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DC/B16融合細(xì)胞誘導(dǎo)T細(xì)胞特異性CTL的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2023-05-19 23:24
  目的 探討B(tài)16惡性黑色素瘤細(xì)胞與C57BL/6小鼠骨髓源樹突狀細(xì)胞融合后體外誘導(dǎo)特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)及對(duì)B16惡性黑色素瘤細(xì)胞的殺傷作用。 方法 用聚乙二醇(PEG)將B16惡性黑色素瘤細(xì)胞與小鼠骨髓源樹突狀細(xì)胞(DC)融合,融合成功后以DC細(xì)胞、B16惡性黑色素瘤細(xì)胞做為對(duì)照組,DC/B16惡性黑色素瘤融合細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)組,繪制融合細(xì)胞生長(zhǎng)曲線并進(jìn)行融合細(xì)胞刺激自體T淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)。以DC細(xì)胞、B16惡性黑色素瘤細(xì)胞、DC+B16惡性黑色素瘤細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)做為對(duì)照組,DC/B16惡性黑色素瘤融合細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)組,用細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞素染色法檢測(cè)DC/B16惡性黑色素瘤融合細(xì)胞誘導(dǎo)CTL的活性,體外檢測(cè)DC/B16惡性黑色素瘤融合細(xì)胞融合細(xì)胞誘導(dǎo)產(chǎn)生的CTL對(duì)B16惡性黑色素瘤的殺傷性作用。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用x±S進(jìn)行計(jì)數(shù),使用SPSS13.0軟件,選擇one-wayANOVA和LSD’s post hoc test統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果 小鼠骨髓源樹突狀細(xì)胞(DC)與B16惡性黑色素瘤細(xì)胞成功實(shí)現(xiàn)融合,給予合適的完全培養(yǎng)基和生長(zhǎng)環(huán)境后,發(fā)現(xiàn)DC/B16惡性黑色素瘤融合...

【文章頁數(shù)】:41 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
材料和方法
    一、實(shí)驗(yàn)材料
        (一)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        (二)藥品及試劑
        (三)儀器及設(shè)備
        (四)培養(yǎng)基及緩沖液的配置
    二、試驗(yàn)方法
        (一) 樹突狀細(xì)胞(DC)的提取及培養(yǎng)
        (二) T 淋巴細(xì)胞的提取及培養(yǎng)
        (三)B16 惡性黑色素瘤細(xì)胞的培養(yǎng):傳代、凍存和復(fù)蘇
        (四)DC/B16 惡性黑色素瘤融合細(xì)胞的制備
        (五)HAT 培養(yǎng)選擇法篩選 DC/B16 惡性黑色素瘤融合細(xì)胞
        (六)形態(tài)學(xué)觀察 DC/B16 惡性黑色素瘤融合細(xì)胞和繪制生長(zhǎng)曲線
        (七)DC/B16惡性黑色素瘤融合細(xì)胞刺激自體T細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        (八)DC/B16融合細(xì)胞體外誘導(dǎo)T細(xì)胞分泌IFN-γ含量測(cè)定
        (九) 融合細(xì)胞體外抗腫瘤活性分析
    三、 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    一、形態(tài)學(xué)觀察 DC 細(xì)胞、T 淋巴細(xì)胞、惡性黑色素瘤細(xì)胞和融合細(xì)胞
    二、繪制融合細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
    三、DC/B16惡性黑色素瘤融合細(xì)胞刺激自體T細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
    四、DC/B16 惡性黑色素瘤融合細(xì)胞體外誘導(dǎo) T 細(xì)胞分泌 IFN-γ含量測(cè)定
    五、融合細(xì)胞體外抗腫瘤活性分析
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號(hào):3820091

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