發(fā)布時間：2017-07-18 11:01

  本文關(guān)鍵詞：BRAF基因在新疆惡性黑素瘤中的表達(dá)及意義

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【摘要】：目的：檢測惡性黑素瘤、色素痣及正常組織中BRAF基因表達(dá)，分析BRAF基因的表達(dá)與惡性黑素瘤臨床表型的關(guān)系及其意義，探討其與惡性黑素瘤形成及預(yù)后的關(guān)系，以期找到一個用于疾病早期診斷及判斷預(yù)后的新指標(biāo)。同時探討從惡性黑素瘤石蠟包埋組織中提取RNA并進(jìn)行實時熒光定量的可行性。 方法：收集2007-2012年新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院病理科、皮膚科確診的74例惡性黑素瘤石蠟包埋組織，并整理分析臨床病理資料，并選取了35例色素痣及46例正常包皮的石蠟包埋組織。運用SYBR Green Real-time PCR（qRT-PCR）方法檢測BRAF基因在惡性黑素瘤織、色素痣及正常皮膚組織中的相對表達(dá)量2-ΔCt,分析其mRNA表達(dá)與惡性黑素瘤臨床表型關(guān)系。采用瓊脂糖凝膠電泳、紫外分光光度儀檢測惡性黑素瘤石蠟包埋組織提取的RNA質(zhì)量，運用標(biāo)準(zhǔn)曲線及溶解曲線進(jìn)行實時熒光定量方法可行性分析。統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS17.0軟件。 結(jié)果：1）74例惡性黑素瘤患者維吾爾族34例（45.9%），漢族40例（54.1%）；男性39例（52.7%），女性35例（47.3%），男女之比：1.11:1；平均年齡55.6±14.3歲，其中"f45歲11例（14.9%），46-59歲20例（27.0%），≥60歲43例（58.1%）；原發(fā)部位位于皮膚47例（63.5%），粘膜24例（32.4%），，其它3例（4.1%）；其中原發(fā)于皮膚的47例患者中33例為肢端黑素瘤（70.2%）。2)維吾爾族、漢族惡性黑素瘤患者BRAF基因的表達(dá)水平（0.377±0.167）明顯高于色素痣（0.159±0.167）、正常皮膚組織（0.134±0.050）(p0.01)。3）新疆維吾爾族、漢族惡性黑素瘤患者性別、年齡、民族、發(fā)病部位、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等BRAF基因mRNA表達(dá)水平無統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）。4）惡性黑素瘤石蠟包埋組織中提取的RNA可進(jìn)行后續(xù)實時熒光定量PCR反應(yīng)，實時熒光定量PCR檢測結(jié)果顯示溶解曲線呈單峰，目的基因與內(nèi)參基因擴(kuò)增效率基本一致。 結(jié)論：1）新疆地區(qū)惡性黑素瘤發(fā)病年齡以45歲以上為主，無明顯性別差異，好發(fā)部位為肢端。2）BRAF基因高表達(dá)可能參與了惡性黑素瘤的發(fā)生發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】：惡性黑素瘤 BRAF基因 實時定量PCR 基因表達(dá)
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R739.5
【目錄】：

• 摘要7-8
• Abstract8-9
• 英文縮略語表9-10
• 前言10-12
• 材料與方法12-20
• 1.材料12-14
• 2.實驗方法14-19
• 2.1 石蠟組織中總 RNA 的制備14-15
• 2.2 逆轉(zhuǎn)錄合成 cDNA15-16
• 2.3 cDNA 純化16
• 2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的構(gòu)建16-18
• 2.5 實時熒光定量 PCR 反應(yīng)18
• 2.6 實時熒光定量 PCR 結(jié)果判讀與數(shù)據(jù)分析18-19
• 3.實驗室質(zhì)量控制19
• 4. 統(tǒng)計學(xué)分析19-20
• 結(jié)果20-27
• 討論27-32
• 1.惡性黑素瘤的臨床與病理學(xué)特征27-28
• 2.惡性黑素瘤的病因?qū)W研究28
• 3.BRAF 基因表達(dá)與惡性黑素瘤關(guān)系的探討28-30
• 4.BRAF 基因表達(dá)與新疆維吾爾族、漢族惡性黑素瘤臨床病理學(xué)特征關(guān)系探討30
• 5.運用實時熒光定量 PCR 檢測惡性黑素瘤石蠟包埋組織 mRNA 表達(dá)方法的探討30-31
• 6.問題與展望31-32
• 結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-37
• 文獻(xiàn)綜述37-42
• 主要參考文獻(xiàn)40-42
• 致謝42-43
• 作者簡介43-44
• 導(dǎo)師評閱表44

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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本文編號：557346