目的探討mi R-508-3p與叉頭框轉(zhuǎn)錄因子C1(forkhead box C1,FOXC1)的關(guān)系及其在惡性黑素瘤中的表達(dá)和作用機(jī)制。方法通過實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-qPCR)檢測(cè)mi R-508-3p和FOXC1在HEM正常黑素細(xì)胞及A375惡性黑素瘤細(xì)胞中的表達(dá);將體外培養(yǎng)的A375細(xì)胞分為mimics NC組、mi R-508-3p mimics組、inhibitor NC組和mi R-508-3p inhibitor組,RT-qPCR檢測(cè)其沉默效果及對(duì)FOXC1 mRNA水平的影響;免疫印跡法(Western blot)分別檢測(cè)FOXC1蛋白的表達(dá)量;MTT法檢測(cè)A375細(xì)胞的增殖能力;Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染后A375細(xì)胞侵襲及遷移能力的變化;熒光素酶報(bào)告基因技術(shù)檢測(cè)FOXC1是否為mi R-508-3p的直接靶基因。結(jié)果與人正常黑素細(xì)胞相比,A375細(xì)胞中mi R-508-3p表達(dá)明顯降低,而FOXC1表達(dá)明顯升高;與inhibitor NC組相比,轉(zhuǎn)染mi R-508-3p inhibitors的A375細(xì)胞中mi R-508-3p的表達(dá)明顯下調(diào),FOX...

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圖1miR-508-3p和FOXC1在HEM正常黑素細(xì)胞及A375MM細(xì)胞中的表達(dá)

RT-qPCR檢測(cè)結(jié)果表明，A375MM細(xì)胞中miR-508-3p的相對(duì)表達(dá)量為9.84±0.46，與HEM正常黑素細(xì)胞26.30±0.43比較，明顯降低（t=48.67,P<0.001）。A375MM細(xì)胞中FOXC1的相對(duì)表達(dá)量為18.00±0.87，與HEM正常黑素細(xì)....

圖2過表達(dá)/降低miR-508-3p對(duì)MMA375細(xì)胞增殖、遷移及侵襲的影響

應(yīng)用Starbase生物信息學(xué)網(wǎng)站預(yù)測(cè)FOXC13"-UTR上存在miR-508-3p的結(jié)合位點(diǎn)（圖4A）。熒光素酶實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：在FOXC1-W組中，與NCmimics組相比，miR-508-3pmimics組熒光素酶的活力值明顯降低（t=19.60,P<0.001）。....

圖3過表達(dá)/降低miR-508-3p對(duì)MMA375細(xì)胞中miR-508-3p和FOXC1表達(dá)的影響

圖2過表達(dá)/降低miR-508-3p對(duì)MMA375細(xì)胞增殖、遷移及侵襲的影響3討論

圖4miR-508-3p與FOXC1的靶向關(guān)系

miRNA是一類非編碼的含有20～25個(gè)核苷酸內(nèi)源性小RNA，可以結(jié)合在靶基因mRNA3"端非翻譯區(qū)(3"-UTR)，從而降解靶基因的mRNA，抑制蛋白的翻譯。目前研究發(fā)現(xiàn)miRNA在MM的發(fā)生和發(fā)展過程中的作用不可忽視[8,9]。miR-508-3p屬于miR-5....

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