研究背景人乳頭狀瘤病毒（HPVs）是可引起性傳播疾病的一類非常重要的人類傳染病病原體。最常見的HPV高危亞型16和18型可以在宮頸癌和陰莖癌的組織樣本中被大量檢測(cè)到。而HPV低危亞型6和11型則與肛門生殖器疣和喉乳頭狀瘤的發(fā)生發(fā)展息息相關(guān)。HPV低危亞型（6和11）的持續(xù)性感染是引發(fā)尖銳濕疣的主要原因。尖銳濕疣的傳統(tǒng)治療手段包括三氯乙酸治療,冷凍治療和手術(shù)切除等。雖然治療這種疾病的手段和方式眾多,病灶成功清除后的疾病復(fù)發(fā)率卻一直非常的高。將傳統(tǒng)治療手段與新型小分子靶向治療藥物相結(jié)合,或許可以進(jìn)一步改善尖銳濕疣疾病治療的預(yù)后,降低其術(shù)后復(fù)發(fā)率。HPV感染所引起的皮膚相關(guān)性病損一般是持續(xù)性表達(dá)致癌性E7蛋白的結(jié)果,E7蛋白在細(xì)胞核和細(xì)胞漿中均有作用靶標(biāo)并且可以促進(jìn)已分化的人角質(zhì)形成細(xì)胞提前進(jìn)入細(xì)胞周期的S期。靶向E7基因的小分子抑制劑可以用來(lái)改善傳統(tǒng)手段治療HPV相關(guān)性性病的整體效果。這些小分子靶向制劑通常包括反義脫氧寡核苷酸、核酶以及小干擾RNA（si RNA）。但是由于HPV6/11 E7m RNA大多數(shù)序列位點(diǎn)的可及性較低,這些方法往往只能取得部分成功。因此,目前基于新一代小分子制劑... 

【文章頁(yè)數(shù)】：103 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
1. 引言
    1.1 研究背景
    1.2 本課題的研究思路
2. 實(shí)驗(yàn)材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
    2.2 研究所用試劑
    2.3 研究所用儀器與耗材
    2.4 研究使用生物網(wǎng)站和分析軟件
    2.5 實(shí)驗(yàn)方法
3. 結(jié)果
    3.1 HPV6 E7基因合成與表達(dá)載體構(gòu)建
    3.2 HPV11 E7基因合成與表達(dá)載體構(gòu)建
    3.3 CRISPR-Cas9表達(dá)載體構(gòu)建
    3.4 HPV 6/11 E7基因表達(dá)對(duì)人包皮角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)的影響
    3.5 重編程的CRISPR-Cas9系統(tǒng)對(duì)HPV6 E7和HPV11 E7蛋白表達(dá)的影響
    3.6 重編程的CRISPR-Cas9系統(tǒng)對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞異常增殖的影響
    3.7 重編程的CRISPR-Cas9系統(tǒng)對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡的影響
4. 討論
    4.1 概論
    4.2 HPVE7基因的致病作用討論
    4.3 CRISPR-Cas9對(duì)HPV E7基因的失活作用和機(jī)制討論..70
    4.4 針對(duì)HPV相關(guān)基因的CRISPR-Cas9系統(tǒng)的改進(jìn)計(jì)劃和研究前景展望
5. 結(jié)論
6. 參考文獻(xiàn)
附錄
讀博期間發(fā)表論文
致謝
課題綜述 CRISPR-Cas9技術(shù)在治療人類疾病中的應(yīng)用
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]應(yīng)用SSA報(bào)告載體提高ZFN和CRISPR/Cas9對(duì)豬IGF2基因的打靶效率[J]. 吳金青,梅瑰,劉志國(guó),陳瑤生,叢佩清,何祖勇.  遺傳. 2015(01)



本文編號(hào)：3682616