本文在概述了5-氨基酮戊酸光動(dòng)力療法（ALA-PDT）在皮膚癌治療中的基礎(chǔ)研究進(jìn)展和臨床應(yīng)用現(xiàn)狀的基礎(chǔ)上,開展了兩種皮膚癌細(xì)胞（人表皮鱗癌細(xì)胞A431和人惡黑色素瘤細(xì)胞A375）的ALA-PDT離體細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究,以期對(duì)皮膚癌的ALA-PDT療效的提高和臨床應(yīng)用的推廣提供理論基礎(chǔ)。采用熒光光譜技術(shù)測(cè)量皮膚癌細(xì)胞A431和A375吸收ALA后合成PpIX的熒光強(qiáng)度,研究不同濃度的國(guó)產(chǎn)ALA在皮膚癌細(xì)胞A431和A375內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)規(guī)律。采用激光共聚焦顯微技術(shù)研究ALA誘導(dǎo)的PpIX在皮膚癌細(xì)胞內(nèi)的分布。應(yīng)用倒置生物顯微鏡觀察ALA-PDT作用后細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化,并使用Cell Counting Kit-8（CCK-8）比色法測(cè)定ALA-PDT后細(xì)胞的存活率。結(jié)果表明,兩種皮膚癌細(xì)胞內(nèi)ALA誘導(dǎo)的PpIX的含量隨著ALA濃度的增大而增加,在相同孵育時(shí)間條件下,A431合成PpIX的量比A375高。當(dāng)ALA濃度為0.6mM時(shí),PpIX的含量己基本達(dá)到飽和,0.6mM為最佳的藥物孵育濃度。給予細(xì)胞0.6mM ALA孵育4h后,檢測(cè)到PpIX彌散分布于兩種皮膚癌細(xì)胞的胞漿內(nèi)和細(xì)胞膜上。兩種細(xì)胞經(jīng)... 

【文章來(lái)源】：福建師范大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PDT的賈布朗斯基圖

圖1-2 ALA-PDT過程中腫瘤細(xì)胞中卜啉的代謝Fig. 1-2 Porphyrin metabolism in tumor cells during ALA mediated PDT(二）ALA光動(dòng)力治療的優(yōu)勢(shì)及其不良反應(yīng)ALA-PDT的優(yōu)勢(shì)丨28】：（1) ALA是小分子，可局部皮膚用藥，極大地避免了以往系統(tǒng)用藥的光敏反應(yīng)，并且無(wú)明顯剌激性，在細(xì)胞內(nèi)的代謝清除快liai,無(wú)需避光；(2) ALA的選擇吸收性好，僅被病變組織選擇性吸收，因此，不損傷正常組織；(3)無(wú)明顯的疼痛感，耐受性好，是年邁體弱和其他外科手術(shù)和放療有禁忌癥的患者的最佳選擇；（4)可反復(fù)應(yīng)用而無(wú)毒副作用丨29]，美容效果好。從國(guó)內(nèi)外的報(bào)道可以得到，ALA-PDT治療對(duì)人體沒有明顯旳毒副作用，只有少部分患者在治療過程中會(huì)有局部的灼痛和燒灼感但是大部分可以耐受。一般不需要特殊處理。部分患者局部可能發(fā)生色素沉著或者色素減退但一般6個(gè)月內(nèi)可自行消退。

(a) (b)圖2-1主要儀器設(shè)備(a)倒置相差顯微鏡；（b) FLS920突光分光光度計(jì)Fig. 2-1 Instruments and equipments(a) Inverted phase contrast microscope; (b) FLS920 fluorescence spectrometer2.2.3細(xì)胞培養(yǎng)人惡黑色素瘤細(xì)胞A375購(gòu)自南京凱基生物發(fā)展有限公司，人表皮鱗癌細(xì)胞A431購(gòu)自廣州告尼歐生物技術(shù)有限公司。A375細(xì)胞生長(zhǎng)在含10% NBCS(四季青），1%青霉素（lOOU/mL)和鏈霉素（lOO^ig/mL)的DMEM高糖培養(yǎng)液（南京凱基）中，A431細(xì)胞生長(zhǎng)在含10% NBCS (GIBCO)的DMEM高糖培養(yǎng)液（Hyclone)中。細(xì)胞均置于37 V’ 5% C02飽和濕度的培養(yǎng)箱中進(jìn)行傳代培養(yǎng)。根據(jù)兩株細(xì)

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本文編號(hào)：3619209