本文關鍵詞：脂筏調控人惡性黑色素瘤細胞遷移的作用機制研究

  更多相關文章： 脂筏 黏著斑 肌動蛋白骨架 細胞遷移

【摘要】：腫瘤轉移是導致癌癥患者死亡的主要原因。為了成功轉移，腫瘤細胞必須利用其固有的遷移能力侵入周圍組織并穿過血管壁。因此腫瘤細胞的遷移是腫瘤轉移的必要條件，，理解腫瘤細胞遷移的分子機制將對抗腫瘤轉移的治療有非常重要的意義。 腫瘤細胞在基質上的遷移是一個多步驟協(xié)調的過程，包括細胞前端向前突出，突出黏附于細胞外基質（Extracellular matrix，ECM），胞體向前移動，尾部收縮等幾個階段。這幾個步驟的循環(huán)往復使細胞能夠發(fā)生持續(xù)的遷移運動。在這些過程中，肌動蛋白骨架和黏著斑的動態(tài)變化起關鍵作用。肌動蛋白骨架的重排為細胞前端突出的形成及胞體的向前移動提供了動力，而黏著斑在細胞前端的形成將突出錨定于基質，在細胞尾部的去組裝使細胞收縮向前移動。同時，肌動蛋白骨架與黏著斑之間存在密切的關系。肌動蛋白骨架能夠調控黏著斑的形成及穩(wěn)定。因此，影響肌動蛋白骨架重排的因素很可能參與調控黏著斑的動態(tài)變化。脂筏是細胞膜上富含膽固醇和鞘磷脂的特殊結構，能夠作為信號平臺調控蛋白與蛋白，蛋白與脂質之間的相互作用。有文獻報道，在T細胞活化及神經(jīng)軸突生長中，脂筏能夠募集一些脂質及蛋白進而影響肌動蛋白骨架的動態(tài)變化，但是在腫瘤細胞中脂筏是否能夠通過調控肌動蛋白骨架的重排影響?zhàn)ぶ叩膭討B(tài)變化及其作用機制仍不清楚。 在本文中，我們通過劃痕實驗發(fā)現(xiàn)，脂筏的擾亂能夠抑制人惡性黑色素瘤A375和M21細胞的遷移及偽足形成。免疫熒光標記及活細胞顯微成像系統(tǒng)分析顯示，脂筏的擾亂能夠增強細胞中應力纖維的形成，而抑制黏著斑的去組裝過程。進一步深入的研究證明，脂筏對于黏著斑去組裝的影響是通過肌動蛋白骨架來調控的。脂筏擾亂所誘導的應力纖維的增加阻抑了黏著斑蛋白paxillin和vinculin的去磷酸化和黏著斑核心成分β3整聯(lián)蛋白的內化，進而抑制黏著斑的去組裝。而脂筏對肌動蛋白骨架的調控則是通過Src-RhoA-Rho激酶（Rho kinase，ROCK）信號通路實現(xiàn)的�？傊覀兊膶嶒灲Y果表明，脂筏通過調控肌動蛋白骨架介導的黏著斑去組裝影響惡性黑色素瘤細胞的遷移。
【關鍵詞】：脂筏 黏著斑 肌動蛋白骨架 細胞遷移
【學位授予單位】：東北師范大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R739.5
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 引言9-27
• 一、 脂筏概述10-16
• （一） 脂筏的結構和分類10-13
• （二） 脂筏的生理功能13-14
• （三） 脂筏與腫瘤發(fā)展進程14-15
• （四） 脂筏的研究方法15-16
• 二、 黏著斑概述16-22
• （一） 黏著斑的結構和分類16-19
• （二） 遷移細胞中黏著斑的動態(tài)變化19-21
• （三） 黏著斑在細胞遷移中的作用21-22
• 三、 肌動蛋白骨架概述22-26
• （一） 偽足處的肌動蛋白微絲22-23
• （二） 細胞中的應力纖維23-26
• 四、 本論文的研究目的和意義26-27
• 材料與方法27-37
• 一、 實驗材料27-28
• （一） 細胞27
• （二） 抗體27
• （三） 試劑27-28
• （四） 質粒28
• （五） 主要儀器及設備28
• 二、 實驗方法28-37
• （一） 細胞培養(yǎng)28-29
• （二） 劃痕實驗29
• （三） 細胞形態(tài)觀察29
• （四） 免疫熒光標記29-30
• （五） 細胞轉染30
• （六） 活細胞顯微成像分析30-31
• （七） 免疫共沉淀31
• （八） SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳和免疫印跡31-32
• （九） 內化實驗32-33
• （十） 流式細胞術33
• （十一） 膜質成分分離33-34
• （十二） Rho GTPase 活化實驗34-35
• （十三） 脂筏提取35
• （十四） 軟件分析35-36
• （十五） 統(tǒng)計分析36-37
• 結果與分析37-56
• 一、 脂筏調控人惡性黑色素瘤細胞的形態(tài)和遷移37-39
• 二、 脂筏調控惡性黑色素瘤細胞肌動蛋白骨架的重排及黏著斑的去組裝39-44
• 三、 脂筏對黏著斑去組裝的影響是通過肌動蛋白骨架介導的44-47
• 四、 脂筏擾亂誘導的應力纖維的形成抑制黏著斑蛋白的去磷酸化47-49
• 五、 脂筏擾亂誘導的應力纖維的形成抑制β3 整聯(lián)蛋白的內化49-53
• 六、 脂筏通過 Src-RhoA-ROCK 信號通路調控肌動蛋白骨架重排53-56
• 討論56-60
• 一、 脂筏調控肌動蛋白骨架重排和黏著斑去組裝56-57
• 二、 脂筏對黏著斑去組裝的調控是由肌動蛋白骨架介導的57-58
• 三、 脂筏通過 Src-RhoA-ROCK 信號通路調控肌動蛋白骨架動態(tài)變化58-60
• 主要結論和創(chuàng)新點60-61
• 參考文獻61-72
• 附錄72-73
• 致謝73-74
• 在學期間公開發(fā)表論文情況74

