本文關鍵詞：白癜風患者外周血Treg細胞中HO-1表達、作用及機制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景:白癜風是一種以表皮黑素細胞破壞為特征的色素脫失性疾病,其確切病因及發(fā)病機制尚不明確。目前認為,白癜風是多基因遺傳為基礎、多因素共同參與的疾病。關于黑素細胞被破壞機制主要有自身免疫、氧化應激、遺傳易感、黑素細胞凋亡、神經(jīng)精神和角質(zhì)形成細胞功能異常等學說。近年研究表明,氧化應激是白癜風發(fā)病的誘導環(huán)節(jié),而CD8+T則是發(fā)病的關鍵效應環(huán)節(jié)。CD4+CD25+Treg細胞是調(diào)控機體不適當或者過強免疫應答的關鍵機制之一,通過抑制效應性CD4+和CD8+T細胞的功能,防止自身免疫性疾病的發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn),Treg細胞的主要功能分子Foxp3、IL-10及TGF-β等是白癜風發(fā)病的易感基因,白癜風患者CD4+CD25+Treg細胞數(shù)量及功能異常,且體內(nèi)過繼回輸Treg細胞可使白癜風小鼠脫色毛發(fā)復色。然而,目前尚缺乏針對白癜風患者Treg細胞數(shù)量及功能異常的上游調(diào)控機制研究。因此,闡明白癜風Treg細胞數(shù)量及功能受損的原因,對于進一步認識Treg細胞在白癜風發(fā)病中的作用,具有重要的意義。血紅素氧合酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)又稱HSP32,作為一種壓力反應蛋白,一般在炎癥因子、缺氧、重金屬暴露等條件下誘導產(chǎn)生。研究表明,HO-1催化血紅素降解為膽綠素、CO及Fe2+,具有抗氧化、抗細胞增殖及抗凋亡的作用。我課題組前期研究發(fā)現(xiàn),白癜風患者血清中HO-1活性明顯降低,與IL-2的表達呈明顯負相關,從而增強CD8+T細胞介導的免疫反應,是導致白癜風黑素細胞免疫損傷的重要機制。而最新研究證實HO-1可增強CD4+CD25+Treg細胞免疫抑制功能,從而保護機體免遭T細胞免疫損傷。由此我們推測:白癜風患者HO-1活性降低可能導致Treg細胞免疫抑制功能受損,從而引發(fā)CD8+T細胞的功能亢進,最終導致黑素細胞的免疫損傷及白斑形成。方法:1.收集泛發(fā)型進展期白癜風患者與健康正常人的外周血樣本,分離獲取PBMC,利用流式細胞術鑒定CD4+CD25+Foxp3+Treg細胞占CD4+T細胞的比例,明確白癜風患者外周血中Treg細胞的比例變化;2.流式細胞術分選出患者、健康正常人CD4+CD25+CD127lowTreg細胞,在CD3/CD28抗體包被及可溶性IL-2存在條件下,孵育后檢測Treg細胞的增殖情況,明確患者Treg細胞增殖功能;分選出的Treg細胞分別與第三方健康人PBMC共孵育后檢測PBMC的增殖水平,明確患者Treg細胞的抑制功能;3.采用ELISA方法檢測血清中Treg細胞功能相關分子的含量,在分子水平上明確患者Treg細胞的功能;4.利用流式細胞術檢測Treg細胞膜上抑制功能分子及胞內(nèi)炎癥因子的表達,進一步明確患者Treg細胞的功能改變;5.通過流式細胞術鑒定Treg細胞中HO-1的平均熒光強度及HO-1陽性的Treg細胞比例,明確HO-1在患者中的表達;利用ELISA檢測血清中HO-1及其催化產(chǎn)物的含量,進一步明確HO-1在白癜風患者中的活性。6.利用患者、正常人血清分別與健康人PBMC共培養(yǎng),通過流式細胞術檢測PBMC中Treg細胞的比例變化及CD8+T細胞、Treg細胞的增殖能力。結果:1.白癜風患者外周血中Treg細胞在CD4+T細胞中的比例較健康對照顯著降低(VP n=28,HC n=22,P0.05);患者Treg細胞的增殖能力弱于健康對照(VP n=3,HC n=3,P0.05)。2.細胞共培養(yǎng)實驗顯示,患者Treg細胞抑制PBMC增殖的能力減弱(VP n=8,HC n=8,P0.05),部分患者Treg細胞甚至促進PBMC的增殖。3.流式細胞術檢測Treg細胞表面發(fā)揮抑制功能的分子CTLA-4的表達,患者Treg細胞表面該分子的表達弱于健康對照(VP n=10,HC n=5,P0.05);刺激細胞內(nèi)因子分泌后檢測Treg細胞內(nèi)炎癥因子的表達,發(fā)現(xiàn)患者Treg細胞分泌IFN-γ、IL-17A的能力強于健康對照(VP n=7,HC n=4,P0.05)。4.白癜風患者血清中TGF-β1、IL-10、CTLA-4的平均水平均明顯低于健康對照的平均水平,經(jīng)統(tǒng)計學分析各組P0.05(VP n=20,HC n=20)。5.患者Treg細胞中HO-1的平均熒光強度弱于健康對照(VP n=9,HC n=8,P0.05),患者HO-1陽性的Treg細胞比例降低(VP n=9,HC n=8,P0.05)。6.白癜風患者血清中HO-1、Co Hb、Fe2+、TBIL的平均水平均明顯低于健康對照的平均水平,差異具有統(tǒng)計學意義(VP n=20,HC n=20,P0.05)。7.患者/健康對照血清處理第三方健康人PBMC,發(fā)現(xiàn)患者血清處理組PBMC中Treg細胞比例增高(VP n=6,HC n=7,P0.05),CD8+T細胞及Treg細胞上增殖相關分子Ki67的表達也顯著增高(VP n=6,HC n=7,P0.05)。結論:通過本課題研究,我們明確白癜風患者Treg細胞數(shù)目減少且功能受損,并證實白癜風患者Treg細胞存在一定程度的功能轉化,其抑制功能減弱并促進Th1、Th17型炎癥因子的分泌,導致CD8+T細胞功能亢進。在此基礎上,我們探討了HO-1作為上游分子對Treg細胞功能的影響,初步明確白癜風患者HO-1的活性降低減弱Treg細胞的功能。
【關鍵詞】：白癜風 細胞免疫 調(diào)節(jié)性T細胞 血紅素氧合酶-1
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R758.41
【目錄】：

