文匯編[C];2009年

7 林國(guó)礎(chǔ);邱蔚六;張錫澤;陸昌語(yǔ);顧基中;周國(guó)瑜;;107例口腔頜面部惡性黑色素瘤治療評(píng)估[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會(huì)成立大會(huì)暨第六次全國(guó)口腔醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];1996年

8 陳臘梅;王寧;廖明俊;張代倫;;惡性黑色素瘤乳腺轉(zhuǎn)移一例[A];第二屆全國(guó)乳腺影像診斷與技術(shù)應(yīng)用研討會(huì)暨學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2007年

9 羅峻;;鼻側(cè)切開(kāi)鼻腔鼻竇惡性黑色素瘤術(shù)后護(hù)理[A];全國(guó)眼耳鼻喉科護(hù)理學(xué)術(shù)交流會(huì)議論文匯編[C];2011年

10 張佳佳;郭紅燕;韓勁松;喬杰;;女性陰道惡性黑色素瘤一例[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第一屆全球華人婦產(chǎn)科學(xué)術(shù)大會(huì)暨第三次全國(guó)婦產(chǎn)科中青年醫(yī)師學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王亦衛(wèi);治療惡性黑色素瘤[N];科技日?qǐng)?bào);2006年

2 王倫;應(yīng)加強(qiáng)惡性黑色素瘤防治[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

3 王倫;國(guó)內(nèi)首家惡性黑色素瘤病區(qū)成立[N];科技日?qǐng)?bào);2006年

4 天津腫瘤醫(yī)院骨與軟組織腫瘤科教授 邢汝維;痣與黑色素瘤易區(qū)分[N];健康時(shí)報(bào);2007年

5 通訊員 張獻(xiàn)懷;304醫(yī)院治療晚期惡性黑色素瘤有新法[N];大眾科技報(bào);2006年

6 受訪專家 北京腫瘤醫(yī)院腎癌黑色素瘤病區(qū)主任 郭軍邋采訪者 王倫 劉晨;黑色素瘤早治療可痊愈[N];健康報(bào);2007年

7 倪方;黑色素瘤早治療可痊愈（一）[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2008年

8 特約記者 崔玉艷;突然便血小心惡性黑色素瘤作怪[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2007年

9 保健時(shí)報(bào)特約記者 張獻(xiàn)懷;新思路啃掉了黑色素瘤[N];保健時(shí)報(bào);2006年

10 張獻(xiàn)懷;成功治愈晚期惡性黑色素瘤患者[N];中國(guó)消費(fèi)者報(bào);2006年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 畢佳佳;脂筏調(diào)控人惡性黑色素瘤細(xì)胞遷移的作用機(jī)制研究[D];東北師范大學(xué);2013年

2 夏玲芳;44例原發(fā)性陰道惡性黑色素瘤患者的回顧性臨床病理分析[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

3 時(shí)蕾;炎性微環(huán)境對(duì)鼻腔鼻竇惡性黑色素瘤的血管化和預(yù)后的臨床研究[D];山東大學(xué);2010年

4 張國(guó)強(qiáng);癌基因PPO在惡性黑色素瘤中表達(dá)的意義及其體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

5 李厚勇;惡性黑色素瘤中MAPK信號(hào)通路及相關(guān)癌基因的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2009年

6 韓春榮;線形程序性壞死與腫瘤微血管構(gòu)筑的相關(guān)性及臨床意義研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2011年

7 吳宏;PTEN/MMAC1/TEP1腫瘤抑制基因在人惡性黑色素瘤中的研究及其意義[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2000年

8 金晶;Pin1在人惡性黑色素瘤發(fā)生發(fā)展中作用研究 Pin1抑制劑的篩選及機(jī)制研究 XLN306的抗腫瘤作用及機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

9 王玉芳;惡性黑色素瘤細(xì)胞凋亡相關(guān)基因和蛋白表達(dá)譜[D];四川大學(xué);2004年

10 趙爽;關(guān)于CD147通過(guò)IGFBP2調(diào)控惡性黑色素瘤凋亡的體內(nèi)外相關(guān)研究[D];中南大學(xué);2013年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 鄭中秋;消化道惡性黑色素瘤6例臨床分析并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[D];浙江大學(xué);2010年

2 祝曉蕾;80例惡性黑色素瘤的臨床特點(diǎn)及預(yù)后分析[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

3 王俊鳳;細(xì)絲蛋白A的表達(dá)對(duì)惡性黑色素瘤的調(diào)節(jié)作用[D];吉林大學(xué);2012年

4 李雪飛;足底惡性黑色素瘤的切除與創(chuàng)面修復(fù)[D];吉林大學(xué);2012年

5 郭豐霞;原發(fā)性女性生殖道惡性黑色素瘤的臨床分析[D];山東大學(xué);2012年

6 劉靜;若干分子標(biāo)志物及臨床特征與惡性黑色素瘤預(yù)后的多因素相關(guān)分析[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

7 杜金;皮膚惡性黑色素瘤33例臨床分析[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2013年

8 許三雄;乙酰肝素酶與β聯(lián)蛋白及淋巴樣增強(qiáng)因子-1在人肢端惡性黑色素瘤中基因表達(dá)的對(duì)比研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2013年

9 彭巧;納秒脈沖治療裸鼠惡性黑色素瘤的療效觀察[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

10 王月;自體CIK細(xì)胞聯(lián)合化療治療惡性黑色素瘤的臨床觀察[D];蘇州大學(xué);2012年

本文編號(hào)：615067