目的 探討B(tài)16惡性黑色素瘤細胞與C57BL/6小鼠骨髓源樹突狀細胞融合后體外誘導(dǎo)特異性細胞毒性T淋巴細胞（CTL）及對B16惡性黑色素瘤細胞的殺傷作用。 方法 用聚乙二醇（PEG）將B16惡性黑色素瘤細胞與小鼠骨髓源樹突狀細胞（DC）融合，融合成功后以DC細胞、B16惡性黑色素瘤細胞做為對照組，DC/B16惡性黑色素瘤融合細胞作為實驗組，繪制融合細胞生長曲線并進行融合細胞刺激自體T淋巴細胞增殖試驗。以DC細胞、B16惡性黑色素瘤細胞、DC+B16惡性黑色素瘤細胞聯(lián)合培養(yǎng)做為對照組，DC/B16惡性黑色素瘤融合細胞作為實驗組，用細胞內(nèi)細胞素染色法檢測DC/B16惡性黑色素瘤融合細胞誘導(dǎo)CTL的活性，體外檢測DC/B16惡性黑色素瘤融合細胞融合細胞誘導(dǎo)產(chǎn)生的CTL對B16惡性黑色素瘤的殺傷性作用。實驗數(shù)據(jù)用x±S進行計數(shù)，使用SPSS13.0軟件，選擇one-wayANOVA和LSD’s post hoc test統(tǒng)計學(xué)方法對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果 小鼠骨髓源樹突狀細胞（DC）與B16惡性黑色素瘤細胞成功實現(xiàn)融合，給予合適的完全培養(yǎng)基和生長環(huán)境后，發(fā)現(xiàn)DC/B16惡性黑色素瘤融合...

【文章頁數(shù)】：41 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
材料和方法
    一、實驗材料
        （一）實驗細胞
        （二）藥品及試劑
        （三）儀器及設(shè)備
        （四）培養(yǎng)基及緩沖液的配置
    二、試驗方法
        （一） 樹突狀細胞（DC）的提取及培養(yǎng)
        （二） T 淋巴細胞的提取及培養(yǎng)
        （三）B16 惡性黑色素瘤細胞的培養(yǎng)：傳代、凍存和復(fù)蘇
        （四）DC/B16 惡性黑色素瘤融合細胞的制備
        （五）HAT 培養(yǎng)選擇法篩選 DC/B16 惡性黑色素瘤融合細胞
        （六）形態(tài)學(xué)觀察 DC/B16 惡性黑色素瘤融合細胞和繪制生長曲線
        （七）DC/B16惡性黑色素瘤融合細胞刺激自體T細胞增殖實驗
        （八）DC/B16融合細胞體外誘導(dǎo)T細胞分泌IFN-γ含量測定
        (九） 融合細胞體外抗腫瘤活性分析
    三、 統(tǒng)計學(xué)分析
結(jié)果
    一、形態(tài)學(xué)觀察 DC 細胞、T 淋巴細胞、惡性黑色素瘤細胞和融合細胞
    二、繪制融合細胞生長曲線
    三、DC/B16惡性黑色素瘤融合細胞刺激自體T細胞增殖實驗
    四、DC/B16 惡性黑色素瘤融合細胞體外誘導(dǎo) T 細胞分泌 IFN-γ含量測定
    五、融合細胞體外抗腫瘤活性分析
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
附錄
致謝



本文編號：3820091