• 縮略語表4-6
• 中文摘要6-9
• Abstract9-13
• 前言13-15
• 文獻回顧15-21
• 實驗一 白癜風患者外周血Treg細胞數(shù)目及功能研究21-35
• 1 材料21-24
• 2 方法24-28
• 3 結果28-32
• 4 討論32-35
• 實驗二 HO-1 在白癜風患者Treg細胞及血清中的表達及作用35-44
• 1.材料35
• 2.方法35-38
• 3.結果38-41
• 4.討論41-44
• 小結44-45
• 參考文獻45-51
• 附錄51-53
• 個人簡歷和研究成果53-54
• 致謝54-55

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1 李洪亮,張開紅,滿孝勇,曾昭訓,李新華;白癜風患者紅細胞免疫功能檢測[J];中華皮膚科雜志;2000年04期

2 馬宏裕,倪修年,薛國勝,尤小燕,宗揚勇;白癜風患者血清中谷胱甘肽及谷胱甘肽過氧化物酶的檢測[J];臨床皮膚科雜志;2001年01期

3 曹冬梅;1例白癜風患者日光灼傷報告[J];中國社區(qū)醫(yī)師;2002年11期

4 陸玲,朱云飛,蔡桂容,徐世正;白癜風患者的心理狀況及相關因素研究[J];中華醫(yī)學美學美容雜志;2003年05期

5 曾敬思,張艷麗,肖菲,江衛(wèi)生,曾昭明,張洪冰;1088例白癜風患者臨床分析[J];中國麻風皮膚病雜志;2004年02期

6 王忠,王偉深,鄒興梅,廖祖苑;白癜風患者外周血T淋巴細胞亞群檢測及其意義[J];中國麻風皮膚病雜志;2004年05期

7 周渭珩,洪為松,許愛娥;白癜風患者血清可溶性細胞間黏附分子-1的檢測[J];中國中西醫(yī)結合皮膚性病學雜志;2005年01期

8 Firooz A.,Bouzari N. ,Fallah N. ,劉超;白癜風患者所相信的自身情況[J];世界核心醫(yī)學期刊文摘(皮膚病學分冊);2005年04期

9 姜yN群,孫建方,陳柳青,吳黎明,徐秀蓮;遺傳性對稱性色素異常癥一家系中不典型白癜風患者1例[J];臨床皮膚科雜志;2005年08期

10 崔榮;;3742例中國白癜風患者臨床分析[J];世界核心醫(yī)學期刊文摘(皮膚病學分冊);2005年09期

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1 陳建萍;鐘春燕;康云平;孔萬良;裘新民;林金祥;孫亞平;;132例白癜風患者自身免疫抗體的檢測及分析[A];2009年浙江省檢驗醫(yī)學學術年會論文匯編[C];2009年

