本文在概述了5-氨基酮戊酸光動力療法（ALA-PDT）在皮膚癌治療中的基礎(chǔ)研究進展和臨床應(yīng)用現(xiàn)狀的基礎(chǔ)上,開展了兩種皮膚癌細胞（人表皮鱗癌細胞A431和人惡黑色素瘤細胞A375）的ALA-PDT離體細胞實驗研究,以期對皮膚癌的ALA-PDT療效的提高和臨床應(yīng)用的推廣提供理論基礎(chǔ)。采用熒光光譜技術(shù)測量皮膚癌細胞A431和A375吸收ALA后合成PpIX的熒光強度,研究不同濃度的國產(chǎn)ALA在皮膚癌細胞A431和A375內(nèi)的藥代動力學規(guī)律。采用激光共聚焦顯微技術(shù)研究ALA誘導的PpIX在皮膚癌細胞內(nèi)的分布。應(yīng)用倒置生物顯微鏡觀察ALA-PDT作用后細胞的形態(tài)學變化,并使用Cell Counting Kit-8（CCK-8）比色法測定ALA-PDT后細胞的存活率。結(jié)果表明,兩種皮膚癌細胞內(nèi)ALA誘導的PpIX的含量隨著ALA濃度的增大而增加,在相同孵育時間條件下,A431合成PpIX的量比A375高。當ALA濃度為0.6mM時,PpIX的含量己基本達到飽和,0.6mM為最佳的藥物孵育濃度。給予細胞0.6mM ALA孵育4h后,檢測到PpIX彌散分布于兩種皮膚癌細胞的胞漿內(nèi)和細胞膜上。兩種細胞經(jīng)... 

【文章來源】：福建師范大學福建省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PDT的賈布朗斯基圖

圖1-2 ALA-PDT過程中腫瘤細胞中卜啉的代謝Fig. 1-2 Porphyrin metabolism in tumor cells during ALA mediated PDT(二）ALA光動力治療的優(yōu)勢及其不良反應(yīng)ALA-PDT的優(yōu)勢丨28】：（1) ALA是小分子，可局部皮膚用藥，極大地避免了以往系統(tǒng)用藥的光敏反應(yīng)，并且無明顯剌激性，在細胞內(nèi)的代謝清除快liai,無需避光；(2) ALA的選擇吸收性好，僅被病變組織選擇性吸收，因此，不損傷正常組織；(3)無明顯的疼痛感，耐受性好，是年邁體弱和其他外科手術(shù)和放療有禁忌癥的患者的最佳選擇；（4)可反復應(yīng)用而無毒副作用丨29]，美容效果好。從國內(nèi)外的報道可以得到，ALA-PDT治療對人體沒有明顯旳毒副作用，只有少部分患者在治療過程中會有局部的灼痛和燒灼感但是大部分可以耐受。一般不需要特殊處理。部分患者局部可能發(fā)生色素沉著或者色素減退但一般6個月內(nèi)可自行消退。

(a) (b)圖2-1主要儀器設(shè)備(a)倒置相差顯微鏡；（b) FLS920突光分光光度計Fig. 2-1 Instruments and equipments(a) Inverted phase contrast microscope; (b) FLS920 fluorescence spectrometer2.2.3細胞培養(yǎng)人惡黑色素瘤細胞A375購自南京凱基生物發(fā)展有限公司，人表皮鱗癌細胞A431購自廣州告尼歐生物技術(shù)有限公司。A375細胞生長在含10% NBCS(四季青），1%青霉素（lOOU/mL)和鏈霉素（lOO^ig/mL)的DMEM高糖培養(yǎng)液（南京凱基）中，A431細胞生長在含10% NBCS (GIBCO)的DMEM高糖培養(yǎng)液（Hyclone)中。細胞均置于37 V’ 5% C02飽和濕度的培養(yǎng)箱中進行傳代培養(yǎng)。根據(jù)兩株細

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本文編號：3619209