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hTLR9表達(dá)及其介導(dǎo)HPV11免疫識(shí)別分子機(jī)制的研究

發(fā)布時(shí)間:2024-03-16 09:36
  尖銳濕疣是當(dāng)今流行最廣的性傳播疾病之一,發(fā)病率30.69/10萬,而且近年來還有上升的趨勢。人乳頭瘤病毒(Human Papilloma virus, HPV)11型和6型是其主要的致病因素,占尖銳濕疣病變的95%。近年來,雖然對(duì)尖銳濕疣的發(fā)病機(jī)制和防治方法作了大量的研究,但由于對(duì)其發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚,故還沒有取得實(shí)質(zhì)性的突破。目前尚無有效的治療方法能完全清除體內(nèi)的HPV,所以該病是反復(fù)發(fā)作,久治不愈。 機(jī)體的免疫狀態(tài)決定了HPV感染的自然史和其所致相關(guān)疾病的結(jié)局。尖銳濕疣患者免疫功能紊亂,這一點(diǎn)已引起同行的重視;颊邫C(jī)體不能建立有效的免疫反應(yīng),是造成HPV持續(xù)感染的主要原因。大多數(shù)研究認(rèn)為,摘除患者尖銳濕疣疣體后聯(lián)用免疫調(diào)節(jié)劑治療,可特異性調(diào)節(jié)抗HPV免疫應(yīng)答,并明顯降低尖銳濕疣復(fù)發(fā)率。約90%感染HPV患者能自然清除該病毒,但決定HPV清除、持續(xù)存在或病損惡變的因素目前尚不明確,因而探討尖銳濕疣的免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制有重要的理論意義和臨床意義。 Toll-Like receptors(TLRs)是新型的模式識(shí)別受體,與微生物病原體的識(shí)別有關(guān),在哺乳動(dòng)物的天然免疫和獲得性免疫應(yīng)答過程中發(fā)...

【文章頁數(shù)】:65 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.pCIneo-hTLR9重組質(zhì)粒構(gòu)建策略Fig.1TheconstructionstrategyofcombinantplasmidpCIneo-hTLR9[14,15]

圖1.pCIneo-hTLR9重組質(zhì)粒構(gòu)建策略Fig.1TheconstructionstrategyofcombinantplasmidpCIneo-hTLR9[14,15]

第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文方法一、構(gòu)建策略由于人TLR9(hTLR9)基因片段較長[13],從組織細(xì)胞中克隆該基因難于保證其高保真度,因而我們購買其原核表達(dá)質(zhì)粒,用特異性內(nèi)切酶切下目的基因,入真核表達(dá)載體pCIneo,構(gòu)建hTLR9真核表達(dá)載體,并將陽性重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)293....


圖2.重組子的Sal單酶切鑒定Fig.2IdentificationthecandidateplasmidwithSalIsingledigestion

圖2.重組子的Sal單酶切鑒定Fig.2IdentificationthecandidateplasmidwithSalIsingledigestion

白質(zhì)粒pCIneo的HEK293細(xì)胞的純化蛋白為檢測ottle1液和2液與PVDF膜共孵育1min。將PVDF膜與X光片一同放入暗盒內(nèi)曝光3緊壓片盒。后清水漂洗,再定影。結(jié)果切鑒定定膠電泳,片段大小與預(yù)期的一致(圖2)


圖3.SalI和NotI雙酶切鑒定可疑質(zhì)粒Fig.3IdentificationthecandidateplasmidwithSalIandNotIdoubledigestion

圖3.SalI和NotI雙酶切鑒定可疑質(zhì)粒Fig.3IdentificationthecandidateplasmidwithSalIandNotIdoubledigestion

圖3.SalI和NotI雙酶切鑒定可疑質(zhì)粒entificationthecandidateplasmidwithSalIaMarker;1)ProductsdigestionbySalIandNo測序號(hào):No:CX_009213)儀進(jìn)行,測序....


圖6.RT-PCR鑒定Fig.6IdentificationtherecombinantplasmidwithRT-PCR

圖6.RT-PCR鑒定Fig.6IdentificationtherecombinantplasmidwithRT-PCR

圖5.總RNA抽提產(chǎn)物電泳garosegelelectrophooresisoftotalofRNAefromHEK293withtransfectedhTLR9.r;1).TotalRNAextractionfromtransfected....



本文編號(hào):3929462

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