2 張峻嶺;閆翠彥;索丹鳳;;167例白癜風患者的臨床調(diào)查分析[A];中華醫(yī)學會第十五次全國皮膚性病學術會議論文集[C];2009年

3 張恒;楊雪琴;;白癜風患者的性格及情緒特征調(diào)查分析[A];2010全國中西醫(yī)結合皮膚性病學術會議論文匯編[C];2010年

4 周妙妮;關翠萍;林福泉;許文;;白癜風患者白斑部位及血漿中抗氧化水平檢測[A];2011全國中西醫(yī)結合皮膚性病學術會議論文匯編[C];2011年

5 高興華;烏韋蘇;付玉萍;張麗;陳洪鐸;;北方白癜風患者生活質(zhì)量調(diào)查[A];美麗人生 和諧世界——中華醫(yī)學會第七次全國醫(yī)學美學與美容學術年會、中華醫(yī)學會醫(yī)學美學與美容學分會20周年慶典暨第三屆兩岸四地美容醫(yī)學學術論壇論文匯編[C];2010年

6 許素玲;周瓊艷;;心理干預對白癜風患者療效的影響[A];2012年浙江省皮膚病性病學術會議論文集[C];2012年

7 呂靜;;白癜風患者的心理狀態(tài)及心理治療[A];2009全國中西醫(yī)結合皮膚性病學術會議論文匯編[C];2009年

8 顧彩蘭;周愛花;王金萍;;白癜風患者血清銅含量測定[A];第九屆西北五�。▍^(qū)）檢驗醫(yī)學學術會議論文匯編[C];2005年

9 佟春光;何焱玲;;白癜風患者外周血T細胞亞群及細胞因子水平的研究[A];中華醫(yī)學會第十二次全國皮膚性病學術會議論文集[C];2006年

10 徐馨;傅雯雯;;中國白癜風患者血清維生素D水平的病例對照研究及其相關因素分析[A];中華醫(yī)學會第十八次全國皮膚性病學術年會論文匯編[C];2012年

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1 明慧;“救助千名貧困大學生白癜風患者大型公益活動”在京啟動[N];中國改革報;2008年

2 趙陽;中科青少年白癜風患者特別關愛行動在京啟動[N];科技日報;2009年

3 第二軍醫(yī)大學附屬長海醫(yī)院主任醫(yī)師 吳建華;白癜風患者并非“多C多漂亮”[N];大眾衛(wèi)生報;2013年

4 張磊;白癜風患者的飲食重點[N];中國醫(yī)藥報;2005年

5 武警總醫(yī)院皮膚科主任 李志強;白癜風患者不必禁吃水果[N];健康報;2007年

6 健康時報記者 趙紹華;白癜風患者慎服維C[N];健康時報;2007年

7 孟剛;絕大多數(shù)白癜風患者都能治愈[N];中國消費者報;2006年

8 特約撰稿 廣東省人民醫(yī)院 皮膚科 陳敏華 主治醫(yī)師;心理關愛可加快白癜風患者康復[N];醫(yī)藥導報;2007年

9 副主任醫(yī)師 杭蘭芳;白癜風患者生活調(diào)理[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2008年

10 陳文貴;白癜風患者少服維生素C[N];大眾衛(wèi)生報;2007年

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1 隗yN;白癜風患者應激障礙調(diào)查及應激障礙調(diào)節(jié)藥物對黑素細胞的影響[D];復旦大學;2012年

2 徐馨;初步探索中國白癜風患者血清25（OH）維生素D水平及其與疾病的關系[D];復旦大學;2012年

3 張寶祥;白癜風患者外周血皮膚歸巢的CD8~+T細胞分析及芹黃素對其抑制作用的研究[D];大連醫(yī)科大學;2013年

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1 胡雪慧;白癜風患者心理健康狀況及人格特征研究[D];第四軍醫(yī)大學;2007年

2 張倩;白癜風患者外周血Treg細胞中HO-1表達、作用及機制研究[D];第四軍醫(yī)大學;2015年

3 王冬雪;白癜風患者血清抗黑素細胞抗體及其相關抗原的分析研究[D];河北北方學院;2015年

4 章俊;白癜風患者血小板計數(shù)及其抗體的檢測[D];安徽醫(yī)科大學;2007年

5 郭靜微;850例白癜風患者的流行病學研究[D];吉林大學;2012年

6 楊文斌;寧夏及周邊地區(qū)540例白癜風患者臨床回顧性研究[D];寧夏醫(yī)科大學;2013年

7 李金輝;不良心理應激對白癜風患者免疫功能的影響[D];山東大學;2013年

8 賈名妍;白癜風患者生活質(zhì)量調(diào)查及血清甲狀腺自身抗體水平研究[D];鄭州大學;2013年

9 蕭名棋;成人白癜風患者心理水平與生活質(zhì)量調(diào)查分析[D];復旦大學;2011年

10 于偉;河南省606例白癜風患者臨床及流行病學調(diào)查分析[D];鄭州大學;2014年

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本文編號：435480