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 丁淑靜;;脈絡膜和睫狀體的惡性黑色素瘤[J];醫(yī)學文摘(眼科學);1964年03期

2 ;脈絡膜及睫狀體的良性黑色素瘤(痣)[J];醫(yī)學文摘(眼科學);1966年03期

3 周雅芳,賈泰元;惡性黑色素瘤中樞神經(jīng)系統(tǒng)及內臟廣泛轉移并引起脾臟破裂1例報告[J];新醫(yī)學;1986年10期

4 徐延德,劉振華;惡性黑色素瘤侵犯鄰近骨組織誤診兩例[J];蚌埠醫(yī)學院學報;1988年01期

5 張孝通,吳學愚,常榮先;70例鼻腔、鼻竇惡性黑色素瘤臨床分析[J];腫瘤;1990年02期

6 馬棟才;張燕;李清芬;;喉惡性黑色素瘤的診斷與治療[J];河北醫(yī)藥;1991年03期

7 任勇亞，高國亮;原發(fā)性結腸惡性黑色素瘤一例[J];山西醫(yī)藥雜志;1993年02期

8 杜向慧;楊關海;;鼻咽原發(fā)惡性黑色素瘤1例報告[J];浙江腫瘤;1994年02期

9 高建鋼，張瑞明，張麗英，王光;乳腺惡性黑色素瘤一例報告[J];實用腫瘤雜志;1995年03期

10 黃維彥，王江輝;乳房惡性黑色素瘤2例[J];臨床與實驗病理學雜志;1995年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄧德權;倪杏艷;車敦發(fā);胡文星;;誤診為甲癬的甲下惡性黑色素瘤1例[A];2010全國中西醫(yī)結合皮膚性病學術會議論文匯編[C];2010年

2 杜培革;呂剛;田丹;安麗萍;韓笑;徐廣宇;楊松;高莉囡;;GHGKHKNK八肽抑制小鼠惡性黑色素瘤B16-F10轉移及其機制的實驗研究[A];全國第十一屆生化與分子藥理學學術會議論文集[C];2009年

3 北京快中子治療協(xié)作組;;快中子治療惡性黑色素瘤初報[A];Fast Neutron Radiation Therapy--Proceedings of CCAST (World Laboratory) Workshop[C];1999年

4 蘇立眾;徐文娟;陳盈;;鼻腔惡性黑色素瘤診治分析[A];浙江省抗癌協(xié)會頭頸腫瘤外科專業(yè)委員會成立大會暨第一屆學術會議論文匯編[C];2006年

5 許建鋒;;睫狀體惡性黑色素瘤1例的超聲表現(xiàn)[A];中國超聲醫(yī)學工程學會第七屆全國眼科超聲診斷學術會議論文摘要匯編[C];2009年

6 張英;;32例惡性黑色素瘤的術后護理[A];中華護理學會全國腫瘤護理學術交流暨專題講座會議論文匯編[C];2009年

7 林國礎;邱蔚六;張錫澤;陸昌語;顧基中;周國瑜;;107例口腔頜面部惡性黑色素瘤治療評估[A];中華口腔醫(yī)學會成立大會暨第六次全國口腔醫(yī)學學術會議論文匯編[C];1996年

