DANCR通過(guò)激活YAP促進(jìn)黑素瘤細(xì)胞侵襲并與不良預(yù)后的相關(guān)性
發(fā)布時(shí)間:2023-06-03 08:23
目的根據(jù)本院收集的黑素瘤組織標(biāo)本分析長(zhǎng)鏈非編碼RNA DANCR(long non-coding RNA differentiation antagonizing non-protein coding RNA,LncRNA DANCR)與黑素瘤臨床預(yù)后關(guān)系。闡明DANCR在黑素瘤侵襲中所扮演的角色。方法用激光捕獲法獲取黑素瘤組織標(biāo)本以分析DANCR表達(dá)量與黑素瘤患者臨床進(jìn)展的關(guān)系;用A375和B16細(xì)胞株行體外實(shí)驗(yàn),以慢病毒為載體在細(xì)胞中敲低DANCR;|(zhì)膠覆蓋的上層小室用于Transwell模型檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力;通過(guò)Western blot實(shí)驗(yàn)和ELISA檢測(cè)MMP2、MMP9在細(xì)胞中表達(dá)水平和細(xì)胞外分泌水平。通過(guò)Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)p-YAP和YAP表達(dá)以明確其活性;用XMU-MP-1和Verteporfin(VP)分別在黑素瘤細(xì)胞株中激活和抑制YAP活性。結(jié)果臨床數(shù)據(jù)分析可得,DANCR表達(dá)量與臨床M分期和病理N分期、Breslow深度和Clark值均密切相關(guān)。在A375和B16細(xì)胞中敲低DANCR可抑制細(xì)胞侵襲,并下調(diào)MMP2、MMP9表達(dá)和細(xì)胞外分泌(P<...
【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)和RNA穩(wěn)定干擾細(xì)胞系建立
1.2.2 Western blot檢測(cè)
1.2.3 細(xì)胞總RNA提取、反轉(zhuǎn)錄和qRT-PCR檢測(cè)
1.2.4 細(xì)胞侵襲分析
1.2.5 激光捕獲微檢測(cè)
1.2.6 移植瘤模型和體內(nèi)轉(zhuǎn)移分析
1.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
2.1 用激光捕獲獲取患者黑素瘤瘤體組織,檢測(cè)DANCR表達(dá)
2.2 敲低DANCR可抑制黑素瘤細(xì)胞侵襲
2.3 敲低DANCR下調(diào)YAP,而激活YAP促進(jìn)黑素瘤細(xì)胞侵襲
2.4 DANCR通過(guò)激活YAP調(diào)控黑素瘤細(xì)胞侵襲
3 討論
本文編號(hào):3828981
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1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)和RNA穩(wěn)定干擾細(xì)胞系建立
1.2.2 Western blot檢測(cè)
1.2.3 細(xì)胞總RNA提取、反轉(zhuǎn)錄和qRT-PCR檢測(cè)
1.2.4 細(xì)胞侵襲分析
1.2.5 激光捕獲微檢測(cè)
1.2.6 移植瘤模型和體內(nèi)轉(zhuǎn)移分析
1.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
2.1 用激光捕獲獲取患者黑素瘤瘤體組織,檢測(cè)DANCR表達(dá)
2.2 敲低DANCR可抑制黑素瘤細(xì)胞侵襲
2.3 敲低DANCR下調(diào)YAP,而激活YAP促進(jìn)黑素瘤細(xì)胞侵襲
2.4 DANCR通過(guò)激活YAP調(diào)控黑素瘤細(xì)胞侵襲
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