目的:探討尋常型天皰瘡（PV）患者血清對Ha CaT細胞橋粒芯蛋白（Dsg） 1、3和基質金屬蛋白酶（MMP） 9表達的影響及其參與PV棘層松解的可能機制。方法:用含5%PV血清的高糖DMEM培養(yǎng)基孵育Ha Ca T細胞,以正常培養(yǎng)組、健康血清組以及抗Dsg3抗體組（陽性對照組）作為對照。刮取細胞提取總RNA及蛋白質,Q-PCR檢測Dsg1、Dsg3和MMP-9 mRNA轉錄水平,Western Blot檢測Dsg1、Dsg3和MMP-9表達,熒光單克隆Dsg1/3抗體分別檢測細胞表面Dsg1、Dsg3表達。結果:Q-PCR結果顯示:與正常培養(yǎng)組比較,含5%PV血清培養(yǎng)組Ha CaT細胞Dsg1、Dsg3、MMP-9基因的mRNA相對表達量分別上升約432%、402%、402%,而抗Dsg3抗體組分別上升約495%、488%、604%,PV血清組與正常培養(yǎng)組間有明顯差異（P值均＜0.05）。Western Blot結果顯示:與正常培養(yǎng)組相比,PV血清組Ha CaT細胞表面Dsg1、Dsg3、MMP-9蛋白表達升高。Dsg1、Dsg3熒光單克隆抗體檢測顯示:PV血清組Ha CaT表面Ds... 

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Ha Ca T細胞形態(tài)學變化(100×) 1A:正常培養(yǎng)組18 h后;1B:加入5%PV血清的DMEM高糖培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)18 h后

不同處理組Dsg1、Dsg3、MMP-9、GAPDH4種蛋白質Western Blot圖

單克隆抗體檢測不同干預條件下Ha Ca T表達Dsg1、Dsg-3結果(40×)

【參考文獻】：
期刊論文
[1]尋常型天皰瘡診斷和治療的專家建議[J]. 左亞剛.  中華皮膚科雜志. 2016 (11)
[2]不同亞型天皰瘡患者血清對HaCaT細胞橋粒芯糖蛋白3表達的影響[J]. 李惠,林麟,張潔塵,馮素英,周武慶,弓娟琴,王寶璽.  中國麻風皮膚病雜志. 2015(03)



本文編號：3687605