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梅毒螺旋體耐四環(huán)素類抗生素耐藥基因突變位點(diǎn)檢測

發(fā)布時間:2017-07-14 10:23

  本文關(guān)鍵詞:梅毒螺旋體耐四環(huán)素類抗生素耐藥基因突變位點(diǎn)檢測


  更多相關(guān)文章: 梅毒螺旋體 四環(huán)素類抗生素 16S rRNA基因 tetB基因


【摘要】:研究背景:梅毒是由梅毒螺旋體感染引起的性傳播疾病,主要通過性接觸和母嬰傳播。1943年青霉素首次用于梅毒的治療以來,始終是梅毒治療的首選藥物。近年來,四環(huán)素類抗生素(多西環(huán)素/四環(huán)素)作為替代治療藥物,廣泛用于梅毒的治療,四環(huán)素類抗生素具有抑制細(xì)菌作用,通過可逆性結(jié)合30S核糖體亞單位的16S rRNA抑制蛋白合成發(fā)揮作用。細(xì)菌對四環(huán)素類藥物的耐藥機(jī)制分兩類:(1)獲得四環(huán)素耐藥基因,四環(huán)素耐藥基因廣泛分布于人源、動物源和環(huán)境性條件病原菌、病原菌及共生菌的不同菌種,tetB基因的宿主范圍最廣,在口腔和消化道的伴放線桿菌、流感嗜血桿菌等20多種革蘭氏陰性菌屬中均有分布,螺旋體屬中齒垢密螺旋體中亦有分布。(2)16S rRNA基因點(diǎn)突變,16S rRNA基因的926-928,939,965-967以及1058位點(diǎn)均為已報道的革蘭氏陰性菌(幽門螺旋桿菌和豬痢疾短螺旋體)對四環(huán)素或強(qiáng)力霉素的耐藥位點(diǎn)。在世界范圍內(nèi)進(jìn)行四環(huán)素類抗生素治療梅毒的療效監(jiān)測,并警惕其耐藥菌株的出現(xiàn),顯得尤為重要。實(shí)驗(yàn)?zāi)康?一、研究TP菌株是否存在四環(huán)素類抗生素耐藥基因(tetB基因)及突變位點(diǎn)(16S rRNA基因)。二、評價山東地區(qū)四環(huán)素類抗生素治療早期梅毒的有效性。三、評估山東地區(qū)四環(huán)素類抗生素能否作為治療梅毒的替代藥物。實(shí)驗(yàn)方法:收集疑似梅毒患者肛門及生殖器部位皮疹或潰瘍處標(biāo)本,提取梅毒螺旋體DNA,經(jīng)實(shí)時熒光定量PCR證實(shí)為梅毒螺旋體,然后PCR擴(kuò)增后電泳檢測是否存在tetB基因片段,另外進(jìn)行16S rRNA基因目的基因片段的擴(kuò)增,測序進(jìn)行序列分析,檢測是否存在突變位點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:本研究171例梅毒螺旋體菌株中,15例檢測出四環(huán)素類抗生素獲得性耐藥基因tetB基因,16S rRNA基因目的片段均未檢測出突變位點(diǎn)。結(jié)論:梅毒螺旋體獲得性四環(huán)素耐藥基因tetB基因既往未見報道。Tet B基因可能是梅毒螺旋體四環(huán)素類抗生素的耐藥基因,應(yīng)持續(xù)進(jìn)行四環(huán)素類抗生素治療梅毒的療效監(jiān)測,并警惕其耐藥菌株的出現(xiàn)。
【關(guān)鍵詞】:梅毒螺旋體 四環(huán)素類抗生素 16S rRNA基因 tetB基因
【學(xué)位授予單位】:濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R440;R759.1
【目錄】:
  • 摘要6-7
  • Abstract7-9
  • 英文縮略詞表9-10
  • 第一章 前言10-17
  • 1.1 梅毒螺旋體感染與致病10
  • 1.2 梅毒治療現(xiàn)狀10-11
  • 1.3 多西環(huán)素應(yīng)用的療效監(jiān)測11-13
  • 1.4 TP對四環(huán)素類抗生潛在的耐藥機(jī)制13-17
  • 第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法17-38
  • 2.1 研究對象17
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)試劑17-20
  • 2.3 實(shí)驗(yàn)儀器20-21
  • 2.4 分析軟件21
  • 2.5 實(shí)驗(yàn)方法21-38
  • 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果38-41
  • 3.1 樣本資料38
  • 3.2 突變檢測38-41
  • 第四章 討論41-45
  • 第五章 展望45-47
  • 參考文獻(xiàn)47-51
  • 附錄 A51-52
  • 附錄 B52-55
  • 攻讀學(xué)位期間取得的研究成果55-56
  • 致謝56

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本文編號:540734

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