8 陳臘梅;王寧;廖明俊;張代倫;;惡性黑色素瘤乳腺轉移一例[A];第二屆全國乳腺影像診斷與技術應用研討會暨學習班論文匯編[C];2007年

9 羅峻;;鼻側切開鼻腔鼻竇惡性黑色素瘤術后護理[A];全國眼耳鼻喉科護理學術交流會議論文匯編[C];2011年

10 張佳佳;郭紅燕;韓勁松;喬杰;;女性陰道惡性黑色素瘤一例[A];中華醫(yī)學會第一屆全球華人婦產(chǎn)科學術大會暨第三次全國婦產(chǎn)科中青年醫(yī)師學術會議論文匯編[C];2007年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王亦衛(wèi);治療惡性黑色素瘤[N];科技日報;2006年

2 王倫;應加強惡性黑色素瘤防治[N];科技日報;2007年

3 王倫;國內首家惡性黑色素瘤病區(qū)成立[N];科技日報;2006年

4 天津腫瘤醫(yī)院骨與軟組織腫瘤科教授 邢汝維;痣與黑色素瘤易區(qū)分[N];健康時報;2007年

5 通訊員 張獻懷;304醫(yī)院治療晚期惡性黑色素瘤有新法[N];大眾科技報;2006年

6 受訪專家 北京腫瘤醫(yī)院腎癌黑色素瘤病區(qū)主任 郭軍邋采訪者 王倫 劉晨;黑色素瘤早治療可痊愈[N];健康報;2007年

7 倪方;黑色素瘤早治療可痊愈（一）[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2008年

8 特約記者 崔玉艷;突然便血小心惡性黑色素瘤作怪[N];衛(wèi)生與生活報;2007年

9 保健時報特約記者 張獻懷;新思路啃掉了黑色素瘤[N];保健時報;2006年

10 張獻懷;成功治愈晚期惡性黑色素瘤患者[N];中國消費者報;2006年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 畢佳佳;脂筏調控人惡性黑色素瘤細胞遷移的作用機制研究[D];東北師范大學;2013年

2 夏玲芳;44例原發(fā)性陰道惡性黑色素瘤患者的回顧性臨床病理分析[D];復旦大學;2012年

3 時蕾;炎性微環(huán)境對鼻腔鼻竇惡性黑色素瘤的血管化和預后的臨床研究[D];山東大學;2010年

4 張國強;癌基因PPO在惡性黑色素瘤中表達的意義及其體內外實驗研究[D];河北醫(yī)科大學;2011年

5 李厚勇;惡性黑色素瘤中MAPK信號通路及相關癌基因的研究[D];復旦大學;2009年

6 韓春榮;線形程序性壞死與腫瘤微血管構筑的相關性及臨床意義研究[D];天津醫(yī)科大學;2011年

7 吳宏;PTEN/MMAC1/TEP1腫瘤抑制基因在人惡性黑色素瘤中的研究及其意義[D];第二軍醫(yī)大學;2000年

8 金晶;Pin1在人惡性黑色素瘤發(fā)生發(fā)展中作用研究 Pin1抑制劑的篩選及機制研究 XLN306的抗腫瘤作用及機制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2010年

9 王玉芳;惡性黑色素瘤細胞凋亡相關基因和蛋白表達譜[D];四川大學;2004年

10 趙爽;關于CD147通過IGFBP2調控惡性黑色素瘤凋亡的體內外相關研究[D];中南大學;2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄭中秋;消化道惡性黑色素瘤6例臨床分析并文獻復習[D];浙江大學;2010年

2 祝曉蕾;80例惡性黑色素瘤的臨床特點及預后分析[D];大連醫(yī)科大學;2012年

3 王俊鳳;細絲蛋白A的表達對惡性黑色素瘤的調節(jié)作用[D];吉林大學;2012年

4 李雪飛;足底惡性黑色素瘤的切除與創(chuàng)面修復[D];吉林大學;2012年

5 郭豐霞;原發(fā)性女性生殖道惡性黑色素瘤的臨床分析[D];山東大學;2012年

6 劉靜;若干分子標志物及臨床特征與惡性黑色素瘤預后的多因素相關分析[D];南方醫(yī)科大學;2012年

7 杜金;皮膚惡性黑色素瘤33例臨床分析[D];新疆醫(yī)科大學;2013年

8 許三雄;乙酰肝素酶與β聯(lián)蛋白及淋巴樣增強因子-1在人肢端惡性黑色素瘤中基因表達的對比研究[D];昆明醫(yī)科大學;2013年

9 彭巧;納秒脈沖治療裸鼠惡性黑色素瘤的療效觀察[D];重慶醫(yī)科大學;2013年

10 王月;自體CIK細胞聯(lián)合化療治療惡性黑色素瘤的臨床觀察[D];蘇州大學;2012年

本文編號：615067