目的研究miR-17-3p在銀屑病組織來源的角質(zhì)形成細(xì)胞中的表達(dá)及其對角質(zhì)形成細(xì)胞增殖的影響和機制。方法分離培養(yǎng)銀屑病和正常皮膚組織來源的角質(zhì)形成細(xì)胞,實時定量聚合酶鏈反應(yīng)（RT-qPCR）測定miR-17-3p表達(dá)。在正常皮膚組織來源的角質(zhì)形成細(xì)胞中分別轉(zhuǎn)染mimics control、miR-17-3p mimics、inhibitor control、miR-17-3p inhibitor,命名為第1轉(zhuǎn)染組、第2轉(zhuǎn)染組、第3轉(zhuǎn)染組、第4轉(zhuǎn)染組。在正常皮膚組織來源的角質(zhì)形成細(xì)胞中共轉(zhuǎn)染miR-17-3p mimics、pcDNA 3.1和miR-17-3p mimics、pcDNA 3.1-缺氧誘導(dǎo)因子1α（HIF-1α）,分別命名為第5轉(zhuǎn)染組和第6轉(zhuǎn)染組;在正常皮膚組織來源的角質(zhì)形成細(xì)胞中共轉(zhuǎn)染miR-17-3p inhibitor、siRNA control和miR-17-3p inhibitor、HIF-1αsiRNA,分別命名為第7轉(zhuǎn)染組和第8轉(zhuǎn)染組。用噻唑藍(lán)（MTT）檢測細(xì)胞增殖活性,用蛋白質(zhì)免疫印跡法（Western Blot）檢測細(xì)胞角蛋白10（Keratin10）、... 

【文章來源】：中國臨床藥理學(xué)雜志. 2020,36(19)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 實驗方法
        2.1 角質(zhì)形成細(xì)胞分離培養(yǎng)
        2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.3 以噻唑藍(lán)(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)測定細(xì)胞增殖情況
        2.4 以實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real time polymerase chain reaction, RT-qPCR)檢測銀屑病和正常皮膚組織來源的角質(zhì)形成細(xì)胞中miR-17-3p相對表達(dá)
        2.5 以蛋白質(zhì)免疫印跡(Western Blot)檢測細(xì)胞中Keratin10、Keratin14和HIF-1α蛋白相對表達(dá)
        2.6 miR-17-3p靶向關(guān)系預(yù)測和鑒定
    3 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié) 果
    1 miR-17-3p對角質(zhì)形成細(xì)胞存活率的影響
    2 各組細(xì)胞miR-17-3p mRNA表達(dá)
    3 各組細(xì)胞Keratin14、Keratin10和HIF-1α蛋白表達(dá)
    4 miR-17-3p和HIF-1α靶向關(guān)系驗證
討 論



本文編號：3613872