目的:脂肪干細(xì)胞是一種間充質(zhì)干細(xì)胞,具有自我更新的特性和多向分化潛能。脂肪干細(xì)胞來(lái)源豐富、倫理限制少、具有跨胚層分化能力,是一種十分理想的組織工程學(xué)種子細(xì)胞。因此,脂肪干細(xì)胞向已知分化譜系之外其他細(xì)胞分化的可能性和條件,是值得研究者持續(xù)關(guān)注的領(lǐng)域。電信號(hào)廣泛存在于生物體內(nèi),在傳遞信息和實(shí)現(xiàn)功能等方面起著不可或缺的作用。內(nèi)源性直流電場(chǎng)作為生物體內(nèi)電信號(hào)的一種表現(xiàn)形式,對(duì)于胚胎發(fā)育和創(chuàng)傷愈合等過(guò)程極為重要,而完成這些過(guò)程又與干細(xì)胞的增殖、遷移和分化密切相關(guān)。然而,關(guān)于脂肪干細(xì)胞在直流電場(chǎng)中反應(yīng)的研究較少。皮膚科治療方式中紫外線光療的歷史悠久、應(yīng)用廣泛,尤其是在白癜風(fēng)的治療中起到重要作用。紫外線具有改變表皮分泌細(xì)胞因子特性,誘導(dǎo)DNA損傷和細(xì)胞凋亡,促進(jìn)黑素細(xì)胞增殖、遷移及提高其活性等功能。紫外線還可以促進(jìn)黑素前體細(xì)胞分化為黑素細(xì)胞。然而脂肪干細(xì)胞是否能分化為黑素細(xì)胞,紫外線能否啟動(dòng)或促進(jìn)這個(gè)過(guò)程,仍等待著人們?nèi)ソ沂尽Ｒ虼?為了探討直流電場(chǎng)和紫外線分別對(duì)脂肪干細(xì)胞起到什么樣的作用,是否可以對(duì)組織工程學(xué)和再生醫(yī)學(xué)的種子細(xì)胞有指導(dǎo)意義,我們展開(kāi)了以下研究。研究方法:1、本研究利用膠原酶消化法從人...

【文章頁(yè)數(shù)】：103 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1流式細(xì)胞術(shù)鑒定脂肪干細(xì)胞表面標(biāo)志物及脂肪干細(xì)胞成脂、成骨分化

油紅O可將脂肪特異性染為紅色,而茜素紅可使鈣沉積特異性染色,產(chǎn)生桔紅色鈣結(jié)節(jié)。圖中所示為染成紅色的脂滴和染成橘紅色的骨鈣沉積,證實(shí)所用細(xì)胞具有分化為脂肪細(xì)胞和骨細(xì)胞的潛能。3.2直流電場(chǎng)使脂肪干細(xì)胞定向排列

圖2電場(chǎng)為0或300mV/mm對(duì)脂肪干細(xì)胞排列的影響

在300mV/mm的直流電場(chǎng)中暴露6h后,脂肪干細(xì)胞形態(tài)與之前相比有所不同,細(xì)胞長(zhǎng)軸變短,這提示我們細(xì)胞可能進(jìn)行了運(yùn)動(dòng),改變了細(xì)胞骨架形態(tài)。鏡下細(xì)胞排列較整齊,細(xì)胞長(zhǎng)軸垂直于電場(chǎng)方向。將細(xì)胞放回培養(yǎng)箱中培養(yǎng),24h后再次拍照,可發(fā)現(xiàn)細(xì)胞由之前形態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)殚L(zhǎng)梭形,排列整齊,且細(xì)胞....

圖3凝膠電泳檢測(cè)RNA質(zhì)量

我們檢測(cè)了6個(gè)總RNA樣品的OD260/280比值,發(fā)現(xiàn)其在1.81-1.87之間。各樣品的的總RNA濃度、RNA完整性和gDNA污染檢測(cè)結(jié)果均為通過(guò)。3.4RNA表達(dá)譜及差異RNA聚類(lèi)

圖4差異RNA熱圖以及RNA表達(dá)譜火山圖

通過(guò)火山圖和熱圖,我們可以較直觀地發(fā)現(xiàn),除circRNA外,其余三種RNA無(wú)論是總體表達(dá)還是差異表達(dá)子集,均是下調(diào)RNA比例占優(yōu),這可能和電場(chǎng)使細(xì)胞處于一種類(lèi)似應(yīng)激的狀態(tài)有關(guān)。3.5非編碼RNA相關(guān)基因的GO、KEGG通路富集分析

本文編號(hào)：3895491