直流電場和紫外線對脂肪干細胞的作用及機制研究
發(fā)布時間:2024-02-04 16:09
目的:脂肪干細胞是一種間充質干細胞,具有自我更新的特性和多向分化潛能。脂肪干細胞來源豐富、倫理限制少、具有跨胚層分化能力,是一種十分理想的組織工程學種子細胞。因此,脂肪干細胞向已知分化譜系之外其他細胞分化的可能性和條件,是值得研究者持續(xù)關注的領域。電信號廣泛存在于生物體內,在傳遞信息和實現(xiàn)功能等方面起著不可或缺的作用。內源性直流電場作為生物體內電信號的一種表現(xiàn)形式,對于胚胎發(fā)育和創(chuàng)傷愈合等過程極為重要,而完成這些過程又與干細胞的增殖、遷移和分化密切相關。然而,關于脂肪干細胞在直流電場中反應的研究較少。皮膚科治療方式中紫外線光療的歷史悠久、應用廣泛,尤其是在白癜風的治療中起到重要作用。紫外線具有改變表皮分泌細胞因子特性,誘導DNA損傷和細胞凋亡,促進黑素細胞增殖、遷移及提高其活性等功能。紫外線還可以促進黑素前體細胞分化為黑素細胞。然而脂肪干細胞是否能分化為黑素細胞,紫外線能否啟動或促進這個過程,仍等待著人們去揭示。因此,為了探討直流電場和紫外線分別對脂肪干細胞起到什么樣的作用,是否可以對組織工程學和再生醫(yī)學的種子細胞有指導意義,我們展開了以下研究。研究方法:1、本研究利用膠原酶消化法從人...
【文章頁數(shù)】:103 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
本文編號:3895491
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圖1流式細胞術鑒定脂肪干細胞表面標志物及脂肪干細胞成脂、成骨分化
油紅O可將脂肪特異性染為紅色,而茜素紅可使鈣沉積特異性染色,產生桔紅色鈣結節(jié)。圖中所示為染成紅色的脂滴和染成橘紅色的骨鈣沉積,證實所用細胞具有分化為脂肪細胞和骨細胞的潛能。3.2直流電場使脂肪干細胞定向排列
圖2電場為0或300mV/mm對脂肪干細胞排列的影響
在300mV/mm的直流電場中暴露6h后,脂肪干細胞形態(tài)與之前相比有所不同,細胞長軸變短,這提示我們細胞可能進行了運動,改變了細胞骨架形態(tài)。鏡下細胞排列較整齊,細胞長軸垂直于電場方向。將細胞放回培養(yǎng)箱中培養(yǎng),24h后再次拍照,可發(fā)現(xiàn)細胞由之前形態(tài)轉變?yōu)殚L梭形,排列整齊,且細胞....
圖3凝膠電泳檢測RNA質量
我們檢測了6個總RNA樣品的OD260/280比值,發(fā)現(xiàn)其在1.81-1.87之間。各樣品的的總RNA濃度、RNA完整性和gDNA污染檢測結果均為通過。3.4RNA表達譜及差異RNA聚類
圖4差異RNA熱圖以及RNA表達譜火山圖
通過火山圖和熱圖,我們可以較直觀地發(fā)現(xiàn),除circRNA外,其余三種RNA無論是總體表達還是差異表達子集,均是下調RNA比例占優(yōu),這可能和電場使細胞處于一種類似應激的狀態(tài)有關。3.5非編碼RNA相關基因的GO、KEGG通路富集分析
本文編號:3895491
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