本文關(guān)鍵詞：PAI-1-RNAi對SD大鼠瘢痕組織及轉(zhuǎn)化生長因子-β1的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：瘢痕疙瘩（keloid）是由于皮膚受到損傷后在傷口愈合過程中成纖維細胞的過度增殖和細胞外基質(zhì)（extracellular matrixc， ECM）在傷口區(qū)域過度沉積而形成的疾病。以往研究認為PAI-1的高表達，或許直接參與瘢痕疙瘩的形成，同時在瘢痕疙瘩的發(fā)生過程中轉(zhuǎn)化生長因子-β1也發(fā)揮著重要的作用，應(yīng)用小干擾RNA（siRNA）技術(shù)，探討PAI-1-RNAi對SD大鼠瘢痕組織及轉(zhuǎn)化生長因子的影響，為瘢痕疙瘩的發(fā)病機制及治療開辟新的思路。 方法： 1SD大鼠背部瘢痕模型的建立與分組：(1)選取雄性SD大鼠，10%醛麻醉，去除部皮毛、消毒，于脊柱兩側(cè)做半徑1.5cm的圓形創(chuàng)面，全層皮膚缺損，每日觀察傷口愈合情況。(2)7天后，創(chuàng)面用微量注射器隔日注射，每次注射高濃度組0.05ml(實驗試劑濃度為20nmol/ml)，低濃度組0.05ml(實驗試劑濃度為10nmol/ml)，瘢痕組與正常組注射等同劑量生理鹽水，直至創(chuàng)面愈合。 2采用形態(tài)學(xué)變化及平均愈合時間，測量瘢痕厚度，HE染色，Masson染色，Van-Gieson染色比較皮膚瘢痕組織學(xué)改變。 3通過免疫組化染色（SP法）檢測TGF-β1的表達水平 結(jié)果： 1平均愈合時間結(jié)果：高濃度組、低濃度組、瘢痕組、正常組平均愈合時間為(21.15±1.46)d、(24.92±1.55)d、(27.38±1.19)d、(18.61±1.32)d，統(tǒng)計學(xué)結(jié)果表明正常組愈合時間最快（P＜0.01），高濃度組愈合時間明顯短于低濃度組和瘢痕組（P＜0.01），低濃度組愈合時間明顯短于瘢痕組（P＜0.01），瘢痕組愈合時間最長（P＜0.01）。（見Table1） 2瘢痕測量結(jié)果：高濃度組、低濃度組、瘢痕組、正常組四組結(jié)果分別為(1.70±0.07)mm、(1.98±0.07)mm、(2.66±0.06)mm、(1.25±0.05)mm，統(tǒng)計學(xué)結(jié)果表明瘢痕組明顯大于高濃度組和低濃度組（P＜0.01），低濃度組明顯大于高濃度組（P＜0.01），正常組最�。≒＜0.01）。（見Table2） 3HE染色 瘢痕組真皮層明顯變厚,為周邊正常真皮層厚度的3～4倍,可見膠原纖維粗大，排列紊亂，膠原纖維束形成大量結(jié)節(jié)樣結(jié)構(gòu)，其間有大量炎性細胞浸潤及毛細血管擴張。（見Fig.2.4） 高濃度組真皮層輕度增厚,可見少量膠原纖維粗大，排列較整齊，偶見結(jié)節(jié)樣結(jié)構(gòu)，其間可見炎性細胞浸潤及毛細血管擴張。（見Fig.2.2） 低濃度組真皮層增厚,可見膠原纖維粗大，排列較紊亂，可見少量膠原纖維束形成的結(jié)節(jié)樣結(jié)構(gòu)，其間有炎性細胞浸潤及毛細血管擴張。（見Fig.2.3） 正常組中，真皮層略顯增厚，膠原纖維界限清晰，膠原排列致密，結(jié)構(gòu)平整，彈性纖維減少，未見炎性細胞浸潤及毛細血管擴張。（見Fig.2.1） 4Masson染色 Masson膠原纖維染色結(jié)果：膠原纖維呈藍色。 瘢痕組真皮層可見大量排列紊亂，粗大的深藍色膠原纖維，可見大量成纖維細胞，呈梭型。（見Fig.3.4） 高濃度組真皮層藍色膠原纖維染色相對淡淺，排列稀疏整齊，成纖維細胞數(shù)量減少。（見Fig.3.2） 低濃度組真皮層藍色膠原纖維染色較深，排列致密，，較紊亂，可見成纖維細胞。（見Fig.3.3） 正常組真皮層膠原纖維排列致密，整齊，可見少量成纖維細胞。（見Fig.3.1） 5Van-Gieson染色 瘢痕組真皮層可見少量的褐色彈性纖維與粗大的膠原纖維混雜，排列紊亂。（見Fig.4.4） 高濃度組可見少量的彈性纖維排列整齊，顏色較深。（見Fig.4.2） 低濃度組可見少量的彈性纖維排列疏松，顏色為淡褐色，和排列紊亂的膠原纖維混雜。（見Fig.4.3） 正常組褐色著染的彈性纖維在真皮層中排列致密，顏色深。（見Fig.4.1） 6免疫組化結(jié)果：TGF-β1在正常皮膚、瘢痕疙瘩的表皮及真皮中均會有陽性表達，為黃或棕黃色顆粒，主要定位于上皮基底層細胞和真皮層的成纖維細胞(Fig.5)。采用二級計分法判定結(jié)果，四組中TGF-β1的表達水平比較（Table3），TGF-β1在瘢痕組中陽性率為82．61％，高濃度組中為50.00％，低濃度組中陽性率為66.69%，正常組中為28.00％。TGF-β1四組中表達的陽性率有明顯差別(P=0.0010．05)，在瘢痕組中TGF-β1陽性率最高，隨著試劑濃度的增高，TGF-β1陽性率降低。 結(jié)論： 本研究成功建立了大鼠背部瘢痕疙瘩模型，PAI-1-RNAi干預(yù)瘢痕疙瘩后改善其瘢痕厚度，愈合時間，病理形態(tài)學(xué)也有所改善。同時TGF-β1在瘢痕組表達的陽性率明顯高于正常組，且隨著試劑濃度的增高，TGF-β1在低濃度組、高濃度組表達的陽性率逐漸下降，說明TGF-β1是參與瘢痕疙瘩形成機制中的重要細胞因子，PAI-1有可能正調(diào)節(jié)TGF-β1的表達。PAI-1有可能通過正調(diào)節(jié)TGF-β1抑制瘢痕組織的形成。
【關(guān)鍵詞】：瘢痕疙瘩 纖溶酶原激活抑制劑-1 轉(zhuǎn)化生長因子-β1 小干擾RNA 免疫組化
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R751
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-13
• 材料與方法13-18
• 結(jié)果18-20
• 附圖20-28
• 附表28-30
• 討論30-34
• 結(jié)論34
• 參考文獻34-37
• 綜述37-48
• 參考文獻44-48
• 致謝48-49
• 個人簡歷49

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 方方;趙亮;吳信峰;錢革;;手術(shù)加綜合療法治療瘢痕疙瘩的臨床觀察[J];臨床皮膚科雜志;2006年04期

  本文關(guān)鍵詞：PAI-1-RNAi對SD大鼠瘢痕組織及轉(zhuǎn)化生長因子-β1的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：360599