皮膚血管瘤組織中Bcl-2的表達及其表達載體的構(gòu)建
發(fā)布時間:2024-03-13 03:54
目的:為進一步探討B(tài)cl-2與血管瘤發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系及其在生物學治療中的作用,本課題首先運用免疫組化和原位雜交的方法檢測了增生期、退化期血管瘤組織和正常皮膚組織血管中Bcl-2的表達;然后構(gòu)建了正反義bcl-2的綠色熒光真核表達載體;同時進行了增生期血管瘤的內(nèi)皮細胞的培養(yǎng);為我們進一步研究bcl-2在血管瘤發(fā)病中的作用機制及其治療效應奠定了基礎。 方法:首先收集武漢大學人民醫(yī)院病理科1996-2002年皮膚毛細血管瘤存檔蠟塊49例,蠟塊切片厚5μm,常規(guī)HE染色和免疫組織化學S-P法檢測增殖細胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA),按Mulliken分類標準并結(jié)合PCNA的表達進行分組,增生期血管瘤27例,退化期血管瘤22例,另取瘤組織周圍正常皮膚組織5例作對照。運用免疫組織化學染色和原位雜交的方法檢測Bcl-2在以上各組中的表達,并結(jié)合Ⅷ因子相關(guān)抗原的免疫組織化學染色證實表達Bcl-2的這些細胞是血管瘤組織中的內(nèi)皮細胞。利用HPIAS-2000圖像分析系統(tǒng)測定Bcl-2在以上三組中表達的平均光密度和平均陽性面積率。然后亞克隆...
【文章頁數(shù)】:46 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
本文編號:3927146
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圖1正常皮膚組織血管毛細血管由1到2個內(nèi)皮細胞圍成,內(nèi)皮細胞胞質(zhì)薄,僅含核的
圖1正常皮膚組織血管毛細血管由1到2個內(nèi)皮細胞圍成,內(nèi)皮細胞胞質(zhì)薄,僅含核的部分略厚,內(nèi)皮細胞核扁平(~),HEx200圖2增生期血管瘤內(nèi)皮細胞增生呈團索狀,核肥大而淡染(~),HEx200圖3退化期血管瘤內(nèi)皮細胞減少,血管腔增大,結(jié)締組織增多,內(nèi)皮細胞核扁平(~),HEX200....
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圖7退化期血管瘤姍因子相關(guān)抗原的表達退化的內(nèi)皮細胞胞漿內(nèi)彌漫分布棕黃色顆粒(~),S一PX200圖8增生期血管瘤Bd一2的表達增生的內(nèi)皮細胞胞漿內(nèi)有較多棕黃色顆粒(~),Bcl一2表達強,S一PX200圖9退化期血管瘤Bcl一2的表達形成管腔的內(nèi)皮細胞胞漿內(nèi)無棕黃色顆粒,未見Bc....
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圖13正常皮膚組織bcl一ZmRNA的表達正常皮膚組織血管內(nèi)皮細胞胞膜和胞漿無棕黃色顆粒沉積(一),未見bcl一ZmRNA表達,原位雜交法X100圖14電泳檢測結(jié)果a.pEGFP一cl一bc去2用Bajnlll切b.pEGFP一Cl一Asbcl一2用Ba皿艦切e.IKbDNA田a....
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