目的:探討細(xì)胞膜和細(xì)胞骨架之間的連接蛋白Ezrin在皮膚癌中的表達(dá),明確Ezrin蛋白對(duì)人表皮癌A431生長和運(yùn)動(dòng)能力的影響,考察黃芩素通過Ezrin蛋白的對(duì)A431細(xì)胞生長的影響。 方法: 1、為明確Ezrin蛋白在皮膚癌組織中的表達(dá),采用免疫組化法檢測36例鱗狀細(xì)胞癌(Squamous Cell Carcinoma,SCC)、27例基底細(xì)胞癌(Basal cell carcinoma,BCC)和20例脂溢性角化病(SeborrheicKeratosis,SK)、10例正常人皮膚(normal skin,NS)中Ezrin及phos-Ezrin蛋白表達(dá)水平。 2、為探討Ezrin蛋白在癌變中的生物學(xué)作用,選取人表皮癌A431細(xì)胞作為研究材料,先運(yùn)用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法分析黃芩素(Baicalein,BAI)對(duì)A431細(xì)胞生長的影響,選用BAI細(xì)胞無毒性濃度(non-cytotoxic concentration,NCC)進(jìn)行實(shí)驗(yàn);免疫印跡(Western-blotting,WB)分析A431細(xì)胞中Ezrin和phos-Ezrin的表達(dá);掃描電鏡觀察BAI對(duì)A431細(xì)胞偽足形成,...

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
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目錄
英文縮寫及中英文對(duì)照表
第一章 前言
第二章 材料與方法
    2.1 主要實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 組織切片
        2.1.2 細(xì)胞株
        2.1.3 藥物
        2.1.4 主要試劑
        2.1.5 主要儀器設(shè)備
        2.1.6 試劑配制
            2.1.6.1 PBS液
            2.1.6.2 MTT液
            2.1.6.3 蛋白裂解液
            2.1.6.4 4%多聚甲醛固定液
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線
            2.2.1.1 技術(shù)路線一
            2.2.1.2 實(shí)驗(yàn)路線二
        2.2.2 免疫組化法檢測人表皮癌組織中Ezrin表達(dá)
        2.2.3 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.4 細(xì)胞計(jì)數(shù)
        2.2.5 四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)
            2.2.5.1 實(shí)驗(yàn)分組
            2.2.5.2 實(shí)驗(yàn)步驟
        2.2.6 Western-bloting
            2.2.6.1 細(xì)胞總蛋白的抽提及蛋白質(zhì)濃度的測定
            2.2.6.2 Western-blotting分析
        2.2.7 劃痕實(shí)驗(yàn)和電鏡
            2.2.7.1 劃痕實(shí)驗(yàn)測定A431細(xì)胞遷移能力
            2.2.7.2 電鏡測定A431細(xì)胞偽足變化
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第三章 結(jié)果
    3.1 Ezrin,phos-Ezrin皮膚癌組織中表達(dá)及差異
        3.1.1 Ezrin,phos-Ezrin在NS,SK,BCC,SCC表達(dá)差異的比較
            3.1.1.1 Ezrin在NS,SK,BCC,SCC表達(dá)差異的比較
            3.1.1.2 Phos-Ezrin在NS,SK,BCC,SCC表達(dá)差異的比較
        3.1.2 Ezrin,phos-Ezrin在SCC分級(jí)及轉(zhuǎn)移病理組織中的表達(dá)
            3.1.2.1 Ezrin,phos-Ezrin在SCC分級(jí)病病理組織表達(dá)差異的比較
            3.1.2.2 Ezrin,pho-Ezrin在SCC轉(zhuǎn)移病理組織中表達(dá)差異的比較
    3.2 四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.3 Western-bloting實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.4 劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.5 電鏡實(shí)驗(yàn)結(jié)果
第四章 討論
    4.1 Ezrin,phos-Ezrin在皮膚癌組織中的表達(dá)及意義
    4.2 BAI對(duì)人表皮癌A431細(xì)胞株Ezrin,phos-Ezrin蛋白表達(dá)及細(xì)胞運(yùn)動(dòng)能力的影響
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間參加的科研項(xiàng)目和發(fā)表的論文



本文編號(hào)：3811658