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TPG對HaCaT細(xì)胞增殖、凋亡、細(xì)胞周期及miR-320/RASA1表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2022-12-09 22:05
  目的觀察赤芍總苷(TPG)對HaCaT細(xì)胞增殖、凋亡、細(xì)胞周期分布、miR-320和Ras p21蛋白活化子1(RASA1)表達(dá)的影響。方法 TPG處理HaCaT細(xì)胞后,細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒(CCK-8)檢測細(xì)胞活力。流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡和周期分布;實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白質(zhì)印記(Western blot)檢測miR-320和RASA1表達(dá)。雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)和western blot確定miR-320和RASA1之間調(diào)控關(guān)系。檢測抑制miR-320表達(dá)后HaCaT細(xì)胞增殖、凋亡和細(xì)胞周期分布情況。結(jié)果TPG可降低HaCaT細(xì)胞的活力,促進(jìn)HaCaT細(xì)胞凋亡,誘導(dǎo)G0/G1期阻滯,抑制miR-320表達(dá),促進(jìn)RASA1表達(dá),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。miR-320靶向負(fù)性調(diào)控RASA1表達(dá)。干擾miR-320可抑制HaCaT細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和G0/G1期阻滯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論TPG可抑制HaCaT細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期G0/G1期阻滯,其機(jī)制可能與下調(diào)miR-320/RASA1通路有關(guān)。 

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)、處理和實(shí)驗(yàn)分組
    1.3 CCK-8法檢測細(xì)胞活力
    1.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡和周期分布
    1.5 RT-q PCR檢測mi R-320和RASA1 m RNA表達(dá)
    1.6 Western blot檢測
    1.7 雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 赤芍總苷抑制Ha Ca T的增殖
    2.2 赤芍總苷誘導(dǎo)Ha Ca T凋亡
    2.3 赤芍總苷對Ha Ca T細(xì)胞周期的影響
    2.4 赤芍總苷對Ha Ca T的mi R-320/RASA1表達(dá)的影響
    2.5 mi R-320靶向RASA1
    2.6 干擾mi R-320對Ha Ca T細(xì)胞周期分布、增殖和凋亡的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]miR-548c-3p通過調(diào)控TRIM59表達(dá)對肝癌細(xì)胞增殖、侵襲和遷移的影響[J]. 年士艷,馮磊.  分子診斷與治療雜志. 2019(04)
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[4]皮膚鱗狀細(xì)胞癌組織中miR-21、miR-31、Ras GTP酶激活蛋白1表達(dá)與人乳頭瘤病毒的相關(guān)性研究[J]. 顧雪芹,董正邦,吳海紅,陳梅,嚴(yán)翹,王飛.  臨床皮膚科雜志. 2017(08)
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[7]赤芍的化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展[J]. 陸小華,馬驍,王建,朱云,周宗元,陳哲,趙艷玲,王伽伯.  中草藥. 2015(04)
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本文編號:3715456

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